神经营养和神经损伤保护活性物质筛选研究

【摘要】： 目的:构建有效便捷的细胞模型筛选具有神经营养和(或)神经损伤保护的活性物质。利用所建模型对部分贵州中药及民族药粗提物及化合物进行神经营养和神经损伤保护活性筛选,寻找具有神经营养和(或)神经损伤保护的活性物质,为进一步开展对贵州中药及民族药进行神经营养和神经损伤保护活性物质研究提供方法学保障和实践经验。研究方法:大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(rat pheochromocytoma cells, PC12)具有较高的稳定性和同质性,分化程度高,对神经生长因子(Nerve Growth Factor,NGF)有较强的反应,生长出神经突起,被广泛应用于有关神经细胞分化和功能的各种研究。本工作利用PC12以上特点构建以下细胞模型1)促神经细胞分化小分子活性物质的筛选模型,2)抗过氧化氢损伤PC12细胞模型,3)抗β-淀粉肽损伤PC12细胞模型,4)抗谷氨酸损伤PC12细胞模型。通过考察不同的细胞密度、损伤物质的浓度、及损伤物质的作用时间等方面对PC12细胞的影响,选择合适的实验条件。通过对模型条件的优化为开展大规模样品筛选提供简便有效的方法。筛选实验前先通过MTT法评价各样品在预设浓度下对PC12细胞生长的抑制程度,再通过过氧化氢、β-淀粉肽、谷氨酸致PC12细胞损伤模型评价样品对过氧化氢、β-淀粉肽、谷氨酸损伤的抑制作用,有利于对样品的活性作出全面、客观、准确的评价及筛选出有效低毒的活性物质。结果:本工作成功复制促神经细胞分化小分子活性物质的筛选模型、抗过氧化氢损伤PC12细胞模型、抗β-淀粉肽损伤PC12细胞模型、抗谷氨酸损伤PC12细胞模型。通过对实验条件的优化确定了模型条件。利用所建模型对314个样品进行了促神经细胞分化活性筛选,筛选出37个活性样品;对205个样品进行了抗过氧化氢损伤PC12细胞活性筛选,筛选出149个活性样品;对35个样品进行了抗β-淀粉肽损伤PC12细胞活性筛选,筛选出17个活性样品;对34个样品进行了抗谷氨酸损伤PC12细胞活性筛选,筛选出27个活性样品。结论:所构建模型稳定性较好,可操作性强,便捷有效。为筛选具有神经营养和神经损伤保护活性物质提供了模型,为下阶段在贵州中药和民族药中开展大规模的筛选具有神经营养和神经损伤保护活性物质提供可靠的方法和实践经验。

【学位授予单位】：贵阳中医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2007
【分类号】：R741

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前10条

1	董跃伟,徐天瑞,熊郁良,徐康森;PC 12细胞定性及定量测定神经生长因子活性的新方法[J];华西药学杂志;1999年Z1期
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5	顾明,周慧芳,薛冰,牛东滨,何其华,王晓民;雷公藤单体T_(10)对Aβ1-42所致PC12细胞凋亡的抑制作用[J];生理学报;2004年01期
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3	辛萍;杜芳;;胡黄连对缺血再灌注脑组织胶质源神经营养因子的影响[J];青岛大学医学院学报;2008年02期
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8	杨红,陆小莲,赵宇红,罗少洪,陈伟强;黄豆苷元对H_2O_2诱导的PC12细胞损伤的保护作用[J];广东药学院学报;2005年03期
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10	袁芳;孙黔云;杨小生;;抗β-淀粉肽损伤PC12细胞活性物质的筛选研究[J];贵阳中医学院学报;2007年04期

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1	陈祥;钟翎;;阿尔茨海默病中β淀粉样蛋白神经毒性作用研究进展[A];2007年全国生化与生物技术药物学术年会论文集[C];2007年
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1	曹剑;巴西苏木素促进小鼠周围神经损伤修复的实验研究[D];吉林大学;2011年
2	第五永长;银思维对拟SAD大鼠脑内tau磷酸化及其O-GlcNAc修饰的调节作用及相关研究[D];北京中医药大学;2011年
3	胡玉萍;补肾化痰益智法治疗AD的理论探讨及其抗炎作用研究[D];湖北中医药大学;2011年
4	曹继刚;前列腺增生细胞信号因子表达及仙甲汤调控机制的研究[D];湖北中医学院;2003年
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7	牛英才;地黄饮子对老年性痴呆模型大鼠行为学及相关基因表达的影响[D];黑龙江中医药大学;2005年
8	任建勋;莱格注射液对脑缺血保护作用与血脑屏障调节机制的实验研究[D];成都中医药大学;2005年
9	周刚;姜黄素防治博莱霉素诱导大鼠肺纤维化作用机理的实验研究[D];北京中医药大学;2006年
10	贾晓静;雌激素与ApoE的关系及其在阿尔茨海默病中作用机制的研究[D];吉林大学;2006年

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1	刘曼;多胺类化合物WJ01对PC12细胞拟缺血性损伤的保护作用及其机制研究[D];河南大学;2011年
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1	熊文,王友联,李晓玫,裴瑾,杨翰仪;谷氨酸对原代培养海马神经细胞兴奋毒作用的研究[J];白求恩医科大学学报;1997年06期
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4	彭正午;薛昀赟;白渊翰;张娅玲;孙润珠;王化宁;谭庆荣;;齐拉西酮对PC12细胞的保护作用[J];中国神经精神疾病杂志;2010年09期
5	徐冰;林焕冰;周恒;徐江平;;白藜芦醇苷对PC12细胞氧糖剥夺损伤模型的保护作用[J];南方医科大学学报;2010年05期
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8	胡娟娟,杜冠华;药物筛选模型研究进展[J];基础医学与临床;2001年04期
9	安丽荣,金连弘,张际绯,赵育桢,傅松滨;淀粉样前体蛋白过度表达细胞模型的建立及对细胞增殖和凋亡的影响[J];中国临床康复;2005年17期
10	李熙东;赵春玉;隋汝波;高永良;赵宝东;刘兴;;辅酶Q10对多巴胺损伤的PC12细胞凋亡的影响[J];中国临床康复;2005年45期

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1	李熙东;赵宝东;赵春玉;刘玉玲;李艳芹;;辅酶Q10对多巴胺损伤PC12细胞的影响[A];解剖学杂志——中国解剖学会2002年年会文摘汇编[C];2002年
2	朱江波;张天宝;;药物ADMET中的细胞模型[A];2006年全国药物毒理学会议论文集[C];2006年
3	秦慧迪;刘兆平;;RBL-2H3细胞模型在评价药物致敏性中的应用及展望[A];2010年中国药学大会暨第十届中国药师周论文集[C];2010年
4	刘朝晖;胡海涛;马东亮;;重组人BDNF对Alzheimer病细胞模型作用的实验研究[A];解剖学杂志——中国解剖学会2002年年会文摘汇编[C];2002年
5	谢振华;刘长振;王爱民;马春;;PC12细胞中氧化还原因子-1对过氧化氢和谷氨酸损伤的不同反应[A];2007年全国药物毒理学会议论文集[C];2007年
6	环奕;宋光明;李彩娜;冀立霞;申竹芳;;靶向于GLP-1受体激动剂的药物筛选细胞模型的建立[A];全国生化与分子药理学药物靶点研讨会论文摘要集[C];2008年
7	张颖;杨艺敏;胡林森;;帕金森病细胞模型中线粒体乙醛脱氢酶前体氧化修饰水平的变化[A];中华医学会第十三次全国神经病学学术会议论文汇编[C];2010年
8	李林;朴景华;楚晉;张蘭;安文林;;中药SSY及其有效组分的植物化学研究及防治老年神经退行性疾病的药理机制研究[A];海峡两岸三地药理学学术报告会论文汇编[C];2001年
9	潘雅萍;王晓良;;钾通道调节剂高通量筛选的细胞模型[A];第八届全国生化药理学术讨论会暨第七届Servier奖颁奖大会会议摘要集[C];2003年
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1	记者　董立万;我国科学家在全球首次合成多种海洋天然产物[N];中国海洋报;2006年
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10	刘晓宇;Wnt对Connexin43表达及其功能的影响[D];复旦大学;2007年

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1	袁芳;神经营养和神经损伤保护活性物质筛选研究[D];贵阳中医学院;2007年
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10	王萍;氯化锰对PC12细胞凋亡的诱导作用及机制研究[D];武汉科技大学;2008年

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