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《昆明理工大学》 2010年
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松香生物转化产酚类化合物及其活性研究

李巧峰  
【摘要】:生物转化技术以其反应的高效率性、高选择性、无毒、无污染、低能耗等优点而成为目前生物科学领域研究的热点,并已迅速发展应用到生活生产的各个领域和部门。本研究基于云南省丰富的松香资源和生物转化生产药物发展的现状,从云南省思茅地区采集松林腐殖质分离纯化真菌菌株,以松香为底物,利用生物转化技术对其进行转化,并对其转化产物进行分离纯化,活性检测,得到高活性的化合物。 本实验从采集的样品中分离纯化得到91株真菌,对其中47株进行生物转化和活性跟踪,通过初筛,实验结果显示有25株菌株的转化产物粗体物对革兰氏阴性菌(大肠杆菌)和革兰氏阳性菌(金黄色葡萄球菌、巨大芽孢杆菌、蜡样芽胞杆菌和枯草芽孢杆菌)有不同程度的抑制作用,抑菌效果显著的有12株。经过复筛,选择抑菌效果最好的菌株A5+为最终的转化菌株,通过形态鉴定和分子鉴定,最终确定转化菌株A5+为毛霉菌亚门(Mucoromycotina)、毛霉目(Mucorales)、毛霉科未定种(Mucorales incertae sedis)、Umbelopsis属。接着对其转化条件进行了初步优化,确定了最佳的转化条件为底物浓度5.0g/L,助溶剂乙醇为培养基体积分数的3%,初始PH为6,转速140-180 rpm,温度28℃,转化时间5 d。 在最佳反应条件下,利用目标转化菌株A5+进行大量振荡培养,通过活性跟踪,积累转化产物粗体物浸膏,经过醇沉法和多级萃取法,使用薄层层析、柱层析和高效液相色谱分析技术进行分离纯化,最后得到两个化合物SX-1和SX-2,通过核磁共振和质谱等分析技术,对其结构解析,得知均是酚类化合物,且可能化合物SX-2是SX-1的代谢产物。查阅文献,未曾有化合物SX-1的报道,初步证实化合物SX-1是新化合物。进一步对两个化合物活性进行检测,发现二者对试验中的革兰氏阴性和阳性菌均有较强的抑制作用,且得到了各自的最小半抑制浓度;对Hela肿瘤细胞也有很好的抑制能力。 最后对转化产物(酚类化合物)的产生和活性及应用进行了初步的分析讨论,展望了生物转化松香生产酚类药物及其工艺的前景,以期为松香衍生物和酚类化合物的进一步研究提供有用的参考。
【学位授予单位】:昆明理工大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:TQ351.1

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