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《昆明理工大学》 2019年
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陈化烟叶微生物区系的检测与应用研究

孙万万  
【摘要】:已有研究表明微生物在植物陈化过程中起关键作用,然而目前的研究仅关注功能性菌株,尚无从微生物区系角度进行系统研究的报道,本研究以典型的陈化植物—烟草为对象开展了烟草陈化微生物区系的收集、扩增、评价及应用研究。选取在玉溪陈化、等级为WDC3F的K326烟叶为材料,探索和优化了陈化烟叶微生物区系的收集方法,建立了以SDS为助分离剂的收集方法,收集率比传统方法提高了约6倍。根据烟草陈化的营养环境,论文系统探索了增殖烟草细菌区系的培养条件,研究表明:在15℃,使用添加了烟叶浸出液的改良LB培养基不仅可使烟叶表面细菌区系的菌量扩增约100倍,而且可以较好地保留细菌区系的完整性。同时,研究对扩增前后的细菌区系多样性进行了评价和分析,研究表明:可培养细菌中,在属水平上,细菌区系扩增前后无明显变化,均为芽孢杆菌属(Bacillus spp.)和亚特兰杆属(Atlantis spp)细菌,但在种的水平上,细菌区系的增殖使Atlantibacter hermannii细菌缺失了;同时开展的免培养分析表明,增殖前的陈化烟叶表面细菌区系包括了变形菌门(Proteobacteria)、拟杆菌门(Bacteriodetes)、厚壁菌门(Firmicutes)及放线菌门(Actinobacteria),而扩增后仅保留了变形菌门(Proteobacteria)和拟杆菌门(Bacteriodetes),表明细菌区系在扩增前后产生了明显差异。在应用研究中,我们将扩增的细菌区系以2%浓度(V/M)应用到了产地为红河的不同等级的K326烟叶的人工促陈化研究中(陈化条件:24℃、湿度65%),同时对陈化烟叶的酶活、常规化学成分及感官质量进行了分析与评价。研究表明:细菌区系添加组,各种酶活普遍得到了提高,其中蛋白酶酶活提高了约81%;烟叶化学成分分析也表明细菌区系的添加使烟叶中总糖、还原糖、淀粉和植物总碱的降解速率得到了加强,降解速率分别比对照组提高了4.6、3.17、1.04和8倍;感官质量评吸结果表明,细菌区系的添加确实明显提高了烟叶的品质。论文从烟草陈化表面微生物区系的收集开始,系统开展了细菌区系的扩增、评价及促烟叶人工陈化的研究。证明了烟草陈化表面微生物区系的扩增和应用可以有效提高烟叶陈化的速度和品质,为微生物区系在促植物陈化应用方面进行了有益的探索。
【学位授予单位】:昆明理工大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2019
【分类号】:Q93

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