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《昆明理工大学》 2005年
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一种抗艾滋活性植物多糖制备工艺的研究

李运龙  
【摘要】:多糖在自然界蕴藏非常丰富,广泛存在于动物、植物以及微生物中,不仅参与组织细胞骨架的构成,而且是多种内源性生物活性分子的重要组成成分。许多多糖具有增强免疫力、抗衰老、促进肿瘤细胞凋亡等多种生物活性,在生理机能的平衡与稳定过程中发挥重要的调节作用。多糖在生物、食品、医药等方面有广泛的应用前景,多糖资源的研究开发和综合利用已经成为天然药物化学、生物化学以及生物制药领域的研究热点。 我们在长期进行多糖研究的基础上,从植物中提取分离到X1多糖,实验发现该多糖的硫酸化衍生物具有很强的抗HIV活性。本论文系统地研究了该多糖的提取工艺、理化性质、硫酸化修饰工艺及其衍生物抗HIV活性,为更好的开发利用资源丰富的X1多糖提供依据。 (1) 研究了X1多糖的提取工艺,系统地考察了X1多糖提取时的提取时间、提取次数、提取溶剂原料比及除蛋白次数对多糖提取得率的影响,确定了较适合的提取工艺:提取分两次进行,第一次提取水料比为20:1,沸腾状态下提取时间为4小时;第二次提取水料比为5:1,沸腾状态下提取时间为1.5小时,此条件下粗多糖得率为8.55%;粗多糖经两次sevege法除蛋白质后,产品的蛋白质含量仅为0.53%。 (2) 通过化学方法和仪器分析方法研究X1多糖的理化性质,结果表明:X1多糖是由吡喃糖构成的中性多糖,分子量为4×10~4Da;其单糖组成摩尔比为葡萄糖:木糖:阿拉伯糖:半乳糖=1:1.37:1.31:1.46:初步推测X1多糖有1→6(或非还原末端)、1→4和1→3三种糖苷键,其比例为0.5:0.25:0.25。 (3) 采用响应表面正交实验设计以及STATGRAPHICS plus 5.1数据分析软件研究X1多糖硫酸化修饰工艺,系统地考察了各因素的一次、二次及其交互作用对多糖硫酸化的影晌.建立了相应的数学模型,为反应产物硫含量优化提供依据。 (4) 采用细胞培养体外实验方法研究X1多糖硫酸化衍生物的抗HIV活性,证实X1多糖经硫酸化修饰后,在体外表现出较强的抗HIV-1活性,其活性与硫含量密切相关,在取代度为1~2之间时,X1多糖硫酸化衍生物抗HIV-1活性最高(EC_(50)=0.629μg/ml),同时对正常细胞的毒性也较小(CC_(50)=8777μg/ml),其治疗指数(TI)值高达13000以上。
【学位授予单位】:昆明理工大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:TQ464.1

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