收藏本站
《昆明理工大学》 2005年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

人甲状旁腺激素在大肠杆菌中的表达

刘娟  
【摘要】:甲状旁腺激素(PTH)是由甲状旁腺分泌的一种重要的肽类调节激素,在机体的钙磷代谢,骨的形成、分化和发育等相关的诸多环节中起着关键性作用。甲状旁腺激素分子中含有84个氨基酸。 近年的研究表明,间歇地小剂量给予PTH可促进骨的合成代谢,因此在治疗骨质疏松方面被认为是最具前景的药物。研究表明PTH(1-34)具有与PTH(1-84)相同的生物功能。据此本研究利用基因工程生产用于治疗骨质疏松症的重组的人甲状旁腺激素(1-34)。 利用基因重组技术将人PTH(1-34)基因克隆到表达载体pThioHisA中。重组的表达载体转化到E.coli BL21(DE3)和DH5α中,经异丙醇-β-D-硫代半乳糖苷(Isopropyl-β-D-thiogalactoside,IPTG)诱导表达。得到融合表达蛋白。经条件优化后,Western-blot分析证实得到了重组人甲状旁腺激素rhPTH(1-34)。经硫酸铵沉淀法纯化后将目的蛋白作用于3T3细胞,结果显示该蛋白可以刺激细胞内cAMP的产生,表明重组的目的蛋白具有一定的生物活性。 从以上结果我们可以得出结论:本实验已经利用基因工程技术得到了具有生物活性的重组的人甲状旁腺激素,而且筛选出了一株高效表达菌株。 我们证实大肠杆菌BL21(DE3)菌株为理想的表达菌株,从中筛选出的最佳表达条件为:IPTG终浓度为0.5mM,诱导时间为4h。
【学位授予单位】:昆明理工大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:R346

手机知网App
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 于金英;;浅谈基因工程在医学领域的应用[J];中国科技信息;2011年15期
2 施新革;宗海斌;董玉珍;侯文根;梁秋冬;;神经营养因子3基因修饰的雪旺细胞对神经损伤的修复作用[J];军事医学;2011年07期
3 刘梦桃;张庆鸿;翟浚江;梁星;;壳聚糖-人骨形态发生蛋白-2纳米粒基因载体的构建分析[J];四川大学学报(医学版);2011年04期
4 王平;;要长寿就得接纳肿瘤[J];百科知识;2011年16期
5 梁伟桑;;心绞痛的基因治疗即将开展临床实验[J];心血管病防治知识;2007年11期
6 胡金花;张弘;何芳;刘晓芳;关迎;王海军;戴银燕;马晓奎;;瑞通立治疗急性脑梗死一例报告[J];求医问药(下半月);2011年03期
7 刘震泽;严惠敏;王维刚;;小鼠动物实验方法系列专题(三) 三硝基苯磺酸诱导的C57/BL6小鼠结肠炎模型的建立方法[J];中国细胞生物学学报;2011年03期
8 张立峰;;大肠杆菌的功过是非[J];知识就是力量;2011年07期
9 吴茂文;;李建民教授与纵横科研法[J];食品与健康;2002年10期
10 陈光;吴铭;王刚;孙旸;;重组人胶原蛋白肽在大肠杆菌中的高效表达[J];吉林大学学报(医学版);2011年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 丁卯章;;动物福利理论问题研究[A];林业、森林与野生动植物资源保护法制建设研究——2004年中国环境资源法学研讨会(年会)论文集(第二册)[C];2004年
2 褚志义;;基因工程与医药创新(摘要)[A];上海市老科学技术工作者协会一、二、三届学术年会论文选集[C];2006年
3 励建安;;基因工程与康复医学[A];中国康复医学会全国运动疗法学术会议暨心脑血管病康复研讨班论文汇编[C];2000年
4 苏玉安;左鉴均;;股骨头坏死修复与重建基因工程-三活疗法探讨[A];中国骨伤发展战略高层论坛暨中西医结合骨伤学术大会论文集[C];2004年
5 张上隆;;植物类胡萝卜素的生物合成及其调控[A];张上隆果树学文选[C];2006年
6 张上隆;;类胡萝卜素合成的相关基因及其基因工程[A];张上隆果树学文选[C];2006年
7 李明魁;郭菊;张遂平;;抗菌肽的研究与应用[A];河南省畜牧兽医学会第七届理事会第二次会议暨2008年学术研讨会论文集[C];2008年
8 李明魁;郭菊;张遂平;;抗菌肽的研究与应用[A];河南省畜牧兽医学会第七届理事会第二次会议暨2008年学术研讨会论文集[C];2008年
9 许锋;程水源;;植物查尔酮合成酶分子生物学研究进展及展望[A];中国园艺学会第七届青年学术讨论会论文集[C];2006年
10 赖德辉;李逊;雷鸣;曾国华;袁坚;吴文起;何永忠;何朝晖;;基因工程构建表达融合蛋白GST-FCoAT的益生大肠杆菌Nissle1917-Frc[A];第十七届全国泌尿外科学术会议论文汇编[C];2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 求索;基因工程的来龙去脉[N];医药经济报;2000年
2 王长柏;基因工程与长寿[N];中国医药报;2001年
3 农信;基因工程微生物农药受重视[N];农资导报;2006年
4 陈川;困扰基因工程的八大争议[N];大众科技报;2001年
5 杨昆;基因工程与医药革命[N];中药报;2000年
6 ;基因工程与上市公司[N];金融时报;2000年
7 见习记者 李将辉;基因工程面临四道疑难[N];人民政协报;2002年
8 方舟子;科学无禁区[N];中华读书报;2000年
9 记者 罗序文通讯员 汤波;首个禽类基因工程亚单位疫苗将批量生产[N];湖北日报;2007年
10 本报记者 王璐;长春高新控股企业新药基地破土动工[N];上海证券报;2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 郑伟;中国鲎(Tachypleus tridentatus)基因工程抗菌肽的制备及其生物活性研究[D];吉林大学;2005年
2 陈洪武;基于基因工程的机械产品设计理论与技术研究[D];山东大学;2005年
3 盛彦敏;新型DNA聚合酶的基因工程改造及应用研究[D];吉林大学;2005年
4 唐月军;纳米增韧(HA-ZrO_2系)生物复合多孔陶瓷的制备及其颌骨缺损修复实验研究[D];第二军医大学;2006年
5 陈杰;高密度培养盘基网柄菌及重组可溶性人Fas配体表达的研究[D];浙江大学;2008年
6 曲和之;ECSOD活性中心的计算机结构模拟及其实验验证[D];吉林大学;2009年
7 石峰;微生物制备γ-聚谷氨酸的研究[D];浙江大学;2006年
8 杨明;血管内皮生长因子165基因修饰后的骨髓间充质干细胞移植于缺血心肌的实验研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2006年
9 庞华;肺腺癌人源噬菌体单链抗体制备及其在荷人肺腺癌裸鼠模型中的放免显像[D];重庆医科大学;2008年
10 谢翎;球孢白僵菌抗逆相关功能基因克隆与基因工程菌株构建研究[D];安徽农业大学;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王瑞;重组疟疾疫苗PfCP-2.9单克隆抗体的制备与特性分析[D];第二军医大学;2005年
2 刘娟;人甲状旁腺激素在大肠杆菌中的表达[D];昆明理工大学;2005年
3 田晓玲;纳豆激酶基因转化生菜的初步研究[D];兰州大学;2007年
4 彭洪海;鱼类抗菌肽基因的克隆与表达研究[D];南昌大学;2007年
5 龚瑾;组织生态学在中国建筑企业质量管理中的运用研究[D];重庆大学;2008年
6 张金鑫;代谢木糖产乙醇的酿酒酵母重组菌株的初步构建[D];首都师范大学;2009年
7 刘辉;鸟苷工程菌的构建及其发酵条件的初步研究[D];天津科技大学;2005年
8 刘辉;鸟苷工程菌的构建及其发酵条件的初步研究[D];天津科技大学;2005年
9 胡玲玲;CD86人—鼠嵌合抗体的构建、表达及其生物学活性的初步研究[D];苏州大学;2008年
10 孙娜娜;人源性抗大疱性类天疱疮抗原BP180单链抗体的构建、表达及纯化[D];第四军医大学;2009年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026