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《云南农业大学》 2017年
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干巴菌多糖的分离提取、纯化及其抗氧化活性研究

张岚  
【摘要】:多糖因其具有调节人体免疫机制、抗衰老等活性而成为当今国内外研究的热点,野生干巴菌是云南珍稀食用菌之一,含有多糖。但截止目前,关于干巴菌多糖的提取、纯化以及结构鉴定等研究却极少见报道。本研究以野生干巴菌为实验原料,对干巴菌多糖的提取工艺进行优化,将经初步提取出的干巴菌多糖进行脱蛋白、分离纯化以及结构的初步分析,然后评估干巴菌多糖的抗氧化活性。主要研究结果如下:1.探讨四种对干巴菌多糖粗提物的提取工艺:传统热水法提取、碱液提取、超声波辅助提取以及复合酶辅助提取。4种干巴菌提取工艺的提取率分别为8.18±0.091(%)、13.89±0.945(%)、8.79±0.603(%)、17.12±0.721(%)。通过对干巴菌多糖提取率的比较,复合酶辅助提取有利于干巴菌多糖的有效溶出。对复合酶法提取干巴菌多糖进行响应面优化,结果表明:在复合酶浓度为0.47%,酶解时间64min,料液比为1:40mg/L的条件下,干巴菌多糖提取率为17.55%。2.对干巴菌脱蛋白的工艺进行优化选择,并对其进行分离纯化及结构的初步分析。比较木瓜蛋白酶法、Sevage法以及木瓜蛋白酶结合Sevage法3种脱蛋白的方法对干巴菌多糖的蛋白清除率以及多糖保留率的影响。结果表明,采用复合酶法结合Sevage法进行脱蛋白的效果最佳,蛋白脱除率高达71.25%,多糖保留率为91.36%。将脱蛋白后的多糖经DEAE-52和Sephadex G-100凝胶色谱柱分离纯化得到干巴菌纯多糖。3.干巴菌多糖经纯化后,利用HPLC测定分析单糖组成,结果表明单糖由甘露糖、葡萄糖、半乳糖和木糖四种组成,含量分别为0.17mg/g、0.21mg/g、0.95mg/g、0.33mg/g。利用红外光谱分析得出干巴菌多糖中含有吡喃环的糖苷键。4.以干巴菌粗多糖、干巴菌纯多糖作为试验对象,维生素C为阳性对照,测定比较其体外抗氧化活性;结果表明干巴菌多糖的抗氧化活性均随着浓度的增大而增强,且干巴菌纯多糖的抗氧化活性更佳。
【学位授予单位】:云南农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2017
【分类号】:TQ281

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