收藏本站
《云南农业大学》 2009年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

四种食用菊属植物再生体系建立和‘银龙须’原生质体培养研究

赵大克  
【摘要】: 本文以‘银龙须’(Dendranthema morifolium Tzvel. cv.‘Yinlongxu’)、‘久米城’(Dendranthema morifolium Tzvel. cv.‘Jiumicheng’)、‘杭白菊’(Dendranthema morifolium Tzvel. cv.‘Hangbaiju’)和‘菊花脑’(Dendranthema nankingense Hand.)等四种食用菊属植物为研究材料,系统研究了其快繁体系及‘银龙须’原生质体培养中多种因素的影响,主要结果如下: (1)以温室材料为外植体时,各材料达到最佳再生和增殖系数的培养条件分别为:‘银龙须’以茎段为外植体,培养基为MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.1mg/L;‘久米城’以茎尖为外植体,培养基为MS+6-BA4.0mg/L+NAA0.1mg/L;‘杭白菊’和‘菊花脑’均适合以茎段为外植体,前者培养基为MS+6-BA4.0mg/L+NAA0.2mg/L;后者培养基为MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.1mg/L;采用无菌苗器官为外植体时,以叶柄的增殖频率为最高达6.95,而叶片愈伤诱导效果好,MS9有益于愈伤组织增殖,来源于茎段和叶柄的愈伤组织再生能力强,而根尖诱导的愈伤组织无再生能力。 (2)‘银龙须’无菌苗叶片适于原生质体游离;在人工气候箱中生长30d的无菌苗叶片所游离的原生质体的分裂频率达48.2%;酶液成分为600mg/L MES、4g/L肌醇、0.55mol/L甘露醇、纤维素酶和果胶酶的浓度分别为4×103 mg/L和0.25×103 mg/L;酶解温度为25℃酶解时间为15h,为30℃时为6h; 25%的蔗糖溶液适宜于原生质体纯化合收集。 (3)不同处理可改变原生质体生理状态,提高‘银龙须’原生质体培养效果。激素预处理可提高原生质体分裂频率及细胞团形成率,但从生长在MS中的无菌幼苗分离所得到原生质体后续分裂能力强,褐化频率低;游离前将材料2℃处理4d后可提高原生质体分裂频率及细胞团率,加速愈伤组织形成;游离后30℃处理3d可提高原生质体分裂频率及细胞团形成率;酶解前黑暗1d处理有效提高质膜稳定性并可降低褐化频率;而13%-甘露醇溶液预处理可大幅提高原生质体稳定性和细胞团形成率。 (4)‘银龙须’原生质体适宜的培养方式为双层培养,培养皿直径大小为9cm,液体培养基以8ml为宜,‘银龙须’培养密度为1×105个/ml时原生质体分裂频率达到最大值45.6%,培养10d添加降渗培养基后,继续暗培养1周再转入光照下培养,对细胞团生长和增殖效果最好。 (5)不同培养基组分对‘银龙须’原生质体培养效果有不同影响。以1/2MS为基本培养基,附加50 mg.L-1抗坏血酸(VC)、333mg.L-1Cacl2、1×104 mg.L-1蔗糖、600 mg.L-1 2-N-吗啉乙烷磺酸(MES)、100mg/L聚乙烯吡咯烷酮(PVP)。试验表明,适宜的渗透压稳定剂为0.15mol.L-1甘露醇、葡萄糖0.4mol.L-1,附加肌醇4000mg.L-1可提高细胞团形成频率,但其存在褐化效应。高浓度NH4+导致细胞团褐化,用200 mg.L-1水解酪蛋白及400 mg.L-1谷氨酰胺替代NH4+,对提高菊花叶肉原生质体分裂频率、细胞团形成率及降低褐化均有显著效应。Mg2+使首次分裂时间提前,提高原生质体分裂频率。适宜的激素浓度为0.1mg.L-12,4-D, 1 mg.L-1NAA和0.1 mg.L-16-BA。所得的愈伤在MSB附加0.1 mg.L-16-BA, 0.5 mg.L-12,4-D的培养基中得到再生植株,再生频率为7.69%,在附加0.1 mg.L-12,4-D,1.0 mg.L-1NAA, 0.1 mg.L-16-BA的培养基中获得再生根,根分化频率为15.4%。 (6)褐化是影响‘银龙须’原生质体培养成功与否的关键之一,生理状态、培养密度、激素种类、渗透压稳定剂、渗透压大小、培养方式、NH4+浓度、肌醇、培养温度、光照等因素均与褐化相关。
【学位授予单位】:云南农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:S649

手机知网App
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 孙晓梅;王晶;罗凤霞;杨宏光;孙素芬;;“索蚌”百合原生质体分离及培养的研究[J];北方园艺;2007年10期
2 吕晋慧,吴月亮,孙磊,高亦珂,张启翔;菊花叶片不定芽再生体系的研究[J];北京林业大学学报;2005年04期
3 闫桂琴,张伟,张艳芳,张育盛,宋安平,侯娟娟,程小丽,张连水;翅果油树脱毒试管苗的组织培养技术研究[J];西北植物学报;2003年07期
4 赵军良,逯保德,梁爱华,赵美华;大白菜原生质体培养再生体系的优化[J];西北植物学报;2005年03期
5 陈发棣,赵宏波,房伟民,郭维明;菊科植物原生质体研究进展[J];西北植物学报;2005年09期
6 周春江,李卫东,葛会波;草莓悬浮细胞原生质体培养再生愈伤组织[J];果树学报;2003年04期
7 陆荣生,韩美丽;木本植物原生质体培养研究进展[J];广西林业科学;1998年04期
8 黄丹莹;江贵波;;植物组织培养褐变产生的因素及对策[J];广西轻工业;2006年05期
9 赵颖,梁海曼;植物原生质体培养及有关生理基础问题[J];广西植物;1994年01期
10 王栋;买合木提·克衣木;玉永雄;胡艳;;植物组织培养中的褐化现象及其防止措施[J];黑龙江农业科学;2008年01期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 贺辉;贾春林;盛亦兵;陈本建;;草木樨愈伤组织的诱导及其原生质体的制备[J];山东农业科学;2008年04期
2 崔美;焦其庆;陈学森;陈晓流;;苹果叶片愈伤组织的诱导培养[J];山东农业科学;2012年03期
3 江力;孔小卫;吴晓杰;李少松;;烟草原生质体的分离纯化[J];安徽大学学报(自然科学版);2006年06期
4 张国强;翟秋喜;;我国植物组培技术的发展及展望[J];安徽农业科学;2006年16期
5 马占强;刘素云;侯电云;林良斌;;甘蓝型油菜与紫罗兰融合体培养的影响因素研究[J];安徽农业科学;2006年20期
6 王慧霞;王永伟;何松林;李高燕;;观赏植物离体快繁技术的研究现状与进展[J];安徽农业科学;2008年13期
7 张智;邵菊芳;滕婷婷;张明;;抗氧化剂对银杏愈伤组织褐变的影响[J];安徽农业科学;2008年30期
8 吴春霞;;植物细胞悬浮培养的影响因素[J];安徽农业科学;2009年01期
9 卢龙斗;李爱花;彭仁海;高武军;邓传良;周娜;杨绪勤;;茶菊再生体系及其卡那霉素筛选体系的建立[J];安徽农业科学;2009年21期
10 龚晓洁;;几种防褐剂对马铃薯愈伤组织培养褐化现象的抑制效应[J];安徽农业科学;2009年22期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 吴林;薛建平;;半夏组织细胞培养的研究概况[A];现代农业理论与实践——安徽现代农业博士科技论坛论文集[C];2007年
2 周燕;丛日晨;高述民;邢越;;观赏菊花的分类研究[A];2011北京园林绿化与生物多样性保护[C];2011年
3 张根发;李春喜;;小麦原生质体培养影响因素的研究[A];第一届全国青年作物栽培作物生理学术会文集[C];1993年
4 熊兴耀;龙岳林;甘霖;;菊花原生质体培养及植株再生[A];中国科学技术协会第二届青年学术年会园艺学论文集[C];1995年
5 吕长平;郑玉生;石雪晖;张秋明;杨国顺;邓建平;;草莓原生质体的培养和植株再生[A];中国园艺学会第四届青年学术讨论会论文集[C];2000年
6 沙广利;宫象晖;黄粤;邵永春;李凌;束怀瑞;;苹果无融合生殖型矮化砧木研究进展[A];中国园艺学会第七届青年学术讨论会论文集[C];2006年
7 郭方其;丁晓瑜;朱金庆;林森洪;黎侠;;东方百合试管鳞茎生产技术研究[A];2007年中国园艺学会观赏园艺专业委员会年会论文集[C];2007年
8 朱向涛;王雁;彭镇华;律春燕;;牡丹幼嫩花瓣愈伤组织诱导及芽的分化[A];中国观赏园艺研究进展(2010)[C];2010年
9 牛雅静;李青;戴思兰;;切花菊‘神马'和‘黄秀芳'成熟花瓣再生体系的建立[A];中国观赏园艺研究进展(2010)[C];2010年
10 吴秀兰;唐文武;;柑桔组织培养研究进展[A];科技与创新——广东园艺科技论文集(广东省园艺学会第九次会员大会暨学术研讨会论文集)[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 田壮;食品中甾体激素残留免疫分析技术与方法研究[D];江南大学;2010年
2 关正君;樱桃番茄的HBsAg基因转化及其突变体特性研究[D];西北大学;2011年
3 蔡肖;青杨原生质体培养及叶片离体染色体加倍研究[D];北京林业大学;2011年
4 胡丽松;棉花体细胞胚胎发生相关基因GhHmgB3的克隆及功能分析[D];华中农业大学;2011年
5 桑稳姣;原生质体融合高效反硝化菌及其脱氮研究[D];华中科技大学;2010年
6 仲崇禄;木麻黄遗传变异规律的研究[D];中国林业科学研究院;2000年
7 熊兴耀;苎麻体细胞杂交研究[D];湖南农业大学;2000年
8 吉前华;小麦(Triticum aestivum L.)幼穗愈伤组织形成和植株再生能力的基因型变异及其遗传基础的研究[D];四川农业大学;2001年
9 刘昱辉;植物油体表达体系的建立及Profilin2维管束特异表达启动子的区段缺失分析[D];中国农业科学院;2001年
10 金红;三种豆科牧草的原生质体培养及体细胞杂交[D];西北大学;2002年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 孙源蔚;中国李‘Nubiana’愈伤组织诱导、保存及植株再生研究[D];华中农业大学;2010年
2 谭雯雯;猪β-防御素2多克隆和单克隆抗体的制备及初步应用[D];华中农业大学;2010年
3 贾明良;三叶半夏(Pinellia ternata(Thunb.)Breit.)组培标准化研究及生物反应器扩繁[D];浙江理工大学;2010年
4 徐谦;拟南芥原生质体诱导愈伤组织的研究[D];山东农业大学;2010年
5 赵艳燕;桑树组培快速繁育、脱毒及原生质体分离技术的研究[D];山东农业大学;2010年
6 杨茹;大蒜原生质体融合与培养技术研究[D];山东农业大学;2010年
7 陈鹏彦;朝鲜野菊再生系统建立的研究[D];辽宁师范大学;2010年
8 刘昕;胀果甘草原生质体游离与培养体系的研究[D];甘肃农业大学;2010年
9 刘满杏;人源轮状病毒在胡萝卜中的表达[D];甘肃农业大学;2010年
10 周全伟;腈水合酶在大肠杆菌中的表达与纯化[D];江西师范大学;2010年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 杨进;我国苹果矮化砧木选育概况及今后育种方向[J];山东农业科学;1995年01期
2 陈菲,李黎,宫伟;植物组织培养的防褐化探讨[J];北方园艺;2005年02期
3 赵伶俐;葛红;范崇辉;印芳;李秋香;周玉杰;;不同光照强度对蝴蝶兰组培中外植体褐化的影响[J];北方园艺;2006年04期
4 姚丽娟;徐晓薇;林绍生;陈中林;陈义增;;洋兰组培快繁褐变抑制因子探讨[J];北方园艺;2006年04期
5 罗晓芳,田砚亭,姚洪军;组织培养过程中PPO活性和总酚含量的研究[J];北京林业大学学报;1999年01期
6 姚洪军,罗晓芳,田砚亭;植物组织培养外植体褐变的研究进展[J];北京林业大学学报;1999年03期
7 张根发,高晓光,梁前进,David Mills;“好好芭”种子实生苗茎节无性系建立及其遗传差异[J];北京师范大学学报(自然科学版);2000年01期
8 伍怀北;;浩浩巴的经济价值及栽培技术[J];中国林副特产;1991年02期
9 张毅功,陈欣;人工种植爬山虎绿化荒山研究简报[J];河北农业大学学报;1999年04期
10 何晓明,王鸣,王喆之;辣椒子叶原生质体分离条件的研究[J];西北植物学报;1997年01期
中国重要会议论文全文数据库 前1条
1 许传俊;李玲;;蝴蝶兰叶外植体褐变发生机理研究[A];中国植物生理学会第九次全国会议论文摘要汇编[C];2004年
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 李文彬;陈之征;张大卫;陈正华;;芥菜子叶原生质体愈伤组织的形成及形态发生[J];Journal of Integrative Plant Biology;1985年03期
2 陈志贤;李淑君;岳建雄;焦改丽;刘少翔;佘建明;吴敬音;王海波;;从棉花胚性细胞原生质体培养获得植株再生[J];Journal of Integrative Plant Biology;1989年12期
3 唐选明;郑企成;;小黑麦原生质体的植株再生[J];核农学通报;1991年06期
4 陈季楚,王六发,陈利萍,游树鹏;叶片的生理状态及添加物对大麦叶肉原生质体培养的影响[J];作物学报;1995年02期
5 何晓明,王鸣;辣椒子叶原生质体培养和植株再生[J];园艺学报;1997年03期
6 周晓馥,徐宏伟,吴秀杰,孙颖;生物技术在林木的应用现状[J];农业与技术;1997年01期
7 刘伟强;;桑树原生质体游离与培养[J];中国蚕业;2006年02期
8 孙雪梅;;马铃薯原生质体培养研究进展[J];黑龙江农业科学;2011年01期
9 李乐工;;人参原生质体培养再生愈伤组织[J];Journal of Integrative Plant Biology;1989年10期
10 易干军,唐小浪,彭成绩,李志强,吴绍彝;柑桔原生质体培养的影响因子研究[J];广东农业科学;1997年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 祁新;赵颖君;顾德峰;邬信康;;马铃薯原生质体培养及植株再生[A];中国马铃薯学术研讨文集(1996)[C];1996年
2 王丽莉;贾敬芬;;小麦原生质体培养[A];中国细胞生物学学会第五次会议论文摘要汇编[C];1992年
3 付春华;郭文武;邓秀新;;温州蜜柑原生质体培养高频再生体系的建立[A];全国作物细胞工程与分子技术育种学术研讨会论文集[C];2003年
4 戴朝曦;;提高马铃薯原生质体培养效率的研究[A];中国细胞生物学学会第五次会议论文摘要汇编[C];1992年
5 齐放军;贾敬芬;;抗氧化剂对苜蓿原生质体早期培养阶段的影响[A];中国细胞生物学学会第五次会议论文摘要汇编[C];1992年
6 毛雅妮;杨国锋;孙娟;张德罡;;苜蓿原生质体培养研究进展[A];农区草业论坛论文集[C];2008年
7 雷建军;郭余龙;贾敬芬;;影响菜用芥菜原生质体培养和植株再生的因素及PAL活性与分化的关系[A];中国细胞生物学学会第五次会议论文摘要汇编[C];1992年
8 金红;贾敬芬;;三种豆科牧草的原生质体培养及体细胞杂交[A];中国植物学会七十周年年会论文摘要汇编(1933—2003)[C];2003年
9 肖望;黄霞;戴雪梅;赵杰堂;黄学林;;香蕉(Musa spp.)原生质体培养及体细胞杂交的研究[A];2007中国植物生理学会全国学术会议论文摘要汇编[C];2007年
10 李继胜;贾敬芬;;党参原生质体培养中体细胞胚胎直接发生和植株再生[A];中国细胞生物学学会第五次会议论文摘要汇编[C];1992年
中国重要报纸全文数据库 前3条
1 记者龚达发;湖北:科技支撑退耕还林[N];人民日报;2002年
2 ;蓬勃发展的河北省农林科学院[N];河北日报;2008年
3 王贤原;我国牧草育种水平大幅提高[N];中国畜牧报;2003年
中国博士学位论文全文数据库 前9条
1 蔡肖;青杨原生质体培养及叶片离体染色体加倍研究[D];北京林业大学;2011年
2 金红;三种豆科牧草的原生质体培养及体细胞杂交[D];西北大学;2002年
3 李玉珠;苜蓿与百脉根原生质体培养及体细胞杂交的研究[D];甘肃农业大学;2012年
4 潘增光;苹果原生质体培养再生及融合研究[D];华中农业大学;1998年
5 袁华玲;二倍体马铃薯原生质体培养及体细胞杂交的研究[D];中国农业科学院;2008年
6 杜丽;香樟体胚发生途径的植株再生体系的建立以及农杆菌介导遗传转化的初步研究[D];华中农业大学;2005年
7 孙玉强;棉花原生质体培养和原生质体对称融合研究[D];华中农业大学;2005年
8 杨细燕;棉花原生质体不对称融合研究及原生质体细胞壁重建相关基因的表达谱分析[D];华中农业大学;2009年
9 汪静儿;棉花原生质体培养与体细胞杂交研究[D];浙江大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 黄玲;结球甘蓝原生质体培养及植株再生[D];浙江师范大学;2011年
2 莫小强;罗汉果原生质体培养[D];广西师范大学;2005年
3 秦永华;软枣猕猴桃原生质体培养及基因转化研究[D];河南农业大学;2002年
4 米银法;软枣猕猴桃原生质体培养及GFP基因转化研究[D];河南农业大学;2003年
5 周肖荣;苎麻原生质体培养技术的研究[D];华中农业大学;2005年
6 姜淑慧;甘蓝型油菜与播娘蒿的原生质体融合研究[D];南京农业大学;2006年
7 赵小强;草地早熟禾原生质体培养及体细胞杂交[D];甘肃农业大学;2009年
8 王令刚;棉花原生质体培养与融合[D];华中农业大学;2007年
9 张娜;苎麻原生质体培养技术研究[D];华中农业大学;2007年
10 张芬;大蒜种质资源的形态学评价、愈伤诱导再生和原生质体培养[D];浙江大学;2008年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026