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《昆明医学院》 2011年
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人精液凝固蛋白Ⅰ衍生合成肽在不同PH值及Zn~(2+)浓度下的抗菌活性研究

何仁松  
【摘要】:[目的]从精浆中分离小分子抗菌肽,探讨精浆的抗菌机制。[方法]收集正常男性精液,37℃恒温液化后16000r/min离心l0min去除精子得到精浆。采用琼脂糖弥散法检测抗菌活性,采用对大肠杆菌(ATCC25922)的抗菌活性作为检测指标,通过超滤离心装置3000r/min 4℃恒温超滤离心2 h,收集小分子部份,应用反相高效液相色谱技术分离纯化多肽(RP-HPLC分离),检测各峰抗菌活性,基质辅助激光解吸质谱法检测相对分子质量,并鉴定其抗菌活性。[结果]从人精浆中分离出多个相对分子质量小于5×103的肽混合物,其中部分与精液凝固蛋白I片段相对分子质量大小一致,具有抗大肠杆菌活性。[结论]人精液液化过程中会产生多个相对分子质量小于5×103的小分子抗菌肽混合物,其可能是人精浆天然免疫机制中重要的效应分子,精液凝固蛋白I可能是其来源之一。 [目的]研究人精液凝固蛋白I衍生合成肽在不同PH值及Zn2+浓度下的抗菌活性,探讨人精液凝固蛋白工衍生抗菌肽在不同条件下的抗菌机理。[方法]在前期研究中新发现的人精液凝固蛋白工衍生肽SgI29及其衍生合成肽(SgI14、SgI19、SgI22及SgI25)具有抗菌活性的基础上,根据女性生殖道PH值,设置不同PH值及不同Zn2+浓度,通过琼脂糖弥散法抗菌试验进一步测定其在此环境下对泌尿生殖道感染常见细菌大肠杆菌标准菌株(Escherichia coli ATCC 25922)以及绿脓杆菌标准株(Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853)的抗菌活性。[结果]SgI29及其衍生合成肽(SgI14、SgI19、SgI22及SgI25)在PH值为4时,无明显抗菌活性,而在试验所设置的其它不同PH值环境下对G-菌均有较好的抑菌作用,随着浓度的降低,抗菌活性逐渐减弱。PH值为6和7时,其抗菌活性最强。在试验所设置的不同Zn2+浓度下,各培养皿中均未见细菌生长。[结论]人精液凝固蛋白I衍生肽作为精液中最重要的抗菌成分,PH值是影响其抗菌活性的重要因素之一。游离态Zn2+对大肠杆菌及绿脓杆菌具有较强的杀菌能力,人精液中Zn2+的存在形态可能影响其抗菌作用,精液中结合态Zn2+的抗菌活性值得进一步研究。
【学位授予单位】:昆明医学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R96

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【参考文献】
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