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《昆明医科大学》 2012年
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缺血后处理对大鼠小肠缺血—再灌注损伤治疗的实验机制研究

袁勇  
【摘要】:背景及目的:小肠缺血再灌注损伤(Ischemia Reperfusion Injury, IRI)是外科手术和创伤病人高发病率和死亡率的重要因素。例如在腹主动脉瘤、心肺旁路手术、绞窄性疝、新生儿坏死性小肠炎和小肠移植等肠血流量中断的情况下,IRI是非常常见的重要阶段,在败血症和低血容量性休克时,小肠I RI也经常发生。血流供应的中断造成局部的缺血损伤易于影响代谢活跃的组织,相矛盾的是,缺血组织血流恢复时将会启动一系列的事件,导致细胞进一步的损伤,即再灌注损伤。再灌注损伤的严重性往往超过了最初的缺血性损伤。在IRI中易于发生自由基介导的损伤,发生分子和生化等变化。因此,血液供应减少或中断以及随后的血供恢复将造成组织器官的严重损害,即缺血再灌注损伤(IRI) 在内脏器官中,小肠是对IRI最敏感的器官之一。缺血时容易损伤由不稳定细胞组成的肠道,随后的血液再灌注则会进一步损伤小肠粘膜细胞。有研究认为,位于绒毛的顶端肠上皮细胞对缺血敏感性增加的原因是由于其位于中央动脉的尽头,具有较低氧分压,对局部缺血较敏感。同时,小肠也是产生各种急性期蛋白和细胞炎症因子的主要场所,小肠IRI不仅会影响小肠本身,还能影响远隔器官的功能和完整性。在缺血发生起始区域的异常改变主要是影响细胞线粒体,特别是影响三磷酸腺苷(Adenosine Triphosphate, ATP)的产生,导致细胞发生缺氧性病理改变,随着缺血缺氧的进一步加重以及随之而来的再灌注损伤,小肠将产生大量的氧自由基等有害物质,损伤微血管、释放炎性细胞因子、激活补体和活化中性粒细胞。因此,小肠IRI被认为是SIRS或MODS最主要的使动因素之一 有研究表明缺血预处理(Ischemic Preconditioning, IPr)即在器官缺血前给予一次或多次短暂的缺血与再灌注处理,可减轻心、脑、小肠、肾等多种器官的IRI,但由于小肠IRI常见于肠扭转、肠系膜上动脉血栓形成、休克、器官移植术和心力衰竭等,临床上患者多在发生肠缺血后就诊,难以进行预处理,这就极大地限制了其临床应用。因此,有人研究在缺血发生后实施的缺血后处理(Ischemic Postconditioning. IPo),即在缺血后再灌注开始时立刻给予一次或多次短暂再灌注与缺血交替循环处理,可以减轻再灌注损伤,具有更好的临床应用前景。但这一新发现的内源性保护机制尚未完全阐明。 本研究通过建立大鼠小肠IRI模型,研究IPo对细菌移位、小肠病理改变、小肠粘膜线粒体形态、功能进行研究,以期为临床治疗小肠IRI提供一定的理论和实验依据,并对IPo的保护性机制做进一步研究。 方法:实验选用SPF级SD大鼠建立小肠IRI模型,采用IPr、IPo与空白对照组和IR组进行对比研究。第二章研究IPo对小肠细菌移位及病理损伤的保护作用:通过实验前给予标记的条件致病菌灌胃,实验通过对不同组别的肠外组织进行细菌移位检测,以及对小肠病理损伤分级评分来了解IPo对小肠粘膜机械屏障损伤的保护作用。第三章进行IPo对大鼠小肠IRI粘膜细胞线粒体保护作用的实验研究:线粒体作为IRI中最早也是最容易受到损伤的细胞器,同时也是细胞坏死和细胞调亡发生的中心环节。通过实验研究IPo是否可以保护线粒体的正常形态、功能及其可能的机制研究,研究内容包括:透射电镜观察大鼠小肠粘膜细胞线粒体超微形态学改变和胞内总体ROS、线粒体膜电势、线粒体质量(Mitochondrial mass)、小肠粘膜细胞氧消耗等线粒体功能指标以及进行MtDNA拷贝数及损伤率的检测。各实验数据采用对比研究方法进行统计处理。 结果:第二章:IPo能减轻小肠IRI后的细菌移位,肠外组织的细菌菌落数明显低于IR组(P0.05);而且IPo组小肠病理损伤程度也明显低于IR组(P0.05)。第三章:IPo组与IR组比较,IPo能有效抑制小肠粘膜细胞线粒体的病理损伤,对线粒体的功能具有一定的抗损伤作用,我们的实验研究具体表现在以下几个方面:1、IPo可减轻大鼠小肠IRI模型小肠粘膜细胞线粒体超微结构的损伤;2、IPo能减轻线粒体膜蛋白的氧化损伤、提高线粒体呼吸链复合物的活性,产生对小肠的保护作用;3、IPo能提高小肠IRI后ATP的合成能力;4、IPo能保护呼吸链复合物Ⅰ-Ⅳ的活性,改善线粒体呼吸功能;5、IPo能减轻线粒体膜的脂质过氧化,保护线粒体内膜的完整性,从而维持线粒体膜电势(△Ψm)的稳定性;6、IPo能减少线粒体内源性ROS的生成,减轻氧化应激反应,产生对小肠的保护作用;7、IPo能减轻由于IRI导致的小肠粘膜细胞内线粒体蛋白的表达降低,维持线粒体质量稳定;8、IPo能减轻MtDNA的氧化损伤、减少MtDNA损伤率,同时增加MtDNA拷贝数,产生对小肠的保护作用。在本研究中,IPo和IPr两种方法的保护作用相当,两者在以上各个方面与IR组比较均具有统计学差异(P0.05),IPo组及IPr组间比较没有显著性差异(P0.05)。可能的机理是两者均能对再灌注小肠粘膜细胞ROS及脂质过氧化反应产物起到抑制作用,两者均能保护小肠粘膜细胞对抗IRI。由于IPo更能在临床中应用,因此认为IPo对抗组织或器官IRI的研究及应用更具有重要的现实意义。 结论:1.IPo能有效减轻小肠IRI后的细菌移位、保护小肠粘膜的病理损伤以及减轻炎症因子释放;2.IPo能从多个方而减轻小肠IRI的粘膜细胞线粒体损伤程度,从而有效保护小肠粘膜线粒体的形态和功能,减少炎症因子及氧自由基的释放,抑制IRI对组织细胞的细胞调亡和坏死。
【学位授予单位】:昆明医科大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2012
【分类号】:R656.7;R-332

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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 牛卫博,王为忠,季刚,陈会生,罗兰;小剂量FK506预处理对大鼠小肠移植缺血再灌注损伤中细胞凋亡的影响[J];第四军医大学学报;2003年11期
2 林峥;李兴旺;刘中砥;;依达拉奉对肠部分缺血-再灌注损伤大鼠肠组织TNF-a和IL-6的影响[J];江西医药;2008年04期
3 蔡循,陈国强,陈竺,王振义;线粒体跨膜电位与细胞凋亡[J];生物化学与生物物理进展;2001年01期
4 刘井波,彭双清,阳海鹰,王国强;丁烯酸内酯对心肌线粒体呼吸链酶复合物活力的影响[J];卫生毒理学杂志;2005年01期
5 王通;曾耀英;邢飞跃;梁佩燕;;地塞米松诱导小鼠胸腺细胞凋亡中线粒体质量的变化[J];中国药理学通报;2006年05期
6 陆贝;蔡阳;;丹参与小肠缺血再灌注损伤研究进展[J];医学研究杂志;2006年08期
7 王通,曾耀英,肇静娴,林羿,梁佩燕;地塞米松介导胸腺细胞凋亡过程中线粒体和细胞结构蛋白的变化[J];中国病理生理杂志;2005年07期
8 方天翎,唐朝晖,胡元龙,夏穗生;谷氨酰胺对缺血再灌注损伤早期小肠粘膜细胞凋亡的影响[J];中国临床营养杂志;2003年01期
9 史晓峰,刘敦贵;1,6-二磷酸果糖在大鼠小肠缺血再灌注损伤中的保护作用[J];中国临床营养杂志;2003年04期
10 高昌俊;徐礼鲜;柴伟;张惠;孙绪德;张贵和;杨永慧;彭德民;;高氧液对兔肠缺血再灌注损伤的保护作用[J];中华麻醉学杂志;2005年12期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 余宏亮;于庆生;;芪黄煎剂对缺血-再灌注损伤肠黏膜上皮形态的影响[J];安徽中医学院学报;2009年03期
2 李宁;王珊;于力方;林季;廖杰;;高温诱导ECV-304细胞凋亡及对其线粒体膜电位的影响[J];标记免疫分析与临床;2007年03期
3 毕蕾;陈卫平;姜泽群;冯全服;;丹酚酸A对肝癌HepG2细胞线粒体跨膜电位的影响[J];中华中医药杂志;2012年04期
4 彭曦,尤忠义,王裴,汪仕良;不同营养支持途径对烧伤后肠源性高代谢的影响[J];肠外与肠内营养;2005年03期
5 杨云侠;;41例老年烧伤患者的护理体会[J];当代护士(学术版);2011年01期
6 李东涛,裴迎霞,祁鑫,孙桂芝;益气活血软坚解毒方含药血清诱导BEL-7402细胞内Ca~(2+)、线粒体膜电位的变化[J];第二军医大学学报;2005年06期
7 郑爱新;;线粒体与衰老研究进展[J];大理学院学报(自然科学);2006年12期
8 彭曦,冯晋斌,尤忠义,王裴,汪仕良;不同营养支持对烧伤大鼠肠上皮细胞线粒体呼吸功能的影响[J];第三军医大学学报;2003年10期
9 王通;曾耀英;何贤辉;邢飞跃;梁佩燕;贺芳;;阻断p38途径对地塞米松诱导的胸腺细胞凋亡的影响[J];第三军医大学学报;2006年16期
10 蔡斌;仇玉娟;;老年烧伤患者76例临床治疗探讨[J];第四军医大学学报;2009年22期
中国重要会议论文全文数据库 前3条
1 管霞飞;赵光举;蔡旗旗;王志翊;卢中秋;邱俏檬;洪广亮;梁欢;;溴苯腈对离体小鼠肝组织线粒体膜电位和呼吸控制率的影响及N-乙酰半胱氨酸的干预作用[A];创新创业与科学发展——瑞安市第十届自然科学优秀论文集[C];2011年
2 季宇彬;武晓丹;邹翔;郎朗;;西兰花中葡萄糖异硫氰酸盐对HepG2细胞内活性氧和线粒体膜电位的影响[A];中国生物医学工程进展——2007中国生物医学工程联合学术年会论文集(下册)[C];2007年
3 冯三畏;张义江;王振全;邓晓辉;;氯化锰对PC12细胞凋亡和线粒体跨膜电位的影响[A];第六届预防医学学术交流会论文集[C];2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 刘军;海带多糖对慢性电离辐射致雄性大鼠生殖功能损伤干预机制的探讨[D];武汉大学;2010年
2 祝海;Troglitazone抗人前列腺癌PC-3细胞作用及机制研究[D];青岛大学;2011年
3 薛美兰;褐藻糖胶对小鼠乳腺癌的体内外抑制作用及机制研究[D];青岛大学;2012年
4 李建明;线粒体在活性氧诱导肠上皮细胞凋亡中的作用[D];第三军医大学;2002年
5 李睿;稻麦淀粉胚乳细胞程序性死亡和淀粉质体的发生发育[D];华中农业大学;2004年
6 石德时;伪狂犬病毒Ea株gD基因转基因细胞系的构建及其人工感染仔猪的病理学[D];华中农业大学;2004年
7 秦绪军;线粒体微环境中ROS对细胞永生化与逆转的调控研究[D];第四军医大学;2005年
8 覃玉荣;外电场作用下悬液中细胞膜电压变化建模研究[D];华南理工大学;2005年
9 杜晓宏;肝移植术后Ref-1对缺血再灌注致肝、肾、小肠和肺细胞DNA损伤修复作用的研究[D];吉林大学;2006年
10 高昌俊;高氧液对肠缺血/再灌注致肠及远隔器官损伤的保护作用及机理研究[D];第四军医大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 马蓉;布比卡因的神经毒性以及地塞米松的保护作用[D];南京医科大学;2009年
2 解建;地塞米松对利多卡因神经毒性的保护作用[D];南京医科大学;2010年
3 郑巧芬;舒芬太尼后处理对大鼠肠缺血再灌注时肺组织损伤的影响[D];山西医科大学;2011年
4 吕梦捷;人参皂甙Rb1对小鼠免疫细胞行为影响和脑缺血再灌注损伤小鼠的免疫调节作用[D];暨南大学;2011年
5 王凤玲;手机辐射对鸡胚心血管发育的影响[D];兰州大学;2011年
6 张梅香;依达拉奉对重症急性胰腺炎大鼠肠黏膜屏障功能障碍的保护作用[D];中南大学;2011年
7 盛盼;利多卡因对幼鼠小肠缺血—再灌注肝脏损伤的保护作用[D];大理学院;2011年
8 李颖;铜绿假单胞菌上清液诱导J774细胞凋亡过程中凋亡诱导因子的表达[D];辽宁医学院;2011年
9 黄霞;不同液体复苏对失血性休克大鼠肝细胞线粒体损伤形态及功能的研究[D];石河子大学;2010年
10 张海宇;银杏叶提取物对大鼠脑出血灶周围凋亡细胞超微结构的影响[D];宁夏医科大学;2010年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 巩固,桑韩飞,张英民,陈敏,曾毅,熊利泽,劳宁;高氧液对兔脊髓缺血再灌注损伤的保护作用[J];第四军医大学学报;2003年10期
2 张润峰,李霞;丹参改善缺血再灌注血液流变学异常的作用机制研究[J];华西医学;2004年02期
3 汪仕良,黎鳌,尤忠义,邵洪,余斌,朱云;早期肠道营养对烧伤后肠源性高代谢的影响[J];解放军医学杂志;1997年01期
4 曹卫红,胡森,孙丹,白玉梅,盛志勇;肠道部分缺血-再灌注损伤诱发多器官功能障碍综合征的实验研究[J];中华急诊医学杂志;2003年10期
5 屠伟峰;肠源性MODS的治疗进展[J];临床麻醉学杂志;2003年02期
6 孙绪德,柴伟,张贵和,高昌俊,杨永慧,彭德民,赵晖,徐礼鲜;高氧液在抢救重度失血性休克中的临床应用[J];临床麻醉学杂志;2003年06期
7 柴伟,孙绪德,高昌俊,张贵和,杨永慧,张晓峰,赵晖,于代华,徐礼鲜;高氧液对失血性休克家兔循环和血清丙二醛水平的影响[J];临床麻醉学杂志;2004年02期
8 刘庆新,张苏明;急性脑出血继发缺血半暗带的研究进展[J];国外医学脑血管疾病分册;2002年03期
9 王通,曾耀英;胸腺保护与抗衰老[J];中国临床康复;2005年23期
10 刘洪英,彭双清,赵良武,吴敏,沈勇;丁烯酸内酯的脂质过氧化效应[J];中国药理学与毒理学杂志;1997年02期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 卢国富;无气腹小肠损伤诊治体会[J];中国社区医师;2002年21期
2 贾同文;杨振东;顾宝清;;创伤性小肠损伤88例分析[J];人民军医;1981年09期
3 李康土;李广荣;;小肠损伤32例分析[J];岭南急诊医学杂志;2000年03期
4 赵琪,赵利军,董淑云,马新超;大黄对肢体缺血再灌注后大鼠小肠损伤及细菌移位的影响[J];中国现代应用药学;2005年02期
5 马忠才;闭合性小肠损伤32例临床分析[J];右江医学;1995年04期
6 杨静波;80例闭合性小肠损伤的医技早期诊断及治疗[J];实用医技杂志;2002年05期
7 梅新珍;蒋利芬;;妇科腹腔镜手术中小肠损伤3例报道[J];中国微创外科杂志;2007年10期
8 李西达,王鹏志;腹部闭合性创伤并发小肠损伤51例分析[J];中国中西医结合外科杂志;1997年01期
9 刘拥军;柴养海;刘信堂;金存章;;单纯性小肠损伤51例诊治分析[J];浙江创伤外科;2006年04期
10 罗早湘;;闭合性腹部伤小肠损伤30例诊治体会[J];中国临床医生;1991年04期
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1 方莉;孟立娜;吕宾;吴炜烽;;ACE2、AngⅡ在大鼠NSAID相关小肠损伤中的表达及意义[A];第二届浙江省消化病学术大会论文汇编[C];2009年
2 孟立娜;方莉;吕宾;吴炜烽;;云母对大鼠NSAIDs相关小肠损伤的保护作用及机制研究[A];第二届浙江省消化病学术大会论文汇编[C];2009年
3 孟立娜;方莉;吕宾;吴炜烽;;云母对大鼠非甾体抗炎药相关小肠损伤的保护及对肿瘤坏死因子-α、核因子-κB的影响[A];庆祝浙江省中西医结合学会成立三十周年论文集粹2011[C];2011年
4 Peter Morris;Neil Watkins;郑伟;;Hedgehog信号传输系统在肠道再生中的作用[A];中华医学会第八次全国小儿外科学术会论文集[C];2010年
5 方莉;吕宾;孟立娜;张烁;吴炜烽;;不同药物干预防治大鼠NSAID相关小肠损伤的实验研究[A];第二届浙江省消化病学术大会论文汇编[C];2009年
6 李素云;李建生;王湘雨;刘宝君;;毒素清颗粒对内毒素小肠损伤的保护作用[A];中华中医药学会内科第十二次肺系病学术交流大会论文集[C];2006年
7 陈汉卿;吕宾;陈鸣艳;张烁;;质子泵抑制剂对NSAIDs小肠损伤大鼠HO-1表达的影响[A];第二十三届全国中西医结合消化系统疾病学术会议暨消化疾病诊治进展学习班论文汇编[C];2011年
8 艾斯卡尔;;1例外伤所致小肠破裂的法医学鉴定[A];全国第六次法医学术交流会论文摘要集[C];2000年
9 奎敬跃;;小肠损伤的诊治体会[A];玉溪市第十四届外科麻醉科学术年会论文摘要汇编[C];2004年
10 张烁;吕宾;孟立娜;晁冠群;叶咸德;陈方明;;紧密连接分子occludin在NSAIDs小肠损害中的表达研究[A];首届浙江省消化病学术大会论文汇编[C];2008年
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1 杜晓宏;肝移植术后Ref-1对缺血再灌注致肝、肾、小肠和肺细胞DNA损伤修复作用的研究[D];吉林大学;2006年
2 曹飞;富H_2溶液的辐射防护效应及其机制研究[D];第二军医大学;2013年
3 周荣斌;Toll样受体在自身耐受中的作用及机制研究[D];中国科学技术大学;2007年
4 李波;肝移植缺血再灌注损伤对肝、肾、小肠组织细胞凋亡及Bcl-2、Fas基因表达影响的实验研究[D];山东大学;2008年
5 刘菲;不同潮气量机械通气对失血性和内毒素休克兔多器官损伤的影响[D];中国医科大学;2006年
6 王剑;流感病毒感染与粘膜免疫损伤[D];中国科学技术大学;2012年
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1 裴银霞;B7-H1、B7-H3、B7-H4在正常和X射线照射后小鼠小肠中的表达变化[D];苏州大学;2013年
2 罗宜辉;吲哚美辛诱导的急性小肠损伤及奥美拉唑的预防和治疗作用[D];中南大学;2008年
3 邓昭阳;全肝缺血再灌注后小肠组织及线粒体损伤的机制及防护[D];中国人民解放军军医进修学院;2011年
4 王威;JBP485抗大鼠小肠损伤的机制及其与寡肽转运体PEPT1表达和功能变化的关系[D];大连医科大学;2011年
5 张海芹;直肠癌术后IMRT应用特殊体模膀胱自主充盈与被动充盈对小肠的影响[D];济南大学;2012年
6 任贵军;门静脉高压症大鼠经历无肝期后小肠损伤的研究[D];河北医科大学;2004年
7 郭智;三维适形放射治疗复发子宫颈癌的剂量学研究[D];山西医科大学;2008年
8 黄建锋;MT-BBCF碳纤维腹板对直肠癌术后三维适形放疗靶区和重要器官的影响及摆位误差分析[D];苏州大学;2009年
9 徐迎雪;不同剂量利多卡因对脓毒症大鼠小肠HMBG1表达的影响[D];山东大学;2012年
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