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《昆明医学院》 2004年
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分泌抗鼠疫杆菌F1抗原单克隆抗体杂交瘤株的建立

尹家祥  
【摘要】:目的:应用杂交瘤技术,制备分泌抗鼠疫杆菌F1抗原单克隆抗体的杂交瘤细胞株,让其持续性产生F1单克隆抗体,为建立鼠疫的快速诊断方法提供抗体源。 方法:用鼠疫杆菌的特异成分F1抗原免疫6~8周龄、健康的雌性BALB/c小鼠,然后检测小鼠血清中的F1抗体效价,选抗体滴度最高的小鼠用于细胞融合,融合前三天用100μg F1抗原腹腔注射加强免疫一次,然后取其脾脏细胞与处于对数生长期的SP2/0骨髓瘤细胞混合后,50%的PEG作为细胞融合剂,融合后的细胞用HAT培养液接种于96孔细胞培养板中进行选择培养,用间接ELISA法检测细胞培养上清液中的F1抗体,筛选出的F1抗体阳性杂交瘤细胞,用有限稀释法进行克隆,经过四次克隆化后获得了能稳定分泌F1单克隆抗体的杂交瘤细胞株。 结果:经过13次的细胞融合试验后,获得了三株能稳定分泌F1单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为IV1B_(12)、IV2C_(10)和IV2C_6,用间接ELISA法检测其培养上清液中的F1单克隆抗体,F1抗体滴度分别为IV1B_(12) 1:1280~1:10240、IV2C_(10) 1:2560~1:10240和IV2C_6 1:5120~1:10240。 结论:应用杂交瘤技术,成功制备了三株能稳定分泌抗鼠疫杆菌F1抗原的单克隆抗体杂交瘤细胞株,为进一步建立鼠疫快速诊断技术奠定了坚实的基础,同时也基本建立了杂交瘤技术的实验程序。
【学位授予单位】:昆明医学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:R392.1

【参考文献】
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