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钝挫伤对视网膜及体外培养Müller细胞谷氨酸含量的影响

龚敏  
【摘要】:视眼钝挫伤是由机械性钝力引起的眼外伤,是临床常见多发病,可导致视功能严重受损。其损伤机制推测与伤后兴奋性氨基酸对视网膜的毒性作用有关。 视网膜Müller细胞贯穿视网膜全层,是视网膜的主要支持细胞,构成视网膜的支架并及时转运细胞间质内多余的兴奋性氨基酸—谷氨酸,是视网膜谷氨酸代谢的关键部位。 谷氨酸是视网膜内主要的兴奋性神经递质,也是一种潜在的兴奋性毒素,过量将导致神经细胞的死亡,其毒性作用呈剂量依赖性。现认为细胞受缺血或高压的影响导致细胞缺氧可引起谷氨酸释放增多,Müller细胞对其摄取减少,共同导致细胞外谷氨酸堆积。谷氨酸通过其受体作用引起过多的Ca~(2+)内流,造成细胞内高钙负荷而导致神经细胞损伤。已有研究证实,谷氨酸的兴奋性毒性在视网膜缺血性及高眼压改变中起着重要作用,但在眼钝挫伤中的研究尚少。我们通过观察体外培养的视网膜Müller细胞撞击前后细胞外环境中谷氨酸含量的变化以及活体兔眼钝挫伤模型Ca~(2+)通道阻滞剂治疗前后视网膜谷氨酸含量的变化,为阐明谷氨酸和Müller细胞在眼钝挫伤中的作用及Ca~(2+)通道阻滞剂对眼钝挫伤的治疗价值提供实验依据。 本实验的研究成果和结论:采用分次胰蛋白酶清洗法纯化原代培养大鼠视网膜Müller细胞获得成功,该方法未见报道,可为原代培养其它细胞提供借鉴;检测Müller细胞损伤前后细胞外环境中谷氨酸含量变化,显示Müller细胞可清除外环境中的谷氨酸,但撞击后其清除能力似乎反而降低,提示体外培养的Müller细胞生物学行为与在体时有差异;国内首次观察挫伤后视网膜谷氨酸含量变化规律及与临床体征的关系,提示挫伤后谷氨酸的升高与临床体征密切相关;首次用Ca~(2+)通道阻滞剂实验性治疗眼钝挫伤,结果显示挫伤后早期应用维拉帕米可极大地降低挫伤后视网膜谷氨酸水平,为临床治疗提供了实验基础。


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