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出生前暴露于甲基对硫磷和氯氰菊酯对F_1代大鼠NMDAR1受体表达变化及DNA损伤的探讨

王静林  
【摘要】:目的:探讨出生前暴露甲基对硫磷和氯氰菊酯混配对子鼠出生后NMDAR1受体表达变化及神经细胞DNA损伤的影响。 方法:47只孕鼠随机分为4组,甲基对硫磷和氯氰菊酯的剂量分为0、1/300LD_(50)、1/95LD_(50)、1/30LD_(50)4个水平,即为0,0.0230+0.8000mg/kg BW,0.0725+2.5265mg/kg BW,8.0000+0.2300mg/kg BW。在大鼠怀孕第1天到第15天每日一次对孕鼠经口灌胃染毒。分别在子鼠出生后第7、14、21、28天每组随机抽取5只子鼠,免疫组化染色测定子鼠大脑皮层、中脑、海马NMDAR1受体蛋白的表达。并在怀孕16天取出胎鼠和出生后30天取出子鼠脑用胰蛋白酶消化,进行单细胞凝胶电泳,吖啶橙染色分析神经细胞DNA损伤。 结果:出生后7天阳性锥体细胞多集中在大脑皮层的两侧底部,其它部位也有少量存在,免疫阳性反应细胞着色较浅。14天、21天、28天子鼠脑NMDAR1受体阳性细胞广泛分布于整个大脑皮层和海马,但以顶叶皮层内侧外侧、梨状区皮层、海马、中脑黑质网状结构阳性细胞数多,细胞形态清晰,着色深。在子鼠大脑皮层外侧,仅中剂量组NMDA受体蛋白表达较对照组降低(P0.05),表明在中剂量水平下调了NMDAR1受体蛋白的表达,在海马CA1区,出生后14天的子鼠海马CA1区NMDAR1受体在高剂量组的表达低于低剂量组的受体表达(P0.01),出生后21天的子鼠脑海马CA1区NMDAR1受体在高剂量组的表达低于对照组和低剂量组的受体表达(P0.01),随着甲基对硫磷和氯氰菊酯剂量的升高,在海马CA1区的NMDA受体阳性细胞数量减少(剂量因素回归系数β_1=-0.377,P0.01),表明甲基对硫磷和氯氰菊酯混配对海马CA1区NMDAR1受体蛋白的表达有显著影响,下调了NMDA受体蛋白的表达,并存在明显的剂


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