猴脑选择性超深低温断血流复苏对脑细胞骨架蛋白影响的研究

【摘要】：【目的】 观察猴脑断血流后行脑选择性超深低温复苏对脑细胞骨架蛋白β-tubulin、MAP-2、Vimentin和GFAP表达的影响，以了解脑缺血后选择性超深低温复苏对猴脑神经元及神经胶质细胞的影响。 【方法】 健康恒河猴8只，随机分为两血管阻断冷灌注组、四血管阻断冷灌注组和常温灌注组。分离双侧颈内动静脉、颈外动静脉(四血管阻断组分离出双侧椎动脉)，右侧颈内静脉近心端插管监测中心静脉压，右侧颈内动脉远心端插管连接冷灌注系统，右侧颈内静脉远心端及双侧股静脉近心端插管连接超滤复温装置，建立脑局部体外循环。降温前全身肝素化，夹闭双侧颈外动静脉、左侧颈内动静脉(四血管组阻断双侧椎动脉)10min，向右颈内动脉内输入4℃林格氏液，维持脑温≤16℃约60min。停止低温灌注后，恢复上述血管正常血流，使脑组织自然复温。手术前后行头颅MRI检查，手术中监测血流动力学指标变化，术后行神经功能缺失评分。等温灌注组及四血管阻断冷灌注组实验猴于灌注死亡后和两血管阻断冷灌注组实验猴饲养到预定时间(12W)后处死，免疫组织化学法检测神经细胞β-tubulin、MAP-2及神经胶质细胞Vimentin和GFAP蛋白的表达水平。 【结果】 两血管冷灌注组恒河猴术后成功建立实验模型，术中、术后血流动力学稳定，术后安全复苏并长期存活，术后头颅MRI检查未见异常，术后神经功能评分无异常。等温灌注组和四血管阻断冷灌注组于灌注后均未能安全复苏，全部死亡。免疫组化结果表明，常温灌注组与两血管阻断冷灌注组及四血管阻断冷灌注组比较，神经元微管蛋白的β-tubulin、MAP-2表达下降(P＜0.01)，神经胶