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《昆明医学院》 2006年
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rhGH对SD大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护及修复作用

冉江华  
【摘要】:目的 探讨重组人生长激素(rhGH)对肝脏缺血再灌注损伤的保护及修复作用。 方法 第一部分:1.SD大鼠空白对照组10只,实验组50只,对照组50只。实验组rhGH针剂皮下注射0.2UI/100g/d×7d,对照组分别给予等量的生理盐水,Pringle's法建立100只肝脏缺血再灌注损伤模型,于模型建立后45min、1h、2h、4h、6h,取静脉血检验,取肝组织分2份。2.检测:(1)肝功能:AST、ALT;(2)TNF-a、IL-1a;(3)EC:高效液相色谱法测定ATP,ADP,AMP,并计算EC;(4)荧光比色法检测MDA含量;(5).SP两步法及western blotting两种方法检测NF-κBP65的表达;(6)采用原位杂交检测ICAM-1 mRNA;(7)光镜观察:观察各组SD大鼠镜下肝脏病理表现。第二部分:1.Pringle's法建立80只SD大鼠肝脏缺血再灌注损伤模型,实验组40只,对照组40只;另10只作空白对照。实验组rhGH针剂皮下注射0.2UI/100g/d×7d,对照组分别给予等量的生理盐水。2.取材:分别于术后第1天、第7天、第14天、第28天,取静脉血检验,取肝组织检测。3.检测:(1)AST、ALT。(2)TNF-a、IL-1a。(3)测定ATP,ADP,AMP,并计算EC。(5)采用SP两步法检测PCNA。(6)电镜观察并拍照,观察各组肝脏超微结构的变化。(7)体视学分析:用JEM-1011型透射电镜在统一放大50,000倍的条件下,拍摄各组肝细胞的线粒体,应用HPIAS-100高清晰度彩色病理图文报告分析系统分析各组线粒体的变化情况。 结果 第一部分:1.两组各时点ALT、AST呈进行性的升高(P<0.05),但是在rhGH组,ALT、AST的同期指标均较对照组明显下降(P<0.05)。2.TNF-a和IL-1:rhGH组内6h与3/4h比较,差异有显著性(P<0.05);对照组内6h与3/4h、1h比较,差异有显著性(P<0.05);rhGH组在各个时间点的IL-1α水平明显低于对照组(P<0.05)。3.HE染色:随肝脏却血后再灌注时间的延长,肝脏组织的损伤呈进行性加重;实验组各时间点肝组织的损伤均较对照组轻。4.EC:不同时点组
【学位授予单位】:昆明医学院
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:R657.3

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