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《昆明医学院》 2007年
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人脑胶质瘤干细胞的分离、培养及初步鉴定的实验研究

王昆鹏  
【摘要】: 目的:从人脑胶质瘤中分离培养脑肿瘤干细胞,观察并检测其在体外的增殖、分化情况,用干细胞标志物CD133和ABCG2初步鉴定,初步建立人脑肿瘤干细胞株或系,为脑肿瘤干细胞的进一步研究打下基础。 方法:术中取21例患者胶质瘤组织,分离成单细胞悬液,接种于添加生长因子的无血清培养基中,使其中的脑肿瘤干细胞克隆增殖;对增殖形成的肿瘤干细胞球连续传代培养,部分克隆球细胞做单克隆培养;将脑肿瘤干细胞球接种于含血清培养基,观察其分化现象;利用细胞免疫荧光检测脑肿瘤干细胞球特异性标志物CD133与ABCG2表达,以及分化后相关细胞的特异性标记物的表达,利用免疫组化法检测组织切片中CD133和ABCG2阳性细胞的分布,并计数阳性细胞百分率。 结果:本组中有10例胶质瘤中均仅有少数肿瘤细胞能够在无血清培养基中存活并悬浮增殖、形成克隆性脑肿瘤干细胞球,传代后脑肿瘤干细胞仍保持很强的自我更新和增殖能力,表达特异性标志物CD133和ABCG2;在含血清培养基中贴壁分化,产生具有多种形态且表达NSE、GFAP或04的分化细胞;组织切片中CD133和ABCG2阳性细胞呈散在分布,部分呈巢状分布;且肿瘤病理级别越高,原代肿瘤干细胞球越多,增殖越旺盛,组织切片中CD133或ABCG2阳性细胞越多。 结论:人脑胶质瘤中存在少量的具有自我更新和增殖能力、表达CD133和ABCG2的肿瘤干细胞,并能在体外将其分离、培养和诱导分化。
【学位授予单位】:昆明医学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:R739.4

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【参考文献】
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