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《昆明医学院》 2010年
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应用siRNA技术下调Survivin抑制鼻咽癌细胞生长的研究

王涵  
【摘要】: 目的鼻咽癌(Nasopharyngeal Carcinoma, NPC)是我国高发的头颈部恶性肿瘤,通常与体内某些基因突变导致细胞周期改变和抗凋亡机制有关。本研究探讨靶向survivin基因的小分子干扰RNA (short interfering RNA, siRNA)对人鼻咽癌CNE2细胞的生长和抑制作用。 方法设计、合成Survivin编码基因序列特异的小分子干扰RNA,通过脂质体转染鼻咽癌细胞CNE2来敲除Survivin的表达。用半定量逆转录聚合酶链反应(reverse transcriptase polymerase chain reaction, RT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blotting)测定Survivin mRNA和蛋白的表达。用流式细胞术检测Survivin siRNA对细胞周期和细胞凋亡的影响。用甲基噻唑基四唑来分析Survivin小干扰RNA对癌细胞的生长抑制作用。 结果Survivin编码基因序列特异siRNA能有效而稳定地抑制鼻咽癌CNE2中Survivin mRNA和蛋白的表达;下调Survivin可以在体外显著抑制肿瘤细胞的生长,在转染后24和48小时后,转染Survivin特异性siRNA组生长抑制率显著高于对照组,用特异性Survivin siRNA处理后,检测到有效的GO/Gi期阻滞。 结论RNA干扰技术能有效抑制Survivin基因的表达,降低鼻咽癌细胞的增殖能力,促进鼻咽癌细胞凋亡。Survivin特异性siRNA作为一种治疗鼻咽癌的新手段值得进一步深入研究。
【学位授予单位】:昆明医学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:R739.63

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【参考文献】
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