收藏本站
《昆明医学院》 2010年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

溃疡性结肠炎差异蛋白质的筛选研究

陈丽芳  
【摘要】: 背景:溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)是一种慢性非特异性结肠炎症。近年来,其发病率在世界范围内呈明显上升趋势,发病人群多为青壮年,严重影响了患者生活质量和社会生产力。UC的发病机制仍不清楚,缺乏有效的早期诊断标志物和治疗靶点。蛋白质组学研究方法和技术为溃疡性结肠炎的早期诊断、防治和发病机制的研究提供了理论依据。 目的:应用蛋白质组学双向凝胶电泳(Two-Dimensionalgel Electrophoresis,2-DE)和质谱技术(Mass Speetrum,Ms)寻找并鉴定UC患者与健康对照者血清之间的差异表达蛋白质。 方法: 1.以正常人血清样品为研究对象,对白蛋白/IgG球蛋白去除后血清样品、全血清进行PH梯度2-DE分离,凝胶经硝酸银染色后,利用PDQuest软件对2-DE图谱进行重复性分析,并对不同处理方法的血清2-DE图像的结果进行比较,以确定后续UC双向凝胶电泳方法。 2.选择溃疡性结肠炎活动期患者作为实验组;选择健康志愿者作为正常对照组。运用2-DE技术对其进行血清蛋白质差异表达分析。 3.结合软件分析和手工筛选,从表达差异的蛋白质点中选取12个清晰且表达水平改变明显的点作为最终质谱鉴定的对象;采用肽质量指纹图谱(PMF)的方法,并使用国际互联网上的蛋白质数据库提供的检索程序对差异蛋白质进行鉴定。 结果: 1.与全血清直接上样比较,白蛋白/IgG球蛋白去除后血清样品上样蛋白丢失较少,凝胶硝酸银染色显示蛋白质染色深、分散清楚。从而建立了白蛋白/IgG球蛋白去除后血清上样进行双向电泳的方法,获得分辨率较高且重复性好的人全血请蛋白质2-DE图谱,为分离高质量的蛋白质点进行UC血清蛋白组学研究奠定了良好的工作基础。 2.比较UC和配对的正常组血清的2-DE图谱,找出12个差异蛋白质点,结合基质辅助激光解吸离子电离飞行时间质谱(Matrix assisted laser desorption/ionization-time of flight-mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)成功鉴定9个蛋白点,其中6个表达上调:触珠蛋白、热休克转录因子2、酪氨酸激酶受体、醛脱氢酶、载脂蛋白C-Ⅲ、中心粒旁物质1;3个表达下调:角蛋白1、细丝蛋白A结合蛋白1、肌球蛋白3。差异蛋白的功能主要涉及机体激素调节、免疫应答、氧化应激、信号传导、细胞骨架等。 结论: 1.白蛋白/IgG球蛋白去除后血清样品双向凝胶电泳分析法具有蛋白丢失少、操作简便、重复性好的特性,是血清蛋白质组学研究的有效手段。 2.采用蛋白质组学2-DE和质谱技术,筛选并鉴定出了与溃疡性结肠炎相关的9个血清蛋白质,为研究UC的生物学行为提供新的分子标志物,为探讨UC在蛋白质水平的发生机制奠定基础。
【学位授予单位】:昆明医学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:R574.62

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 赵慧辉;王伟;李宏;;双向电泳-质谱技术筛选心绞痛血瘀证相关蛋白的研究[J];北京中医药;2008年02期
2 胡成效;戴勇;刘建军;何建凡;吕天羽;;系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞双向电泳分析[J];广东医学;2008年01期
3 费保莹;细胞粘附分子与炎症性肠病[J];国外医学(消化系疾病分册);1999年01期
4 吴畅;任安经;袁文俊;林丽;;热休克转录因子1的抗炎症作用[J];生理科学进展;2008年02期
5 赖远全,孙燕,余琴,章金艳,刘南植;核因子-κB在结肠炎的表达及地塞米松对其影响[J];实用医学杂志;2004年04期
6 周静平;邓长生;;罗格列酮对大鼠溃疡性结肠炎肠黏膜NF-κB,ICAM-1表达的影响[J];世界华人消化杂志;2006年01期
7 李灏;姜颖;贺福初;;代谢组学技术及其在临床研究中的应用[J];遗传;2008年04期
8 康亮;黄美近;杨祖立;王磊;刘炜;黎明涛;汪建平;;克罗恩病患者与健康人血清蛋白质组学比较初步研究[J];中国病理生理杂志;2008年12期
9 任宏宇,刘俊,宋军;热休克蛋白在肠黏膜上皮的表达[J];中华消化杂志;2005年06期
10 甘华田,欧阳钦,贾道全,夏庆杰;溃疡性结肠炎患者核因子-κB活化与细胞因子基因表达[J];中华内科杂志;2002年04期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 郑红斌,胡鸿毅,马贵同;清肠栓对溃疡性结肠炎实验大鼠ICAM-1表达的影响[J];浙江中医学院学报;2004年06期
2 ;Effects of Geldanamycin on Expression of Bcl-2 in Human Cervical Cancer HeLa Cells[J];Chinese Journal of Clinical Oncology;2008年02期
3 许欣;于成功;;中医药治疗溃疡性结肠炎的实验研究[J];长春中医药大学学报;2012年01期
4 葛洋;;罗格列酮治疗42例溃疡性结肠炎的临床疗效分析[J];当代医学;2009年30期
5 林平,伍杨,黄华,梅林;细胞因子与溃疡性结肠炎[J];湖北民族学院学报(医学版);2003年04期
6 贾艳会;刘树业;;蛋白质组学及其在肝癌中的应用[J];实用肝脏病杂志;2007年05期
7 王觅柱;陈吉;党彤;;核因子-κB与溃疡性结肠炎[J];感染.炎症.修复;2007年03期
8 孙智慧;郑良荣;;基因治疗在心肌缺血再灌注损伤中的研究进展[J];国际内科学杂志;2009年02期
9 李若林;秦雪;;蛋白质组学在原发性肝癌研究中的应用[J];国际检验医学杂志;2009年07期
10 王庆飞;郑树;;蛋白质组学在寻找肝癌生物标记物中的研究进展[J];国际肿瘤学杂志;2006年08期
中国重要会议论文全文数据库 前5条
1 周倩倩;黄力;;冠心病陈旧性心肌梗死血瘀证的血清蛋白质组学研究[A];第十一次全国中西医结合学会微循环学术会议会议指南及论文摘要[C];2011年
2 周恩华;穆敬平;吴焕淦;崔云华;谭琳蓥;赵天平;施征;;隔药灸对溃疡性结肠炎大鼠HSP70及mRNA的影响[A];中国针灸学会2009学术年会论文集(上集)[C];2009年
3 曾志聪;沈洪;周晓波;王亚奇;朱萱萱;;健脾清肠法对溃疡性结肠炎大鼠模型肠组织NF-B及COX-2表达的影响[A];中华中医药学会脾胃病分会第十九次全国脾胃病学术交流会论文汇编[C];2007年
4 谢世平;左刚;任聪颖;郭晓辉;;HIV/AIDS中医证候及代谢组学研究现状[A];中华中医药学会艾滋病分会第七次年会论文集[C];2009年
5 贺佳蓓;杨向东;;内科治疗溃疡性结肠炎的研究态势评析[A];第十五届中国中西医结合大肠肛门病学术交流会议论文集萃[C];2012年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 韩莉妲;基于GC/MS技术的脂肪酸代谢轮廓谱方法和应用研究[D];华东理工大学;2011年
2 朱震坤;热休克蛋白27在头颈部鳞状细胞癌细胞迁移和侵袭中的作用研究[D];山东大学;2010年
3 田丽媛;原发性肝癌实验检测及相关辅助诊断技术研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2011年
4 何婷婷;肝癌生物学行为活体分子显像的基础实验研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2011年
5 胡啸玲;罗格列酮对人结肠癌HT-29细胞氟尿嘧啶化疗增敏作用实验研究[D];中南大学;2011年
6 卢健;四逆散不同配伍干预实验性溃疡性结肠炎的效用和机制研究[D];辽宁中医药大学;2011年
7 吕自力;奶牛体细胞的纯化与人COL1α1 cDNA转染及核移植胚胎发育研究[D];石河子大学;2011年
8 吴爱兵;ALDH1可作为鼻咽癌干细胞功能性标记物和临床预后的指标[D];南方医科大学;2011年
9 张淼;应激过程中组织和细胞内HSPs表达与应激性损伤机理研究[D];南京农业大学;2011年
10 于妍妍;人肝癌转移相关的比较蛋白质组学和系统生物学研究[D];复旦大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 孙达锋;姜黄素对佐剂性兔骨性关节炎基因治疗作用的实验研究[D];南京医科大学;2010年
2 孙大娟;安肠愈疡汤治疗慢性溃疡性结肠炎的临床及实验研究[D];山东中医药大学;2010年
3 魏绪勇;伴门静脉癌栓肝癌的蛋白组学研究[D];浙江大学;2011年
4 吴圣明;ER、PR、ALDH1在子宫内膜癌中的表达及其临床意义[D];广西医科大学;2011年
5 杨兴友;嗜酸乳杆菌治疗DSS诱导大鼠急性溃疡性结肠炎的疗效及机制研究[D];泸州医学院;2011年
6 陈欧;姜黄素对DSS诱导的小鼠溃疡性结肠炎疗效的研究[D];泸州医学院;2011年
7 丁黎莉;基于UPLC/Q-TOF-MS技术的肝硬化和肝癌患者血清代谢组学研究[D];吉林大学;2011年
8 吴健;活动期溃疡性结肠炎的中医证候特点及与肠粘膜象关系的研究[D];北京中医药大学;2011年
9 周倩倩;冠心病不同阶段、血瘀证的血清蛋白质组学研究及其对HUVEC的影响[D];北京中医药大学;2011年
10 王新文;新生鼠窒息后氧化应激与心肌细胞凋亡的相关性实验研究[D];昆明医学院;2011年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 叶霜,沈南,顾越英,陈顺乐,韩光明,冯修高,冯学兵,陈兴国,华晶,黄文群,王元,鲍春德;系统性红斑狼疮的基因表达谱及其免疫调控通路的研究[J];中华风湿病学杂志;2002年06期
2 曾山崎;曹杰;张雪雁;杜洪;肖焕擎;朱郇悯;麦璟莹;;p38γMAPK蛋白在结肠癌组织中的表达及临床意义[J];热带医学杂志;2007年08期
3 胡鸿毅;马贵同;朱凌云;唐志鹏;龚雨萍;陆雄;戴薇薇;;三七、青黛等对溃疡性结肠炎组织中Fas/FasL表达的影响[J];上海中医药大学学报;2006年04期
4 欧阳钦;Rakesh Tandon;KL Goh;潘国宗;KM Fock;Claudio Fiocchi;SK Lam;萧树东;张虎;梁红亮;王玉芳;;亚太地区炎症性肠病处理共识意见(一)[J];胃肠病学;2006年04期
5 倪永兵;低氧诱导因子1和血管内皮生长因子与血管新生[J];国外医学(生理、病理科学与临床分册);2002年03期
6 马锋振,马洪升;炎症性肠病炎症过程中ICAM-1的表达及作用[J];世界华人消化杂志;2005年08期
7 崔冀;汪建平;彭俊生;黄奕华;何裕隆;兰平;蔡世荣;骆衍新;胡坤华;刘炜;黎明涛;;结肠癌的蛋白质组学研究[J];中国病理生理杂志;2008年05期
8 刘小丽;盛国平;徐威;李兰娟;;慢性重型肝炎患者血清中的低分子量蛋白质研究[J];中国病理生理杂志;2008年09期
9 邓长生,夏冰,陈德基, 周燕,龚玲玲,高志清;超氧化物歧化酶对大鼠乙酸性结肠炎粘膜的保护作用[J];中国病理生理杂志;1994年01期
10 夏霖;伍晓汀;;克罗恩病的诊断进展[J];中国实用外科杂志;2007年03期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 恩和;赵怀玉;王惠珍;;溃疡性结肠炎25例中西医结合治疗临床观察[J];中国中西医结合杂志;1982年02期
2 张明发;;对氨水杨酸灌肠治疗远端溃疡性结肠炎[J];西北药学杂志;1992年01期
3 林峻;;纤维结肠镜诊断溃疡性结肠炎18例分析[J];福建医药杂志;1993年05期
4 戴永靡;;溃疡性结肠炎49例临床分析[J];新疆医学;1994年03期
5 马向明;针灸治疗溃疡性结肠炎76例——附柳氮磺胺吡啶片治疗45例对照[J];浙江中医杂志;2004年08期
6 姚惠芬;陈务华;周毅;;溃疡性结肠炎动物模型研究概况[J];天津药学;2006年04期
7 郭永高;吴萍;高普均;鹿博;;亮菌甲素治疗溃疡性结肠炎疗效观察[J];中国煤炭工业医学杂志;2007年07期
8 李红;张灵芝;;中西药保留灌肠治疗溃疡性结肠炎的护理[J];临床医药实践杂志;2007年09期
9 崔桂林;杨凤菊;;溃疡性结肠炎的治疗护理体会[J];光明中医;2008年02期
10 李阳;刘延祥;;加味白术散治疗溃疡性结肠炎80例[J];新中医;2008年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 李忠海;叶祚栋;何永恒;;中西医结合治疗溃疡性结肠炎临床观察[A];大肠肛门病论文汇编[C];2001年
2 苏春芝;;健脾清肠汤治疗溃疡性结肠炎疗效观察[A];中华中医药学会脾胃病分会第十九次全国脾胃病学术交流会论文汇编[C];2007年
3 王新月;张雯;孙慧怡;吴健;王建云;刘大铭;;溃疡性结肠炎临床流行病学及肺功能损伤特点[A];第二十三届全国中西医结合消化系统疾病学术会议暨消化疾病诊治进展学习班论文汇编[C];2011年
4 李佃贵;张素钊;朱峰;刘建平;张金丽;张彬彬;焦建玮;;浅析溃疡性结肠炎的病变要素——浊、毒[A];中华中医药学会脾胃病分会第十九次全国脾胃病学术交流会论文汇编[C];2007年
5 陈建权;刘建平;郎晓猛;荣英蕊;;泄浊解毒方对溃疡性结肠炎大鼠TNF-α及ICAM-1的影响[A];中华中医药学会第二十一届全国脾胃病学术交流会暨2009年脾胃病诊疗新进展学习班论文汇编[C];2009年
6 陈忠前;;护肠丸治疗溃疡性结肠炎67例[A];中国中西医结合学会第十八次全国消化系统疾病学术会议暨2006年全国中西医结合消化系统疾病进展学习班论文汇编[C];2006年
7 哈小琴;刘登瑞;吕同德;唐瑜;昌业伟;;TypI-HGF基因治疗TNBS诱发大鼠溃疡性结肠炎的实验研究[A];2008心血管药理学术研讨会论文汇编[C];2008年
8 赵凤达;;藏红花治疗溃疡性结肠炎的机理探讨[A];江西省中西医结合学会第九次活血化瘀学术研讨会活血化瘀临床应用新进展培训班论文集[C];2011年
9 张小萍;;溃疡性结肠炎治疗思路探析[A];中华中医药学会第二十一届全国脾胃病学术交流会暨2009年脾胃病诊疗新进展学习班论文汇编[C];2009年
10 粱启明;王惠政;;中西医结合治疗溃疡性结肠炎50例临床观察[A];第二十二届全国中西医结合消化系统疾病学术会议暨消化疾病诊治进展学习班论文汇编[C];2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 同济医院 姜元喜 许树长 副主任医师;溃疡性结肠炎饮食预防是关键[N];上海中医药报;2008年
2 长春鹏程胃肠医院院长、主任医师 徐子鹏;溃疡性结肠炎的治疗[N];健康报;2009年
3 刘元庆 长春玛莉娅女子医院副主任医师 贾占波 山东东营胜利石油管理局肛肠病防治院 苏海燕 呼伦贝尔市中蒙医院;中医治儿童溃疡性结肠炎有法[N];中国中医药报;2009年
4 南昌大学第二附属医院 何楠;谨防老年溃疡性结肠炎癌变[N];家庭医生报;2009年
5 袁虎;患溃疡性结肠炎要重调养[N];医药养生保健报;2009年
6 记者 王建影 通讯员 黄文秋;我国溃疡性结肠炎呈高发态势[N];健康报;2010年
7 湖北省武汉市武昌医院南湖分院 陈继英;中西医结合治溃疡性结肠炎[N];中国中医药报;2010年
8 本报记者 慕欣 王雪敏 魏平;溃疡性结肠炎:要诊断 先排查[N];医药经济报;2011年
9 山西临汾市尧都区中西医结合医科医院 周丽;溃疡性结肠炎,六辨施治[N];医药经济报;2011年
10 本报记者 魏平;激素治疗溃疡性结肠炎:不同情况不同选择[N];医药经济报;2011年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 赵芯梅;溃疡性结肠炎分子标志物的筛查和发病机制的初步探讨[D];南方医科大学;2013年
2 张英剑;多药耐药基因与溃疡性结肠炎的关系研究[D];郑州大学;2010年
3 唐晓艳;溃疡性结肠炎相关性结肠癌动物模型建立及癌变机制初探[D];北京协和医学院;2010年
4 韩昌圣;溃疡性结肠炎中医综合治疗方案疗效评价研究[D];北京中医药大学;2010年
5 郑威扬;溃疡性结肠炎相关性结肠癌发病机制初探[D];北京协和医学院;2009年
6 王姗姗;慢溃宁抑制和逆转溃疡性结肠炎不典型增生的临床和实验研究[D];北京中医药大学;2013年
7 胡连海;灌肠方治疗溃疡性结肠炎的临床和实验研究[D];中国中医科学院;2010年
8 吴玉泓;久泻灵颗粒剂治疗溃疡性结肠炎的实验及临床研究[D];甘肃农业大学;2010年
9 林静;肠愈宁颗粒对溃疡性结肠炎大鼠JAK/STAT通路影响的研究[D];黑龙江中医药大学;2011年
10 王鹏;溃疡性结肠炎的中医证候学研究[D];北京中医药大学;2014年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李俊;溃疡性结肠炎患者脾虚证肠粘膜线粒体体视学研究[D];广州中医药大学;2010年
2 王晓锋;荆芥、防风在溃疡性结肠炎治疗方药中的增效作用临床观察[D];北京中医药大学;2011年
3 武良琴;地衣芽孢杆菌对小鼠急性溃疡性结肠炎作用的实验研究[D];浙江大学;2010年
4 叶金峰;辩证保留灌肠治疗溃疡性结肠炎的疗效观察[D];广州中医药大学;2010年
5 姜爱雯;4-氨基水杨酸衍生物的合成及抗溃疡性结肠炎研究[D];山西医科大学;2010年
6 徐帆;醒脾化溃汤治疗脾虚湿热型溃疡性结肠炎的临床研究[D];湖南中医药大学;2011年
7 余志威;中药保留灌肠联合穴位注射治疗溃疡性结肠炎的临床观察[D];湖南中医药大学;2010年
8 朱芳丽;cyp27b1基因启动子多态性与溃疡性结肠炎易感性关系的初步研究[D];河北医科大学;2011年
9 徐晓燕;HNP1-3在溃疡性结肠炎中的表达及意义[D];大连医科大学;2010年
10 熊阿琴;溃疡性结肠炎的现代中医文献研究整理及Meta分析[D];广州中医药大学;2011年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026