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《云南师范大学》 2000年
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干旱预处理诱导的玉米幼苗的交叉适应及其机制

刘家忠  
【摘要】: 以玉米幼苗和烟草为实验材料,本文第一部分试图通过对玉 米幼苗的交叉适应的研究,证明短期干旱预处理会提高玉米幼苗 对干旱胁迫、冷胁迫、热胁迫及盐胁迫的抗性,第二部分试图通 过建立诱导性表达CaM/CaMBP转基因烟草体系,以便于研究受 细胞质CaM和细胞核CaM调控的生理生化过程。 在第一部分的研究中,采用玉米(大黄、晴3)幼苗为实验 材料。通过测定玉米幼苗干旱预处理后分别在干旱、低温、高温 和盐渍的环境中处理一段时间后的存活率,证实了在玉米幼苗中 交叉适应现象的存在。然后测定玉米幼苗胚根的电解质渗漏率、 胚芽鞘的TTC还原活力,进一步证实干旱锻炼可提高玉米幼苗的 抗旱性、抗冷性、抗热性和抗盐性。随后我们测定了大黄幼苗干 旱锻炼后分别在干旱、冷、热、盐渍环境中的抗氧化酶如APX,GR, CAT,SOD,GPX的活性的变化情况。结果表明:干旱锻炼可引起 上述酶活性发生相应的变化,从而提高玉米幼苗的抗旱性、抗冷 性、抗热性及抗盐性。说明抗氧化酶系统参与了干旱诱导的玉米 幼苗的交叉适应过程。对于H_2O_2在植物的交叉适应过程中是否起 到了逆境胁迫信号作用,本文也进行了探讨。 在第二部分的研究中,利用表达四环素(Tet)阻遏蛋白具有 卡那霉素(Km)抗性的烟草种子,Tetr3.2和HO2O2.0对两个品种 为实验材料,采用根癌农杆菌介导转化中的叶圆盘法进行转化工 作。烟草种子在含Km的MS培养基上萌发2-3个月后,将叶圆 盘用农杆菌浸染,共培养,然后在含有潮霉素(Hm)的培养基 上进行筛选,生根,最后获得具有抗性的植株。建成可诱导表达 细胞质和细胞核CaM/CaMBP的转基因烟草体系。在获得转基因 云南师范大学硕土研究生毕业论文 植株的过程中发现,影响因素很多。()不同生长期的外植体对 农杆菌浸染的反应不同。(2)外植体在菌液中的时间不宜太长, 最好10分钟左右,时间过长易造成损伤,影响转化效率。(3) 共培养以3-4天为最好,过长或过短都会降低转化效率。共培养 须弱光照,22℃条件。(4)农杆菌的培养及稀释程度对转化效率 有影响。(5)不同的品种,转化难易、时间长短不同,品种Tetr3.2 易转化出芽,且时间较短。(6)在芽分化筛选过程中,远离培养 基的切面容易产生“阳性假芽”,因此,生根筛选是必要的。本 实验用根癌农杆菌介导转化,获得可诱导性表达细胞质和细胞核 CaM/CaMBP的转基因烟草体系。
【学位授予单位】:云南师范大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2000
【分类号】:S513

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【引证文献】
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