收藏本站
《云南师范大学》 2003年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

诱导表达细胞CaM对烟草抗逆性的调控效应及其生理生化机制

杨静  
【摘要】: 根据CaM在植物生命活动中的多重作用,我们实验室已经建成了四套诱导性表达CaM/CaMBP的转基因烟草体系,以期利用人工调控CaM的方法更深入的研究CaM本身的功能和CaM与植物抗逆性、抗氧化酶系统之间的关系。 本研究的结果主要分为三个部分: 第一部分是利用改进的磷酸二酯酶法测定了16个诱导表达细胞质CaM的转基因烟草株系的CaM活性,从中筛选出五个能良好诱导表达的转基因烟草株系(1C、2C、8C、4L和7L);然后深入研究了Tc诱导48小时过程中CaM活性的动态变化。此部分不仅筛选出了进行下一步研究的备试材料,还确定了诱导表达的适宜时间。 第二部分是利用第一部分检测到的五个诱导表达细胞质CaM的转基因烟草株系进行抗热性和抗冷性的研究。结果不仅证实经过Tc诱导的转基因烟草比未经Tc诱导的转基因烟草的抗冷和抗热性更强,而且还证明非诱导状态下比未转化的空白对照(HO2020)抗性强。在我们用2C作进一步抗氧化酶研究的实验中发现:我们测定的五种抗氧化酶 (SOD、GR、APX、GPX和CAT)在正常状态下就表现出诱导状态的转基因烟草比非诱导的酶活性强,而非诱导状态的转基因烟草又比空白对照(HO2020)强。在高温和低温胁迫后,虽然酶活都比正常状态下的有所下降,但是下降后的趋势仍然保持诱导的比非诱导的高,非诱导的比空白对照(HO2020)高。这样就比较清楚的证明了细胞质CaM的增加提高了植物的抗逆性,而这种抗逆性的提高又是通过CaM对抗氧化酶活性增强性的调控来介导完成的。 第三部分是分析诱导表达细胞质CaM转基因烟草对谷胱甘肽还原酶基因表达和酶活性的调控。基于第二部分Tc诱导使抗氧化酶活性增强的 WP=7 启示,我们除了使用原有的GR酶活性测定方法以外, 还采用了半定量的RT-PCR技术分析GR酶基因表达的强弱。结果发现GR基因的表达量与GR酶活性的高低相配合,都表现为:诱导表达细胞质CaM的转基因烟草比非诱导的强,且在诱导过程中逐渐增加;非诱导的比空白对照(HO2020)的强,但是这种增强不随时间延长而变化。所以我们认为进入细胞核的CaM对GR基因表达也有调控作用。
【学位授予单位】:云南师范大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:S572.01

手机知网App
【引证文献】
中国硕士学位论文全文数据库 前3条
1 赵玉;诱导表达细胞CaMBP对烟草抗热性的调控效应及其生理生化机制[D];云南师范大学;2004年
2 罗时苹;调控细胞CaM水平对细胞AOS产生的影响及与抗氧化系统的关系[D];云南师范大学;2004年
3 杜萍;BvM14-CaM基因在烟草中的转化及表达[D];黑龙江大学;2010年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前8条
1 郭丽红,陈善娜,龚明;NaCl胁迫对玉米幼苗中谷胱甘肽还原酶活性及可溶性蛋白质含量的影响[J];昆明师范高等专科学校学报;2002年04期
2 陈忠斌,于乐成,王升启;RNA干扰作用(RNAi)研究进展[J];中国生物化学与分子生物学报;2002年05期
3 汤富酬,李成建,薛友纺;双链RNA在基因沉默中的作用[J];中国生物化学与分子生物学报;2002年06期
4 刘家忠,龚明;植物抗氧化系统研究进展[J];云南师范大学学报(自然科学版);1999年06期
5 李忠光,李江鸿,杜朝昆,黄号栋,龚明;在单一提取系统中同时测定五种植物抗氧化酶[J];云南师范大学学报(自然科学版);2002年06期
6 龚明,杨兴富;钙对玉米幼苗抗盐性的效应(简报)[J];植物生理学通讯;1994年06期
7 黄号栋,杨静,龚明;用磷酸二酯酶定量检测植物钙调素方法的改进[J];植物生理学通讯;2003年02期
8 龚明,李英,曹宗巽;植物体内的钙信使系统[J];植物学通报;1990年03期
中国硕士学位论文全文数据库 前3条
1 陈勃;低温诱导玉米幼苗的交叉适应及诱导表达CaM/CaMBP转基因烟草体系的建立[D];云南师范大学;2001年
2 吴晓岚;Ca~(2+)-CaM对玉米超氧化物岐化酶活性的效应[D];云南师范大学;2001年
3 黄号栋;诱导表达CaM对烟草抗氧化系统的调控[D];云南师范大学;2002年
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 牛永东,许丽艳,李恩民;酵母单杂交诱饵质粒pHis-3NF和pLacZ-3NF的构建与鉴定[J];癌变.畸变.突变;2003年01期
2 欧阳松应,徐寿水,沈文律,周传香,李春艳,欧阳红生;人PTEN基因表达载体的构建及其在U_(251)细胞中的表达[J];癌变.畸变.突变;2004年04期
3 李涛,石年,吴又桐,周丽,董洁,王素青,陈亮;Bcl-2在溴氰菊酯诱导神经细胞凋亡机制中的作用[J];癌变.畸变.突变;2004年05期
4 吴保庆;郭洪海;;烟气脱硫石膏对盐胁迫下紫花苜蓿生理的影响[J];山东农业科学;2008年02期
5 张秀华;王文锋;;微卫星DNA聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染技术的探讨[J];山东农业科学;2009年06期
6 徐永茹;于成龙;徐田敏;唐萍;彭向永;;钙对感染白粉菌甜瓜幼苗中苯丙烷类物质代谢的影响[J];山东农业科学;2011年02期
7 史冬燕;程在全;;元江普通野生稻金属硫蛋白基因的获得和序列分析[J];安徽大学学报(自然科学版);2009年03期
8 鞠玉栋;郑回勇;吴维坚;陈永快;何炎森;吴松海;;中国水仙MADS-box基因克隆及其序列分析[J];安徽农学通报;2008年21期
9 方志红;董宽虎;;Na_2SO_4胁迫对碱蒿叶绿素、甜菜红素和O_2~-产生速率的影响[J];安徽农学通报(上半月刊);2010年09期
10 朱德艳;;浅析RNAi技术的应用及发展前景[J];安徽农业科学;2007年24期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 田永强;张荣意;朱中元;;人乳头瘤病毒线性平行杂交分型检测条件的建立及优化[A];2009年海南省微生物学检测及质量保证研讨会论文集[C];2009年
2 梁权;毛培菊;罗春贞;王缦;;HIV-1跨膜蛋白gp41的截短表达及其免疫反应性[A];第五次全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会论文汇编[C];2011年
3 朱勤勋;严雪;韩友斌;;鼠源IgG抗体F(ab')2片段及Fab片段的制备纯化及其免疫活性研究[A];第五次全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会论文汇编[C];2011年
4 朱美财;占志;王雅静;蔡庆;;刺桐胰蛋白酶抑制剂突变体在大肠杆菌中的表达及在TPA纯化中的应用[A];微生物与人类健康科技论坛论文汇编[C];2009年
5 刘俊莹;张华鹏;王聪聪;张剑峰;;马铃薯卷叶病毒ORF1克隆及序列分析[A];马铃薯产业与科技扶贫(2011)[C];2011年
6 冯琦;孙秉中;赵永同;孙凯;张英起;颜真;韩苇;;Bcr-abl特异性系列核酶载体的构建及初步鉴定[A];生命科学与生物技术:中国科协第三届青年学术年会论文集[C];1998年
7 白玉杰;苏成芳;杨安刚;;抗人CD3单链抗体基因的构建及表达[A];生命科学与生物技术:中国科协第三届青年学术年会论文集[C];1998年
8 赵洁;刘楚吾;;笛鲷AFLP分析体系的确立[A];经济发展方式转变与自主创新——第十二届中国科学技术协会年会(第三卷)[C];2010年
9 彭抒昂;罗充;;梨成花过程中钙与核酸的动态研究[A];中国科协第3届青年学术年会园艺学卫星会议暨中国园艺学会第2届青年学术讨论会论文集[C];1998年
10 王凤华;林德清;;Ca~(2+)对茄苗抗寒力的效应[A];中国园艺学会第四届青年学术讨论会论文集[C];2000年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 王庆莲;苹果多胺和脯氨酸合成代谢相关基因的功能鉴定[D];山东农业大学;2009年
2 郭爱疆;猪带绦虫六钩蚴TSOL18抗原表位及组织定位的研究[D];甘肃农业大学;2010年
3 郑小坚;家蚕类胰岛素基因BBX-B8的功能研究[D];苏州大学;2010年
4 王发明;柚(citrus grandis Osbeck)单染色体AFLP分子标记体系及文库的建立[D];福建农林大学;2010年
5 郭新军;拟黑多刺蚁肌细胞增强因子2与肌钙蛋白Ⅰ亚基基因的克隆及其在发育中的表达研究[D];陕西师范大学;2010年
6 赵宇瑛;黄瓜磷脂酶D和抗氧化系统对采后机械损伤胁迫的响应[D];浙江大学;2011年
7 于蕾;野西瓜极性生物碱A10组分诱导SGC-7901细胞凋亡线粒体通路的研究[D];北京中医药大学;2010年
8 林美娟;茶尺蠖小RNA病毒RNA依赖的RNA聚合酶功能研究及全长cDNA克隆构建[D];武汉大学;2009年
9 束德峰;温度胁迫下番茄叶绿体谷胱甘肽还原酶基因的克隆、表达和功能分析[D];山东农业大学;2011年
10 乔建磊;马铃薯雾培营养调控机理研究[D];吉林大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 韩秀萍;幽门螺杆菌基因敲除方法的建立及其应用研究[D];华中农业大学;2010年
2 魏礼玲;MYB转录因子家族相关EST干涉载体构建及遗传转化的研究[D];华中农业大学;2010年
3 姜珍;小麦根渍水形成通气组织过程中细胞壁降解与Ca~(2+)相关研究[D];华中农业大学;2010年
4 余姣姣;天蓝放线紫红素生物合成上调基因的克隆及其对阿维菌素产量的影响[D];华中农业大学;2010年
5 黄潘;鸡胚性分化早期性别差异表达miRNAs的鉴定及其特性分析[D];华中农业大学;2010年
6 王萍萍;盾壳霉产孢相关基因的克隆及腺苷脱氨酶(CMADA)基因的初步研究[D];华中农业大学;2010年
7 曹晶;风疹病毒(RV)包膜糖蛋白E1特异基因片段的原核表达[D];南京医科大学;2009年
8 王涛;糖皮质激素受体基因转染阿霉素肾病大鼠模型改善糖皮质激素疗效的研究[D];南京医科大学;2009年
9 王正茂;单纯疱疹病毒糖蛋白哺乳动物细胞表达系的建立、纯化鉴定及免疫原性分析[D];南京医科大学;2010年
10 高岩;拟南芥fad8基因在烟草叶绿体基因组表达研究[D];哈尔滨师范大学;2010年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 林善枝,李雪平,张志毅;在低温诱导毛白杨抗冻性中CaM含量和G6PDHase及ATPase活性的变化[J];北京林业大学学报;2001年05期
2 梁美霞,刘守伟,李景富;农杆菌介导的番茄遗传转化研究进展[J];东北农业大学学报;2004年02期
3 申业;申家恒;郭德栋;方晓华;刘丽萍;;甜菜单体附加系M14无融合生殖的细胞胚胎学研究[J];西北植物学报;2006年05期
4 龚明,杜朝昆,许文忠;钙和钙调素对玉米幼苗抗旱性的调控[J];西北植物学报;1996年03期
5 夏快飞,梁承邺,叶秀粦;钙调素及钙调素相关蛋白在植物细胞中的研究进展[J];广西植物;2005年03期
6 白丽荣,张燕敏;植物的无融合生殖研究进展[J];衡水学院学报;2005年01期
7 郭彩华;刘静雯;卢珍华;詹玲玲;;东海原甲藻钙调蛋白的分离纯化及鉴定[J];集美大学学报(自然科学版)网络版(预印本);2009年01期
8 郭丽红,陈善娜,龚明;钙对玉米种子活力和萌发过程中谷胱甘肽还原酶活性的影响[J];昆明师范高等专科学校学报;2001年04期
9 李海英;马春泉;于冰;高传军;张绍军;张莹;郭德栋;;利用mRNA差异显示技术分离甜菜M_(14)品系特异表达基因的cDNA片段[J];植物研究;2007年04期
10 马国华,赵南先,黄学林;禾本科植物无融合生殖(综述)[J];热带亚热带植物学报;2001年01期
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 陈勃;低温诱导玉米幼苗的交叉适应及诱导表达CaM/CaMBP转基因烟草体系的建立[D];云南师范大学;2001年
2 吴晓岚;Ca~(2+)-CaM对玉米超氧化物岐化酶活性的效应[D];云南师范大学;2001年
3 黄号栋;诱导表达CaM对烟草抗氧化系统的调控[D];云南师范大学;2002年
4 马春泉;利用抑制消减杂交技术寻找无融合生殖相关基因[D];黑龙江大学;2005年
5 张莹;甜菜M14品系花期特异表达基因cDNA文库的构建及筛选[D];黑龙江大学;2007年
6 崔颖;甜菜M14品系表达基因M14-100、M14-265、M14-G12 cDNA全长克隆与序列分析[D];黑龙江大学;2008年
7 王冰;甜菜M14品系特异表达基因M14-263在模式植物中的表达研究[D];黑龙江大学;2008年
8 王薇;抗虫基因cry1C~*对早粳稻的转化[D];黑龙江大学;2008年
9 汪立法;甜菜M14品系特异表达基因M14-341在模式植物中的表达研究[D];黑龙江大学;2008年
10 曹洪祥;甜菜M14品系花器官特异表达蛋白质的研究[D];黑龙江大学;2009年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 丁文勇,赵宝昌,韩旭;钙调素的环核苷酸磷酸二酯酶检测法[J];大连医科大学学报;1999年01期
2 龚明,杜朝昆,许文忠;钙和钙调素对玉米幼苗抗旱性的调控[J];西北植物学报;1996年03期
3 王煜,扶惠华,田廷亮,许文亮;SOD模型化合物对油菜幼苗抗寒性的影响[J];华中师范大学学报(自然科学版);1997年04期
4 张伯科,郑荣梁;改进的SOD的邻苯三酚自氧化测定法[J];兰州大学学报;1990年03期
5 曾韶西,王以柔,李美茹,刘鸿先;冷锻炼和ABA诱导水稻幼苗提高抗冷性期间膜保护系统的变化[J];热带亚热带植物学报;1994年01期
6 邹国林;桂兴芬;钟晓凌;朱汝璠;;一种SOD的测活方法——邻苯三酚自氧化法的改进[J];生物化学与生物物理进展;1986年04期
7 邵宏波,初立业;钙及钙调素研究进展(Ⅰ)[J];松辽学刊(自然科学版);1991年04期
8 李晓东,张庭芳;钙调素对超氧化物歧化酶及乳酸脱氢酶的激活作用[J];生物化学杂志;1993年03期
9 刘家忠,龚明;植物抗氧化系统研究进展[J];云南师范大学学报(自然科学版);1999年06期
10 陈善娜,梁斌,张蜀君,周恒苍;云南高原水稻幼苗的抗冷性与其活性氧清除系统的关系[J];云南植物研究;1995年04期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 张大兵,张景六,王宗阳,洪孟民;人乳铁蛋白基因在烟草中的表达及抗细菌与病毒的能力[J];植物生理学报;1999年03期
2 蓝海燕,张丽华,王兰岚,陈正华,田颖川,陈正华,王长海;表达β-1,3-葡聚糖酶及几丁质酶基因的转基因烟草及其抗真菌病的研究[J];遗传学报;2000年01期
3 黄虎,耿川东,李家大,郝建疆,谢伟军,龚蓁蓁;拟南芥ATLP-3基因在转基因烟草中的整合和表达[J];江苏农业学报;2000年04期
4 倪迪安,于晓红,王凌健,许智宏;iaaM基因在烟草花粉中的表达及其在花粉发育中的作用[J];实验生物学报;2002年01期
5 沙丽娜;郭兆奎;万秀清;程红梅;;转录因子CBF基因转化烟草抗寒性指标的检测[J];中国林副特产;2009年01期
6 龙永彬;;烟草抗病毒基因工程策略[J];民营科技;2009年04期
7 耿飒,麻密,李国凤,叶和春;ipt基因定位表达对转基因烟草育性的影响[J];植物学报;2000年02期
8 武东亮,崔洪志,郭三堆;融合杀虫基因植物表达载体的构建及转基因烟草的获得[J];中国农业科学;2001年05期
9 齐拓荒;王庆华;刘进;奚涛;;人组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)在转基因烟草中的表达[J];药物生物技术;2006年05期
10 李娜;杜秀贞;潘小玫;王金生;宋从凤;;转小麦冷胁迫蛋白截短基因烟草及其抗病性分析[J];遗传;2011年05期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 李天飞;闫新甫;李文正;刘勇;;转基因烟草安全性与入世后面临的挑战[A];加入WTO和中国科技与可持续发展——挑战与机遇、责任和对策(上册)[C];2002年
2 申海燕;王花红;王红;刘本叶;李国凤;叶和春;;利用转基因烟草合成青蒿素前体的研究[A];中国植物学会七十五周年年会论文摘要汇编(1933-2008)[C];2008年
3 张执金;张海文;王俊英;黄荣峰;;TERF1调控乙烯和脱落酸生物合成并提高转基因烟草的胁迫耐性[A];中国农业生物技术学会第三届会员代表大会暨学术交流会论文摘要集[C];2006年
4 张治平;汪良驹;姚泉洪;;过量合成ALA转基因烟草叶片光合特性及其与抗氧化酶活性关系的研究[A];中国园艺学会十届二次理事会暨学术研讨会论文摘要集[C];2007年
5 来琳琳;宋永波;张景海;;转基因烟草及番茄表达东亚钳蝎镇痛抗肿瘤肽的研究[A];东北三省生物化学与分子生物学学会2008年学术交流会论文摘要[C];2008年
6 戴秀玉;周坚;杨波;;高效液相分离/蒸发光散射检测测定转基因烟草中的海藻糖[A];新世纪 新机遇 新挑战——知识创新和高新技术产业发展(上册)[C];2001年
7 杨锦芬;Megha Nath Adhikari;黄琼林;吴淑显;徐晖;陈蔚文;;过表达阳春砂HMGR及DXR基因的转基因烟草的构建[A];全国第9届天然药物资源学术研讨会论文集[C];2010年
8 赵琳;李永光;李文滨;;过量表达大豆GmRAV基因的转基因烟草光周期敏感性增强[A];2009年中国作物学会学术年会论文摘要集[C];2009年
9 王振东;王艳红;房德纯;上田一郎;;弱毒番茄系TMV-L_(11)A全长cDNA在转基因烟草中的表达[A];“植物保护21世纪展望”——植物保护21世纪展望暨第三届全国青年植物保护科技工作者学术研讨会文集[C];1998年
10 肖少波;陈焕春;方六荣;李蕊;柳俊;洪文洲;;伪狂犬病毒gD基因在转基因烟草中的表达[A];中国畜牧兽医学会2003年学术年会论文集[C];2003年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 编译 时焦;转基因烟草可消除环境中的绿藻毒素[N];东方烟草报;2010年
2 ;转基因烟草“长出”狂犬病抗体[N];大众科技报;2003年
3 记者 栾海;大肠杆菌妙用[N];新华每日电讯;2002年
4 ;我国培育出耐盐转基因烟草[N];今日信息报;2004年
5 记者 顾钢;转基因烟草可制抗艾滋病药物[N];科技日报;2009年
6 袁爱华;转基因植物:为大地疗伤[N];河北日报;2003年
7 洪海洋;生物技术的浪潮[N];福建科技报;2000年
8 本报驻德国记者 李山;弗劳恩霍夫协会2010年度研究奖巡礼[N];科技日报;2011年
9 记者 王心见;加找到防转基因植物扩散方法[N];科技日报;2003年
10 泓 水;转基因技术向我们走来[N];中国质量报;2004年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 吕军;转基因烟草对土壤磷吸收利用的研究[D];大连理工大学;2011年
2 张桦;新牧1号杂花苜蓿抗逆相关基因的克隆和功能分析[D];新疆农业大学;2011年
3 李丽娅;铁(Ⅲ)螯合物还原酶在植物铁代谢中的作用研究[D];哈尔滨师范大学;2011年
4 蒋瑶;慈竹CBF1基因克隆及其耐寒性研究[D];四川农业大学;2012年
5 杨小玲;SeNHX1耐盐分子机制与耐盐洋桔梗培育[D];天津大学;2010年
6 袁媛;植物基因安全转化体系关键技术的研究[D];中国农业大学;2005年
7 Muhammad Farooq Hussain Munis;[D];华中农业大学;2010年
8 司婧;高山离子芥冷调节基因CbCOR15提高转基因烟草抗寒性的研究[D];兰州大学;2009年
9 白林含;盐藻渗透调节与超微结构改变的研究及烯醇酶基因的克隆、分析和转基因烟草的鉴定[D];四川大学;2003年
10 马金霞;非编码基因zm401对玉米小孢子发育的影响[D];中国农业大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 曾光;苜蓿抗逆基因的cDNA克隆和转基因烟草功能的初步验证[D];新疆农业大学;2010年
2 秦楠;蜡梅病程相关蛋白基因CpPR-1的克隆及功能初步分析[D];西南大学;2011年
3 郑卿;抗Ⅰ型糖尿病基因转化烟草、番茄的研究[D];扬州大学;2010年
4 曲东;马铃薯Rubisco活化酶启动子功能分析[D];中国农业科学院;2010年
5 张茂迎;玉米B组促分裂原活化蛋白激酶激酶(MAPKK)基因ZmMKK3的分离及功能分析[D];山东农业大学;2011年
6 刘杨;盐藻耐盐相关序列DSG10的功能预测及其转基因烟草鉴定[D];四川大学;2002年
7 张冉;α-法尼烯合成酶基因转化拟南芥和烟草的研究[D];山东农业大学;2011年
8 高宇;Resveratrol Synthase基因的克隆及表达研究[D];中国农业科学院;2003年
9 王宇尘;转F3’5’H基因烟草的花色改变[D];西南大学;2005年
10 张丹;鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因在转基因烟草中的表达[D];中国农业大学;2003年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026