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鸡毒支原体西藏分离株的分离鉴定

楚黎莉  
【摘要】: 鸡毒支原体(Mycoplasma Gallisepticum,MG)感染也称为鸡败血霉形体感染或慢性呼吸道病(Chronic Respiratory Disease,CRD)。鸡感染MG后临床上主要表现为咳嗽流鼻液、呼吸道啰音、和气囊炎等呼吸道疾病。此病易传染,常引发鸡群的群体发病,但死亡率不高,常常是隐性带菌鸡,导致蛋鸡产蛋率下降,蛋的孵化率变低。本病分布于世界各地,可通过水平和垂直方式传播,因此该病在鸡群中可长期存在和蔓延。给养禽业造成严重的损失。目前对该病的控制主要从两个方面来着手,第一就是做好雏鸡的疫苗免疫工作,疫苗无论是从经济还是效果上来看都是防治MG感染的最佳选择。第二就是要做好卫生工作和选择工作,良好的饲养环境是防止疾病发生的最根本的条件,只有做好日常的消毒,清扫工作,才能从根本上和源头上预防疾病。再就是要及时的检测出并淘汰有病和携带病原的鸡,从而能防止疾病的蔓延和垂直传播。 对西藏林芝地区60个疑似感染病例进行病原分离培养,病料在25%的青霉素溶液中浸泡24h后,取出100μl于改良后添加了醋酸铊的Hartleys培养基增菌培养,其中3株分离株2-3天后观察可见长出“煎蛋样”外观菌落,瑞氏染色镜检有细小球形、短杆状和不规则的菌体,由此可初步认定分离物为支原体。经生化反应和血清学鉴定,可判定其中2株为鸡毒支原体。 根据鸡毒支原体的保守序列16SrRNA的部分序列,用Primer premier5.0引物设计软件对鸡毒支原体分离株设计一对引物,可通过PCR扩增得到577bp的目的片段。并对西藏分离株与重庆分离株的扩增片段序列进行比较分析,结果2株西藏分离株与重庆分离株扩增片段的同源性分别为96.7%和96.8%。 利用SDS-PAGE的方法对鸡毒支原体重庆分离株和西藏分离株的结构蛋白进行研究,发现两个地区的鸡毒支原体的结构蛋白存在差异,可能与抗生素的广泛使用有关,抗生素的广泛使用可能会导致鸡毒支原体结构蛋白表达发生改变。而两个地区鸡毒支原体分离株的药物敏感性实验结果表明西藏分离株的药物敏感性高于重庆分离株,造成这种差异的原因可能与不同地区、不同鸡场经常使用的抗菌药物的种类、数量不同有关。


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