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《西北大学》 2003年
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比率荧光光谱仪测量细胞内游离钙离子浓度的研究

郭祎  
【摘要】: 钙离子作为细胞内第二信使把外源信号(激素、光、温度等环境刺激)转变成胞内信号,导致一系列胞内事件的发生。大量的研究表明,Ca~(2+)的信使功能是通过调控细胞内游离Ca~(2+)浓度来实现的。Ca~(2+)信号的产生和终止是细胞内Ca~(2+)增减、振荡的结果。因此测量细胞内的Ca~(2+)浓度是十分重要的。 新的荧光染料的开发和成像技术的发展,极大的促进了对细胞内钙信号传导途径的研究。本文前半部分简要回顾了Ca~(2+)荧光测量方法的历史与发展,介绍了Ca~(2+)作为细胞内第二信使的作用机理及对细胞内Ca~(2+)浓度进行荧光测量的原理并对我们的实验系统做了简洁的说明。本文后半部分主要围绕用比率荧光光谱仪测量细胞内游离Ca~(2+)的研究进行了以下工作: (1)建立了比率荧光光谱仪测量细胞内游离钙离子浓度的实验系统; (2)建立了乳鼠心肌细胞原代培养的模型,并对培养细胞进行了细胞内Ca~(2+)浓度的测量。在心肌细胞外液中加入NE(去钾肾上腺素)后测得的相对荧光强度明显升高,该现象符合NE的生理作用特点,因而表明我们所建立的测量细胞内Ca~(2+)浓度动态变化的心肌细胞实验系统是可行的,该系统可以用于测量加入不同药物后心肌细胞内Ca~(2+)浓度的变化状况,从生物医学的角度进行分析可以研究药物对细胞的作用机理。 (3)通过用Fura-2/AM对B16细胞内Ca~(2+)浓度的测量,确定了B16细胞的制备及荧光染料的载入方法;建立了用随机软件ImageMaster获取被测细胞的图象及进行比率分析的方法,用随机软件FeliX获取被测细胞的荧光图谱及进行比率分析的方法。
【学位授予单位】:西北大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:Q26

【引证文献】
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
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【参考文献】
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【共引文献】
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【同被引文献】
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中国期刊全文数据库 前10条
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【相似文献】
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