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《西北大学》 2005年
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珍稀濒危植物华山新麦草的胚胎学及其遗传多样性研究

王丽  
【摘要】:华山新麦草(Psathyrostachys huashanica Keng.)属禾本科大麦族新麦草属多年生草本植物,为我国特有种,仅分布于陕西华山。由于新麦草属是小麦属的近缘属,加之华山新麦草具有抗旱、抗寒、早熟等许多优良的生物学特性,颇受植物育种工作者的重视。目前,该种已被列为国家一级重点保护植物和急需保护的农作物野生近缘种。本文试图通过胚胎学和遗传多样性两个方面的研究,为华山新麦草的生殖生物学提供基础资料,同时预测华山新麦草的遗传学命运和生存潜能,揭示其遗传变异规律和分化机制,探索其致濒原因。具体内容包括: 1.华山新麦草的胚胎学研究 本文采用常规石蜡切片法对华山新麦草小孢子发生和雄配子体形成过程、大孢子发生和雌配子体形成过程以及胚和胚乳的发育过程进行了观察。结果表明:(1)小孢子母细胞减数分裂为连续型,四分体为左右对称型,成熟花粉为3—细胞型,与小麦属特征一致;(2)华山新麦草大孢子发生始于孢原细胞,大孢子母细胞减数分裂形成直线型四分体,功能大孢子位于合点端,合点端大孢子发育为蓼型胚囊。成熟胚囊为八核七细胞,卵细胞极性明显,助细胞在极核融合前已退化一个,另一个宿存,宿存助细胞丝状器明显,并保留退化助细胞的痕迹。极核排列方向不定,反足细胞在胚囊发育早期增殖,并液泡化;(3)华山新麦草胚胎发生属紫宛型,顶细胞和基细胞都参与胚体的形成。胚胎发育经过二细胞原胚、多细胞原胚、球形原胚、梨形原胚、分化胚和成熟胚阶段。成熟胚具有胚根、胚芽、盾片、胚芽鞘、胚根鞘、外胚叶等典型禾本科植物成熟胚的结构。胚乳发育类型为核型,包括游离核阶段、细胞化阶段和生长成熟阶段。待大量游离核形成之后才形成细胞壁,紧贴胚囊的一层胚乳细胞最后形成种子的糊粉层,其余的胚乳细胞最后充满淀粉粒。华山新麦草的以上特征与一般禾本科植物如小麦基本相同。此外在华山新麦草中还观察到一些特殊点:1) 花粉败育现象;2) 有双孢原细胞、双胚囊以及双球形原胚的现象;3) 反足细胞解体较早,并且有时候异形;4) 胚乳游离核
【关键词】:华山新麦草 胚胎学 RAPD 微卫星标记 遗传结构 遗传多样性
【学位授予单位】:西北大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:Q944.4;Q943
【目录】:
  • 中文摘要7-9
  • Abstract9-12
  • 第一章 前言12-36
  • 1 华山新麦草的背景资料12-16
  • 1.1 生长环境12
  • 1.2 新麦草属的研究12-13
  • 1.3 植物学特征13-14
  • 1.4 生物学特性14-15
  • 1.5 研究现状15-16
  • 2 植物生殖生物学研究概述16-18
  • 2.1 发展史16-17
  • 2.2 最新进展17-18
  • 3 遗传多样性研究概述18-29
  • 3.1 遗传多样性的研究方法19-29
  • 3.1.1 形态标记19
  • 3.1.2 细胞标记19-20
  • 3.1.3 生化标记20
  • 3.1.4 分子标记20-28
  • 3.1.4.1 RAPD21-22
  • 3.1.4.2 微卫星标记22-28
  • 3.1.4.2.1 微卫星的定义及遗传特征22
  • 3.1.4.2.2 微卫星的类型22-23
  • 3.1.4.2.3 微卫星的多态性及产生原因23
  • 3.1.4.2.4 微卫星的突变率及其影响因素23
  • 3.1.4.2.5 获得微卫星标记的方法23-24
  • 3.1.4.2.6 微卫星的优点及应用24
  • 3.1.4.2.7 不同种属之间的扩增24-28
  • 3.1.5 遗传多样性的取样策略28-29
  • 3.2 遗传多样性的影响因素29
  • 3.2.1 物种的生物学特性29
  • 3.2.2 环境条件29
  • 4 植物濒危现象及其濒危机制29-33
  • 4.1 濒危植物的主要特征31
  • 4.2 植物濒危的内在和外在因素31-33
  • 4.3 濒危植物的解危措施和保护对策33
  • 5 立题依据和主要内容33-36
  • 5.1 立题依据33-35
  • 5.2 主要内容35-36
  • 第二章 华山新麦草的胚胎学研究36-51
  • 1 材料与方法36-37
  • 1.1 实验材料36
  • 1.2 实验方法36-37
  • 2 观察结果37-42
  • 2.1 小孢子发生和雄配子体形成37-39
  • 2.1.1 花药壁的发育37-38
  • 2.1.2 小孢子发生38
  • 2.1.3 雄配子体发育38-39
  • 2.2 大孢子发生和雌配子体形成39-40
  • 2.2.1 大孢子发生39
  • 2.2.2 雌配子体形成39-40
  • 2.2.3 双孢原细胞及双胚囊现象40
  • 2.3 胚和胚乳的发育40-42
  • 2.3.1 胚的发育40-41
  • 2.3.2 双胚现象41
  • 2.3.3 胚乳的发育41-42
  • 2.3.4 果皮和种皮的发育42
  • 3 讨论42-51
  • 3.1 关于小孢子发生和雄配子体形成42-43
  • 3.2 关于大孢子发生和雌配子体形成43-44
  • 3.3 关于胚和胚乳的发育44-51
  • 第三章 华山新麦草遗传多样性的RAPD分析51-66
  • 1 材料与方法51-56
  • 1.1 野外取样51-52
  • 1.2 DNA的提取与纯化52-53
  • 1.3 DNA纯度检测53
  • 1.4 引物筛选53-54
  • 1.5 PCR扩增及产物检测54-55
  • 1.6 数据处理55-56
  • 2 结果与分析56-63
  • 2.1 多态性位点比率56-57
  • 2.2 华山新麦草自然居群的遗传结构57-59
  • 2.3 华山新麦草亚居群间的遗传距离与聚类分析59-61
  • 2.4 主成分分析61-62
  • 2.5 华山新麦草亚居群遗传多样性与其海拔的相关性分析62-63
  • 3 讨论63-66
  • 3.1 华山新麦草自然居群的遗传多样性63
  • 3.2 华山新麦草自然居群的遗传结构和分化63-66
  • 第四章 华山新麦草遗传多样性的SSR分析66-74
  • 1 材料与方法66-68
  • 1.1 引物筛选66
  • 1.2 PCR扩增66-67
  • 1.3 电泳检测67
  • 1.4 数据处理67-68
  • 2 结果与分析68-72
  • 2.1 遗传多样性68-69
  • 2.2 华山新麦草自然居群的遗传结构69-72
  • 3 讨论72-74
  • 3.1 关于共用引物72
  • 3.2 华山新麦草自然居群的遗传多样性72
  • 3.3 华山新麦草的遗传结构和分化72-74
  • 第五章 讨论74-79
  • 1 华山新麦草的濒危原因及保护策略74-76
  • 2 等位酶、RAPD、SSR和ISSR四种分子标记的比较76-78
  • 3 结论78-79
  • 参考文献79-90
  • 致谢90-91
  • 在读期间发表的论文91

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