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《西北大学》 2010年
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新型单克隆抗体荧光探针和pH值荧光探针的合成及免疫荧光组织化学应用

武祥龙  
【摘要】: 荧光探针技术是一种借助荧光显微镜在分子水平上进行实时监测的重要技术手段。荧光探针技术灵敏度高、可视性强,并且对所研究的目标细胞或者生物大分子干扰小、无损伤,所以得到广泛的应用。荧光探针已经在分子生物学、微生物学、分析化学、生物化学、化工和医药工业等领域发挥着重要作用,并且应用越来越广泛。化学家和生物学家不断设计和合成各种新型的荧光探针染料来满足不同应用需求和更高的荧光性能要求。荧光探针染料的合成和应用研究已经成为一个化学和生命科学的交叉前沿热点研究领域。 在各种荧光探针染料中,荧光素类荧光探针染料应用最为普遍。荧光素由于它合成方便、容易分离提纯,具有高的荧光量子产率,没有毒性等优点,成为人们广泛关注的重要的探针染料。荧光素母体容易进行化学修饰,可以得到满足不同需求的荧光素衍生物。所以,荧光素类探针染料广泛应用于DNA测序和抗体蛋白标记等生物体系的研究领域。 本论文主要论述了新型荧光素类单克隆抗体荧光探针染料的设计、合成以及荧光素类荧光探针在免疫荧光组织化学方面的应用。同时,本论文还阐述了新型荧光素类pH值荧光探针的设计合成及光谱性质测定。主要内容有如下几个方面。 1.对合成荧光素母体的重要原料2,4-二氯间苯二酚的合成进行详细研究,提出简便的2,4-二氯间苯二酚一步合成方法,优化反应条件。对比了传统的合成方法和一步合成方法的优缺点。介绍了三氟乙酸N-琥珀酰亚胺酯的合成方法。 2.设计并合成了5(6)-羧基-4,7-二氯荧光素和5(6)-羧基-2’,4’,5’,7’,4,7-六氯荧光素,并表征了它们的结构。讨论了反应条件对产率的影响,提出最佳反应条件。详细研究了几种结构相似的含氯荧光素的荧光性质与氯原子个数的构效关系。成功分离出5(6)-羧基-4,7-二氯荧光素的6位异构体和5(6)-羧基-2’,4’,5’,7’,4,7-六氯荧光素的6位异构体,并且表征了它们的结构。 3.合成了1种未见文献报道的具有氨基醇连接链的荧光素基单克隆抗体DNA荧光探针,表征了化合物的结构,研究了光谱性质。该荧光探针主要应用在DNA测序。合成了10种未见文献报道的具有氨基酸链的新型荧光素基单克隆抗体蛋白标记荧光探针染料,并对其结构进行表征,详细研究了它们的光谱性质。 4.合成了10种未见文献报道含氯荧光素类荧光探针,并表征它们的结构。选取5(6)-酰氨己酸琥珀酰亚胺酯-2’,4’,5’,7’,4,7-六氯荧光素(化合物8dh)进行免疫荧光组织化学应用实验,用直接法标记了人体骨肉瘤上皮细胞,并且通过激光共聚焦显微镜获得标记细胞荧光图像。用直接法标记小鼠心肌组织,并用荧光显微镜获得组织荧光图片。免疫荧光组织化学应用表明新型单克隆抗体荧光素探针染料具有良好的荧光性能和生物学性能,是一类性能优良的单克隆荧光探针。 5.简要综述了pH值荧光探针的研究进展;设计合成了八种荧光素为母体的荧光素pH值探针染料,表征了它们的结构;详细研究了pH值荧光探针的荧光光谱和紫外光谱性质,实验发现,它们能够在酸性范围内指示pH值的变化。它们是性能优良的pH值荧光探针,将会在生物学中发挥重要作用。
【学位授予单位】:西北大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:Q78

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【引证文献】
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1 徐学涛;二苯烯酮类化合物的合成及其荧光性能研究[D];广东工业大学;2011年
【参考文献】
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1 赵启韬,苗俊英;激光共聚焦显微镜在生物医学研究中的应用[J];北京生物医学工程;2003年01期
2 刘军连,徐志凯,喻启桂,王红英,郑燕华,吕世超,张建中;单克隆抗体间接免疫荧光试验检测生殖器单纯疱疹病毒感染[J];第四军医大学学报;2004年08期
3 车小燕,丘立文,潘玉先,徐华,郝卫,廖志勇,梅亚波,张丽娅,万卓越,袁国勇,黄震;SARS冠状病毒N蛋白单克隆抗体的快速、高效制备的方法研究[J];第一军医大学学报;2003年07期
4 王流芳,刘海新,张玉祥,任艳平,何凤英,吴应文,艾军;几种荧光素衍生物的合成及其生物荧光活性的研究[J];发光学报;1987年04期
5 赵瑜,李隆弟;罗丹明和荧光素类染料的固体基质室温燐光研究[J];分析化学;1996年07期
6 马会民,苏美红,梁树权;三嗪类光学探针与标记分析[J];分析化学;2003年10期
7 张宁;陈蓁蓁;唐波;;荧光成像在生物分析中的应用[J];分析化学;2006年07期
8 刘欣,王红,张华山;生物分析中近红外荧光探针进展[J];分析科学学报;2001年04期
9 王栩;林金明;;化学发光免疫分析技术新进展[J];分析试验室;2007年06期
10 韩洁;李剑利;贺怀贞;武祥龙;史真;;新型荧光素类细胞钙离子荧光探针Fluo-Cl的设计、合成及表征[J];高等学校化学学报;2008年10期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 姚丽萍;高银祥;祖元刚;;流式细胞术在植物学研究中的应用[J];安徽农学通报(上半月刊);2009年09期
2 施健健;周红霞;张红琳;;抑制素基因免疫京白鸡后在卵巢组织中的表达[J];安徽农学通报(上半月刊);2009年13期
3 胡晓苗;李春芬;汪丽;赵磊;;高免卵黄抗体提纯及提取液冻干的研究[J];安徽农业科学;2006年10期
4 商月惠;董文轩;王颖;王蒴;于维军;周攀;;用激光扫描共聚焦显微镜观测果树胚胎特征的方法[J];安徽农业科学;2007年14期
5 廉宜君;陈韩英;李炳奇;杨金凤;袁军;;沙枣多糖对免疫抑制小鼠的调节作用[J];安徽农业科学;2009年16期
6 申勋宇;;重金属铅对鲫鱼血清抗氧化能力的影响[J];安徽农业科学;2010年02期
7 车达;金鑫;陈莹莹;费景春;姜丹丹;吴丹;王笑玉;;延边黄牛气肿疽间接ELISA诊断方法的建立[J];安徽农业科学;2011年02期
8 孟泽婧;李玉成;吴涓;王宁;;巢湖蓝藻衰亡过程中颜色及形态变化的室内模拟研究[J];安徽农业科学;2011年17期
9 晏容;刘流;刘晖;贺莉芳;;大肠杆菌感染后家蝇幼虫血细胞中ACP和POD活性的变化[J];安徽农业科学;2011年21期
10 蔡亚非,傅兆水,王海涛,刘再群,郝家胜,陈发扬;中华鳖卵泡免疫组织化学研究[J];安徽师范大学学报(自然科学版);2003年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 周正新;;生脉片对IL-1介导体外培养软骨细胞凋亡的影响[A];中医药理论与应用研究——安徽中医药继承与创新博士科技论坛论文集[C];2008年
2 李龙;李春莲;曾家顺;夏露;;佐剂性关节炎大鼠滑膜E2F-1、RB的表达及益赛普对其影响[A];贵州省医学会风湿病学分会第四届学术年会专题论文汇编[C];2010年
3 王雪;邱建备;尹兆益;宋志国;;近红外荧光探针在生物分析中的应用进展[A];战略性新兴产业的培育和发展——首届云南省科协学术年会论文集[C];2011年
4 姜淑媛;张丽霞;;茶树荧光性绿斑病叶胞内pH值变化[A];2008茶学青年科学家论坛论文集[C];2008年
5 周伟;祝家镇;徐小虎;;双重免疫酶标染色法在法医病理中的应用[A];第五次全国法医学术交流会论文集[C];1996年
6 周元林;甄瑞燕;何方方;;原位填充改性增强粘接特种炸药用胶粘剂粘接强度的研究[A];2006年全国高分子材料科学与工程研讨会论文集[C];2006年
7 叶成;;化学学科发展综合报告(2006)[A];化学学科发展研究报告(2006)[C];2006年
8 林金明;王栩;;微孔板化学发光酶免疫分析法定量检测肿瘤标志物的方法学研究[A];中国化学会第26届学术年会分析化学分会场论文集[C];2008年
9 徐占成;董朝青;任吉存;;荧光相关光谱-三维扫描共焦荧光成像联用系统研究及生物应用[A];第十届中国化学会分析化学年会暨第十届全国原子光谱学术会议论文摘要集[C];2009年
10 刘畅;从宇鸿;张颖;白银娟;郭媛;杨秉勤;史真;;一种新型刚性罗丹明荧光标记探针的合成[A];有机合成创新—产业化的新动力——中国化学会全国第三届有机合成化学与过程学术讨论会论文摘要集[C];2010年
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1 王冰;EB病毒潜伏膜蛋白2A特异性CTL表位筛选及免疫功能研究[D];南京医科大学;2009年
2 石金明;典型煤种热解气化特性研究[D];华中科技大学;2010年
3 姚闽娜;魔芋葡甘聚糖结构与其稳定性研究[D];福建农林大学;2010年
4 薛亚东;肿瘤细胞表面聚糖的电化学检测与细胞成像分析[D];南京大学;2010年
5 张元红;咔唑衍生物类双光子荧光探针在生物成像中的应用[D];山东大学;2010年
6 徐春秀;微流控芯片动态胞吞和高通量单细胞分析的研究[D];浙江大学;2011年
7 陈克研;猪血凝性脑脊髓炎免疫层析检测试纸及其灭活疫苗的研制[D];吉林大学;2011年
8 孙晓芳;三七总皂苷防治博莱霉素诱导小鼠肺纤维化的实验研究[D];北京中医药大学;2011年
9 王策;膈神经端侧吻合迷走神经重建高位颈髓损伤后呼吸功能的研究[D];第二军医大学;2011年
10 孙运花;电针促进面神经损伤修复的JAK_1-STAT_3信号转导机制研究[D];成都中医药大学;2011年
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1 刘晓云;硫酸肟酯类化合物的合成及其除草活性研究[D];华中农业大学;2010年
2 曲丽洁;用于动物性食品中莱克多巴胺快速检测的SPR技术研究[D];华中农业大学;2010年
3 周敏雁;不同电针频率对山羊痛阈和中枢脑啡肽表达水平的影响[D];华中农业大学;2010年
4 张蔚;干细胞因子和胰岛素对小鼠小肠Cajal间质细胞的作用[D];南京医科大学;2010年
5 钮庆良;时间分辨光谱技术在免疫分析中的应用[D];长春理工大学;2010年
6 张学芳;家蚕Bmphb基因的表达及其功能初步研究[D];浙江理工大学;2010年
7 赵燕;家蚕HMGA蛋白的原核表达与功能研究[D];浙江理工大学;2010年
8 李会娟;家蚕转胶蛋白基因的原核表达及功能的初步研究[D];浙江理工大学;2010年
9 李佩;家蚕BmSTMN基因的表达分析及其亚细胞定位[D];浙江理工大学;2010年
10 朱立明;家蚕TRAPα基因的表达与功能分析[D];浙江理工大学;2010年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 赵革平,沃兴德;姜黄素及其衍生物的抗氧化作用研究概况[J];浙江中医学院学报;1998年06期
2 杨睿,刘绍璞;某些分子光谱分析法测定蛋白质的进展[J];分析化学;2001年02期
3 付艳艳;孙志伟;赵怀鑫;白新伟;索有瑞;李玉林;尤进茂;;荧光探针5-羰基咪唑苯并吖啶酮的合成及其LC-APCI-MS法测定胺[J];高等学校化学学报;2009年11期
4 张晓星;何苗;刘爱林;陈伟;林新华;;荧光法对姜黄素与牛血清白蛋白相互作用的研究[J];光谱实验室;2010年02期
5 马晓华,沃兴德,梁海曼;姜黄素抗肿瘤作用与诱导肿瘤细胞凋亡的研究概况[J];国外医学(肿瘤学分册);1999年01期
6 俞定岳;;姜黄素衍生物合成的研究进展[J];海峡药学;2011年03期
7 朱维平;徐玉芳;钱旭红;;具有重要生物学意义的重金属及过渡金属离子荧光分子探针[J];化学进展;2007年09期
8 杨频;我国生物无机化学的发展[J];化学通报;1999年12期
9 邓兵;杜志云;唐煌;古练权;;姜黄素类似物的合成及其清除自由基的研究[J];化学研究与应用;2006年09期
10 杜志云;古练权;张焜;徐学涛;黄宝华;方岩雄;;姜黄素及其衍生物对醛糖还原酶的抑制作用[J];化学研究与应用;2007年08期
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1 汪宝和;荧光探针的合成及表征[D];天津大学;2005年
2 关晓琳;新型温度/pH荧光双重响应性高分子发光材料的合成及发光性能研究[D];兰州大学;2007年
3 贺怀贞;新型Ca~(2+)荧光探针的设计、合成及胞内信使作用研究[D];西北大学;2009年
4 杜健军;IIB族离子荧光探针的研究与细胞成像的应用[D];大连理工大学;2009年
5 崔景强;苯乙烯类双光子荧光探针的合成与应用研究[D];大连理工大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前9条
1 李少博;姜黄素衍生物的合成及其生物活性研究[D];贵州大学;2007年
2 苏少景;光谱法研究药物小分子与牛血清白蛋白的作用机理[D];南昌大学;2007年
3 朱建华;荧光分子探针制备、性能研究及其在环境分析化学中的应用[D];湖南大学;2007年
4 陆伟红;有机荧光分子的合成、表征及离子识别研究[D];苏州大学;2008年
5 郭柯馨;基于PET机理的Hg~(2+)荧光探针的设计和应用研究[D];大连理工大学;2009年
6 宋春霞;基于罗丹明B的阳离子荧光探针的研究[D];大连理工大学;2009年
7 董念;光谱法研究三种黄酮类药物小分子与牛血清白蛋白的相互作用[D];中南大学;2009年
8 刘根兰;化学计量学—光谱法研究某些小分子与牛血清白蛋白的相互作用[D];南昌大学;2008年
9 窦月磊;苝酰亚胺类荧光探针的研究[D];大连理工大学;2010年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 朱承谟;标记免疫分析技术进展[J];标记免疫分析与临床;2002年03期
2 尹东光,贺佑丰,刘一兵,沈德存,韩世泉,罗志福;标记免疫分析技术的发展点评[J];标记免疫分析与临床;2003年01期
3 骆建新,郑崛村,王伦安,洪华容,李晋川,伍莉萍,杨秀岑;四苯硼钠和对苯苯酚协同增强化学发光的研究[J];第三军医大学学报;2002年03期
4 汪美先,高谦,秦克锋,沈茜,唐家琪;单纯疱疹病毒单克隆抗体的研究及其应用[J];第四军医大学学报;1989年04期
5 刘军连,徐志凯,王德堂,王红英,许东亮;西安市两医院育龄妇女和儿童中人疱疹病毒6型血清流行病学调查[J];第四军医大学学报;2004年01期
6 王流芳,刘海新,张玉祥,任艳平,何凤英,吴应文,艾军;几种荧光素衍生物的合成及其生物荧光活性的研究[J];发光学报;1987年04期
7 姜雄平,许丹科,刘耀清,马立人;化学发光核酸传感器的研制[J];分析化学;2000年01期
8 吴晓明,周宜开,任恕,郝巧玲;错配杂交化学发光法检测细胞色素P4501A1基因多态性[J];分析化学;2002年11期
9 贾宏新,吴志勇,方肇伦;微流控芯片免疫分析方法研究进展[J];分析化学;2005年10期
10 林章碧,苏星光,张皓,牟颖,孙晔,胡海,杨柏,闫岗林,罗贵民,金钦汉;用水溶液中合成的量子点作为生物荧光标记物的研究[J];高等学校化学学报;2003年02期
【相似文献】
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1 沈景山,孙丹丹,付连春,吕文波,吕国伟,叶学敏,孟广政,宋增福;荧光光谱法研究抗癌药物与DNA的相互作用[J];光谱学与光谱分析;2005年02期
2 刘斌;王永详;;细胞Zn~(2+)荧光探针研究进展[J];化学与生物工程;2006年04期
3 韩洁;李剑利;贺怀贞;武祥龙;史真;;新型荧光素类细胞钙离子荧光探针Fluo-Cl的设计、合成及表征[J];高等学校化学学报;2008年10期
4 阮康成;荧光探针Bis-ANS和磷酸丙糖异构酶的相互作用[J];生物物理学报;1992年04期
5 汪乐余,赵长庆,朱昌青,王伦;功能性ZnS纳米荧光探针的合成及其光谱性质研究[J];光谱学与光谱分析;2004年01期
6 朱顺清;李伟;;8-(2′-萘磺酰)-胺基喹啉锌荧光探针的合成及其对酵母细胞的染色[J];信阳师范学院学报(自然科学版);2007年04期
7 周艳梅;童爱军;;2,6-二氨基吡啶衍生物作为过渡金属离子荧光探针的研究[J];光谱学与光谱分析;2007年12期
8 郑爱芳;方典军;陈金龙;;功能化硒化镉量子点的制备以及作为汞离子荧光探针的研究[J];安庆师范学院学报(自然科学版);2008年02期
9 江玉亮;邱道骥;吴婧;韩巧荣;王炳祥;;中氮茚衍生物对金属离子选择识别性的研究[J];南京师大学报(自然科学版);2008年03期
10 ;可高选择性检测活细胞内有机过氧化自由基的荧光探针[J];科学通报;2011年06期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 周硼;孟庆涛;宋春霞;赵秀文;;荧光探针法测定水环境中汞离子的研究[A];第五届全国环境化学大会摘要集[C];2009年
2 陈进雪;叶志强;王桂兰;袁景利;;一种过氧化氢测定用新型铽配合物荧光探针的设计、合成与应用[A];第十届中国化学会分析化学年会暨第十届全国原子光谱学术会议论文摘要集[C];2009年
3 张同艳;孙世国;彭孝军;;生物荧光探针芘类活性衍生物的合成研究[A];中国化学会第二十五届学术年会论文摘要集(上册)[C];2006年
4 龚维;邢艳珑;尹伶灵;丁白瑜;唐波;;基于硒氮、硒磷功能键的新型荧光探针及其在细胞成像中的应用[A];中国化学会第十五届全国有机分析及生物分析学术研讨会论文集[C];2009年
5 郑小兰;樊晓星;闫敏;孙丹;郑洪;;一种新型高选择性次氯酸荧光探针[A];中国化学会第27届学术年会第09分会场摘要集[C];2010年
6 陈绘丽;高巍;薛锦芳;;一种新颖的锌离子荧光探针及其在细胞成像中的应用[A];中国化学会第27届学术年会第08分会场摘要集[C];2010年
7 徐立谦;白银娟;孙伟;李剑利;杨秉勤;史真;;新型铜离子诱导FRET荧光探针的设计与合成[A];有机合成创新—产业化的新动力——中国化学会全国第三届有机合成化学与过程学术讨论会论文摘要集[C];2010年
8 徐容;Kenneth W.Spitzer;;应用荧光探针测定单个心肌细胞内的氯离子浓度[A];动物学专辑——上海市动物学会2000年年会论文集[C];2000年
9 佟连鹏;张建伟;孔志霞;崔京南;;一种具有变色效应的可在生理pH下检测Co~(2+)的荧光探针[A];中国化学会第26届学术年会光化学分会场论文集[C];2008年
10 王丹丹;张文珠;叶志强;王桂兰;袁景利;;荧光素-铕复合纳米粒子比率型荧光探针的制备与应用[A];第十届中国化学会分析化学年会暨第十届全国原子光谱学术会议论文摘要集[C];2009年
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1 通讯员 杨璞 朱群;选购服装看看pH值[N];家庭医生报;2010年
2 本报记者 李廷睿 杨红 实习生 廖艳明;服装新标实施月余买卖双方鲜知PH值[N];法治快报;2010年
3 ;权威专家:瓶装水PH值不成问题 可放心饮用[N];民营经济报;2008年
4 记者 梁莉萍;“蓝翔”牌工装面料甲醛、ph值安全性能获中国人保承保[N];中国纺织报;2009年
5 记者 王文朋;大多数服装未标明PH值甲醛含量[N];东营日报;2010年
6 力纳;pH值争论推动了公众认知度[N];消费日报;2008年
7 记者 刘传江;部分服装pH值不合格[N];中国消费者报;2009年
8 记者 王屹立;服装pH值和甲醛含量有了具体规定[N];河南日报;2010年
9 宗文;服装pH值和成分标注不合格是主要问题[N];中国纺织报;2011年
10 记者 张斯文 桑蕾;发生泄漏和爆炸可能性较小 不会影响松花江流域PH值[N];黑龙江日报;2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 武祥龙;新型单克隆抗体荧光探针和pH值荧光探针的合成及免疫荧光组织化学应用[D];西北大学;2010年
2 崔雷;反应激活型疾病诊断荧光探针及其它相关探针的设计、合成及应用[D];华东理工大学;2011年
3 李娜;腙类衍生物金属离子荧光探针及单核苷酸多态性荧光检测[D];清华大学;2010年
4 徐林;多功能荧光探针的设计、合成与性能研究[D];华东理工大学;2012年
5 孟庆涛;材料化荧光探针的合成及应用研究[D];大连理工大学;2011年
6 吴玉波;手性d-PET硼酸荧光探针的合成及性能研究[D];大连理工大学;2011年
7 龙凌亮;一系列有机小分子荧光功能材料的设计、合成及其应用研究[D];湖南大学;2010年
8 程探宇;氟硼二吡咯(BODIPY)荧光探针的设计、合成与应用研究[D];华东理工大学;2011年
9 张小玲;新型细胞Ca~(2+)荧光探针的合成及在生命科学研究中的应用[D];西北大学;2002年
10 崔冠峰;新型稀土时间分辨荧光探针的合成与应用[D];大连理工大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王嵩;基于BODIPY染料的汞荧光探针的设计与应用[D];大连理工大学;2010年
2 黄宝丽;双光子金属离子荧光探针的制备及其性能研究[D];山东轻工业学院;2011年
3 李湘广;新型Carbopyronine荧光探针的设计及合成研究[D];西北大学;2011年
4 张妍;几种荧光探针的合成及在有机溶剂中水含量检测中的应用[D];湖南大学;2010年
5 陈修福;基于ICT机理铜离子比率荧光探针[D];大连理工大学;2011年
6 刘媛媛;肽链修饰的荧光探针测定活性生物分子的研究及应用[D];山东师范大学;2010年
7 杜妍晔;基于PET原理的铬荧光探针的设计与合成[D];广东工业大学;2011年
8 彭博;氨基卟啉荧光探针的合成与应用[D];湖南大学;2010年
9 孙辉;pH荧光探针的构筑[D];南京大学;2011年
10 汪乐余;半导体纳米荧光探针的合成、表征及应用[D];安徽师范大学;2002年
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