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《西北农林科技大学》 2010年
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太白蓼和朱砂七提取物抗病毒及抑菌活性研究

张为民  
【摘要】:筛选具有抗病毒和抑菌活性的中草药不仅为开发新型天然药物提供理论依据,而且对中草药资源的开发和利用具有重要的意义。本研究对采自陕西省太白山地区7种中草药各提取部位的体外抑菌作用进行初步筛选,发现太白蓼(Polygonum taipaishanense Kung)和朱砂七(Polygonum cillinerve (Nakai) Ohwl)提取物的体外抑菌活性明显,然后进行了太白蓼和朱砂七抗病毒和抑菌活性部位的筛选、有效成分分离及鉴定,获得以下结果: 1.朱砂七乙酸乙酯部位(PCE)、太白蓼乙酸乙酯部位(PTKE)、老鹳草正丁醇部位(GWN)及老鹳草的乙酸乙酯部位(GWE)均有较强的抑菌活性,且具有较宽的抗菌谱。 2. PTKE对新城疫病毒(NDV)在鸡胚成纤维细胞(CEF)上增殖的抑制率为32.49%,PTKEB对NDV在CEF上有直接杀灭、抗吸附和抑制增殖作用(抑制率分别为90.52%、65.23%和61.21%),并且与剂量呈正相关性。鸡胚试验证实不同浓度PTKEB药物和病毒混合组对NDV在鸡胚内增殖具有显著的抑制作用(P0.01)。体外抑菌试验表明,PTKE对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、沙门菌、巴氏杆菌和无乳链球菌的MBC分别为100 mg/mL、25 mg/mL、50 mg/mL、25 mg/mL和50 mg/mL;分离物PTKEA、PTKEB和PTKEC对金黄色葡萄球菌、沙门菌和无乳链球菌有一定的抑制作用,但对大肠埃希菌和巴氏杆菌没有抑制作用。 3. PTKE对蓖麻油和番泻叶所致的小鼠腹泻均有极显著的抑制作用(P0.01);对乙酸所致家兔肠黏膜毛细血管通透性增高、腹腔注射醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增高及皮内注射二甲苯致皮肤毛细血管通透性增高分别具有极显著(P0.01)和显著(P0.05)抑制作用;在雏鸡饮水中添加不同浓度PTKE,各试验组雏鸡胸腺指数、脾脏指数和法氏囊指数与对照组相比差异显著或极显著(P0.05或P0.01),免疫器官的组织结构发育状况也明显优于对照组;PTKEB浓度为7.81μg/mL时,其对脾脏、胸腺、法氏囊和外周血淋巴细胞的体外增殖作用极显著高于细胞对照组(P0.01);PTKE对雏鸡的生长有一定的促进作用,但其降低料肉比和增加饲料转化率的趋向不明显。 4.朱砂七氯仿部位(PCC)、大黄素(EM)和大黄素甲醚(PH)对NDV在CEF上增殖的抑制作用不明显;朱砂七乙酸乙酯部位(PCE)及进一步分离物PCEA对NDV在CEF上的抑制率为39.12%和72.33%;PCEA可抑制NDV在鸡胚内的增殖,其预防组、药物和病毒混合组与病毒对照组的血凝效价均差异显著(P0.05),但治疗组与病毒对照组差异不显著。PCE对9株临床分离菌的MBC均小于100 mg/mL,PCC对9株菌也有一定抑制作用;EM对鸡源沙门菌,猪源链球菌,奶牛源无乳链球菌、表皮葡萄球菌和金黄色葡萄球菌的MBC分别为5 mg/mL、2.5 mg/mL、2.5 mg/mL、2.5 mg/mL和1.25 mg/mL;PCEA对鸡源沙门菌,猪源链球菌,奶牛源无乳链球菌、表皮葡萄球菌和金黄色葡萄球菌的MBC分别为24 mg/mL、24 mg/mL、12 mg/mL、6 mg/mL和6 mg/mL。 5. EM、PH、PCEA、PCEB和PTKEB对猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)均具有一定的直接杀灭作用(抑制率均大于71.28%);PCEA、PCEB和PTKEB可抑制TGEV在ST细胞内增殖,三者对TGEV的生物合成的抑制率分别为82.65%、85.74%和54.04%;EM、PCEA、PCEB和PTKEB对TGEV感染细胞具有一定的吸附保护作用,其抑制率分别为44.85%、69.07%、83.08%和48.28%;不同浓度的PCEA、PCEB和PTKEB对TGEV在ST细胞生物合成的抑制作用随药物剂量的增加而增强。 6.经系统预试、柱色谱分离及液相-质谱分析等方法对太白蓼和朱砂七抗病毒和抑菌有效部位的化学成分进行鉴定,结果从PTKEB部位检出儿茶素类和3′,4′,5,7-四甲氧基黄酮,从PCC和PCE检测出大黄素、大黄素甲醚、大黄素-8-β-D-葡萄糖甙等蒽醌类、白藜芦醇和白藜芦醇苷等二苯乙烯类,这些物质为其抗病毒和抑菌作用的主要活性成分。
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