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《西北农林科技大学》 2012年
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林麝雄激素受体多态性和性激素水平与其泌香量关系的研究

白康  
【摘要】:麝具有独特的价值,是我国极其重要的动物资源。林麝是目前养殖规模最大、数量最多的麝科动物。雄麝分泌的麝香具有很高的医用价值和经济价值,被广泛用于亚洲传统医药和国际香料业,由于市场的巨大需求,加之人类社会经济的快速发展,致使麝类的生态环境和栖息地受到严重破坏,且日益缩小,导致麝科动物数量锐减,处于濒危状态。为了更好、更科学地保护和利用麝类资源,1958年,人工养麝工作开始进行,经过多年实践研究,虽取得了一些成绩,但仍存在许多亟待解决的问题,如麝香高产基因的筛选,影响泌香量相关激素的种类等,至今仍处于探索之中。在并不影响麝的自然种群数量、麝的正常生殖生理规律的情况下,如何科学地提高麝的泌香量,仍是目前亟待解决的问题。 本论文在林麝雄激素受体多态性、性激素水平及与其泌香量的关系方面做了研究,获得了如下新的结果: 1.建立了一种高效从林麝毛发中提取总DNA的方法。利用PCR仪法与传统的酚/氯仿法对提取的总DNA进行比较分析,发现上述两种方法提取的DNA作为模板,对林麝雄性激素受体基因外显子1进行PCR扩增,获得的PCR产物条带清晰。在获得的总DNA量一致的情况下,PCR仪法不仅所用的毛发量少(3-5根),而且所提DNA纯度高(A260nm/A280nm=1.818),可见,PCR仪法比传统的酚/氯仿法步骤简易、高效。因此,PCR仪法适用于从珍稀野生动物、应激强烈的动物及难以保定的大家畜毛发样本中提取总DNA,具有广泛的应用价值。 2.雄性林麝雄性激素受体(AR)基因外显子(1、4、8)没有多态性。采用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)分析方法检测了170头雄性林麝的雄性激素受体(AR)基因外显子1、4、8在雄麝中的多态性,并对其核苷酸序列进行测序分析。结果表明,AR基因外显子1、4、8的扩增片段在雄麝中均不存在多态性,说明雄性林麝AR基因外显子(1、4、8)在林麝中具有高度保守性。 3.检测了泌香期雄性林麝(50头)分泌的性激素(睾酮、雌二醇和孕酮)的含量,分析了其变化规律及其与泌香量的关系。利用放射免疫分析法(RIA)检测了2010.4—2011.12间雄性林麝粪样中的性激素水平。结果显示,不论在哪个年龄段的雄性个体中睾酮、雌二醇含量在泌香期均有明显的变化规律。正常期粪样中睾酮含量较低,泌香期前睾酮的含量开始升高,泌香初期睾酮含量急剧升高,显著高于正常期(P<0.05),泌香盛期睾酮的含量达到最高峰,显著高于其它各个时期(P<0.05),泌香后期睾酮含量急剧下降,泌香期后继续下降。雌二醇也呈现出与睾酮相似的变化规律,泌香盛期雌二醇的含量也达到最高峰,除了8-10岁雄性林麝的雌二醇含量与泌香期后期差异不显著外,与其它各时期均差异显著(P<0.05)。雄性林麝孕酮的含量在整个泌香期表现出无规律性变化。雄麝同一时期不同年龄阶段睾酮含量变化:正常期各年龄阶段差异不显著,泌香期前、泌香初期、泌香盛期2-7岁与1岁雄麝睾酮含量差异显著(P<0.05),泌香盛期8-10岁与1岁雄麝睾酮含量差异不显著,泌香期后期1岁与2-7岁、8-10岁雄麝睾酮含量差异显著(P<0.05),泌香期后各年龄阶段差异均显著(P<0.05)。雄麝同一时期不同年龄阶段雌二醇含量变化:正常期、泌香期初期1岁与2-7岁、8-10岁雄麝雌二醇的含量差异显著(P<0.05),泌香期后期1岁与8-10岁雄麝雌二醇的含量差异显著(P<0.05),其它各时期差异均不显著。相关分析表明,林麝的泌香量与整个泌香期睾酮的含量之间呈显著强正相关(R~2=0.6504,P<0.05),与雌二醇的含量之间呈显著正相关(R~2=0.4565,P<0.05)。可见影响泌香量的不仅是雄性激素(睾酮),还和其他激素(如雌二醇)密切相关,这为林麝的科研提供了重要思路和新途径,也为通过外激素提高雄麝的泌香量提供新的科学依据。 利用粪样来研究半驯养野生动物的性激素是一种较为理想的方法,具有推广与应用价值。本研究有助于濒危动物麝的保护和利用,具有重要的学术价值和经济价值。
【学位授予单位】:西北农林科技大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2012
【分类号】:S865.41

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【参考文献】
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