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《西北农林科技大学》 2012年
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陕西、宁夏盐渍土中抗动物病原菌的放线菌资源研究

王海利  
【摘要】:本试验以分离自陕西、宁夏地区的盐碱土中的放线菌作为供试放线菌,以养殖业中危害比较严重的9种动物肠道病原菌作为靶标菌进行研究。目的是获得一些优良的拮抗性放线菌,初步探索该地区的放线菌资源,为以后的开发利用奠定基础。 利用琼脂块法和平板孔径法对供试的1172株放线菌进行研究,获得了该区域放线菌的类群组成、抗菌谱规律及优良拮抗菌,并对其进行了分类鉴定;初步研究了几株优良拮抗放线菌的发酵液性质,对菌株68H02作了培养基优化及发酵用培养基的选择试验。试验主要结论如下: 1.陕西、宁夏盐渍化土中放线菌以链霉菌属为主,占到供试菌的89.82%,其中非链霉菌占放线菌总数的11.18%。链霉菌中以白孢类群,灰褐类群,黄色类群,烬灰类群,球包类群为主,占到链霉菌总数的71.46%;有拮抗活性的菌株占到47.01%,广谱性拮抗放线菌较少;供试放线菌对不同靶标菌的抑菌作用表现的差异较大,对无乳链球菌1和金黄色葡萄球菌1拮抗效果最高。 2.根据形态特征、生理生化结果和分子生物学的鉴定,初步确定21株供试菌均为链霉菌属。其中5株优良拮抗放线菌的分子鉴定结果表明,菌株68H02与Streptomycesxinghaiensis的亲缘关系最近,其序列相似度为98.505%;菌株69A11与Streptomycesrubrus的亲缘关系最近,其序列相似度为98.732%;菌株71H10与Streptomycesstaurosporininus的亲缘关系最近,其序列相似度为98.333%;菌株SWN323与Streptomyces xinghaiensis的亲缘关系最近,其序列相似度为100%;菌株SWN342与Streptomyces coeruleofuscus的亲缘关系最近,其序列相似度为99.139%。 3.通过对几株优良菌株的发酵液进行温度、酸碱条件及储存时间的稳定性试验,其抑菌活性基本无变化,表明发酵液对储存时间、温度和酸碱都有很好的稳定性。 4.对于培养基的优化本章采用了正交试验法。68H02菌株发酵工艺优化的结果显示,在种龄36h,接种量为6%,初始pH为8.5,培养132h时,该菌株的效价可以达到最大值。发酵液的效价可达到192.45μg/ml,比优化前提高了5.34倍。在此基础上对发酵培养基筛选的结果显示,黄豆粉最有利于菌株的发酵。
【学位授予单位】:西北农林科技大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2012
【分类号】:S154.3

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