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《西北农林科技大学》 2014年
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绵马贯众杀灭鱼类指环虫活性成分的研究

江兵  
【摘要】:指环虫是水产养殖中常见的鱼类寄生单殖吸虫之一,主要寄生在鱼的鳃部,特别在鱼苗、鱼种阶段高寄生密度会导致寄主鱼大批死亡。目前养殖生产中常采用吡喹酮、托曲珠利及阿苯达唑等化学药物防治指环虫病,近年来,由于长期、不合理使用甚至滥用这些药物导致了严重的抗药性,并严重导致水环境污染以及水产品药物残留的食品安全问题,因此,开发新型、高效安全的水产药物是目前迫切的课题。植物源中草药具有对环境友好、耐药性低、天然易降解等优点,能够有效缓解化学药物带来的多种问题,引起了人们的关注,所以从天然植物中寻找和筛选杀虫活性物质是一条有效的创制杀虫药物的途径。因此,本研究针对传统植物中草药绵马贯众进行了杀灭指环虫活性部位选择、活性化合物分离、结构鉴定、对寄主模型金鱼的安全性评价及对指环虫体表形态的影响等工作。取得的试验结果如下:1.绵马贯众杀灭鱼类指环虫活性部位的研究。用甲醇提取粉碎的绵马贯众,过滤、浓缩、低温减压干燥获得浸膏;石油醚、乙酸乙酯、乙酸乙酯:甲醇(1:1)、甲醇等4种不同极性溶剂对绵马贯众甲醇提取物浸膏进行固液萃取,得到4种萃取物。测定各部分的杀指环虫活性,最终选定乙酸乙酯段为最佳杀虫部位,最佳杀虫浓度125.0 mg/L,可以100%杀灭指环虫,且对寄主金鱼安全。2.绵马贯众杀灭指环虫活性成分的分离、结构鉴定。绵马贯众浸膏的乙酸乙酯萃取物用氯仿:甲醇(1:0→0:1)梯度洗脱,TLC检测合并获得3个流分组(流分组A、B、C),杀虫活性检测表明B流分组活性最好。进一步再对其进行多级柱层析分离得到4个化合物,其中化合物Ⅰ、Ⅳ具有较高活性,分别在9.0、11.0mg/L时杀虫率达100%,在48 h对指环虫的半数有效浓度(EC50)分别为2.30、2.71 mg/L。通过波谱解析鉴定化合物Ⅰ为白绵马素AP(C22H2608),化合物Ⅳ为山柰甙(C27H30O14)。其它两个化合物Ⅱ、Ⅲ分别是原儿茶酸(C7H604)、川藿苷A(C29H32015)。3.白绵马素AP和山柰甙对鱼的急性毒性研究。以健康、体重小于5.0 g的金鱼为受试材料进行急性毒性测定,结果表明:白绵马素AP和山柰甙对金鱼的48 h半数致死浓度(LC5o)值分别为 30.4(24.5-37.2)mg/L、33.1(27.9-40.8)mg/L。4.白绵马素AP对指环虫体表形态的影响。通过扫描电镜观察经白绵马素作用的指环虫,其体壁结构出现应激变化,皮层产生孔洞、突起等多种损伤。
【学位授予单位】:西北农林科技大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2014
【分类号】:S948

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