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《西北农林科技大学》 2000年
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成年体细胞克隆山羊研究

郭继彤  
【摘要】: 1.比较了切剖法和抽吸法从屠宰山羊卵巢表面卵泡采集得到的可用卵母细胞数。 实验切剖了4201个卵巢,平均采集可用卵母细胞数4.95枚/卵巢(20794枚/4201 卵巢)。用抽吸法抽取了360个卵巢,平均采集可用卵母细胞数为2.86枚/卵巢 (1029枚/360卵巢)。结果表明两种采集方法采集的可用卵母细胞数差异显著。 用切剖法采集不同季节屠宰的山羊卵巢卵母细胞,结果繁殖季节(10-1月)卵 巢可采集到可用卵母细胞4.50枚/卵巢(3160枚/702卵巢),非繁殖季节(3- 6月)卵巢可采集到可用卵母细胞5.17枚/卵巢(3134/607)。不同季节采集的 卵母细胞数差异显著。结果表明非繁殖季节屠宰的山羊卵巢可采集到更多的可 用卵母细胞。 2.将繁殖季节采集的3286枚卵丘-卵母细胞复合体用于体外成熟,成熟率为67.7% (2223/3286)。非繁殖季节采集的卵巢卵丘-卵母细胞复合体3295枚,成熟率 74.1%(2440/3295)。结果表明不同季节采集的卵母细胞体外成熟率有显著差异。 将采集的屠宰山羊卵巢分别置于20-24℃、25-29℃和30-35℃ 6-8h后,切剖采 到卵丘-卵母细胞复合体2916、6779、702枚。成熟培养后,成熟率分别为69.9% (2039/2916)、69.5%(4713/6779)和56.1%(394/702)。结果表明在30℃以 上存放运送的卵巢中采集的卵母细胞成熟率差,显著低于30℃以下存放的卵巢。 另外,卵母细胞的直径Ф<150μm、150μm<Ф<160μm、Ф>160μm时,卵母 细胞的成熟率分别为0%(0/120)、70.5%(229/325)和79.6%(86/108)。结果 表明卵母细胞直径小于150μm时于本实验条件下不能用于体外成熟。在成熟液 中添加FSH/LH或HMG时,卵母细胞的成熟率分别为68.9%(1813/2633)和74.2% (2637/3556)。结果表明这两种激素对卵母细胞的体外成熟没有显著影响。成 熟液中添加10ng/ml EGF对成熟也没有促进作用,不添加EGF时成熟率为70.0% (403/576),添加EGF时为71.2%(826/1160)。 3.用7%和8%的乙醇激活成熟的山羊卵母细胞7min、10%和20%的乙醇激活5min、 10%的乙醇激活10min,结果卵裂率分别为10.4%(42/403),10.7%(31/289)、 11.0%(31/282),7.1%(3/42)、12.9%(30/233)。在这五组激活的卵裂率之间 无显著差异。这表明乙醇对山羊卵母细胞的激活能力差。用Sr~(2+)-CB激活山羊卵 母细胞6h,12h,16h,24h时的卵裂率分别为2.2%(3/139),80.4%(436/542), 78.8%(178/226),70.1%(60/85);囊胚发育率分别为0%(0/139),15.6%(68/436), 10.1%(18/178),1.6%(1/60)。激活6h时的卵裂率极显著低于其它组。囊胚 的发育率在12h和16h时无显著差异,但与激活6h和24h组相比差异极显著。 结果表明Sr~(2+)-CB激活山羊卵母细胞的适宜时间为12h。用离子酶素联合 成年体细胞克隆山羊的研究 6-DMAP-CB或 6-DMAP激活时,在 6-DMAP培养 4h、Zh和 0.sh时卵裂率分别为 75.9%(154/203)、79.3%(218/275)、80.2%(138/172),囊胚发育率为 16.2f (25/154)、24.8y(54/218)和 18.8%(26/138)。结果表明激活率和囊胚发育 率都无显著差异.在 6-DMAP-CB中培养 4h、Zh时卵裂率为 81.6%(460/564)、 77.9%(120/154),囊胚发育率为 20.9%(96/460)、19.2%(23/120)。与 6-DMAP 培养组相比卵裂率和囊胚发育率都无显著差异.用 DC 120v/。m,20 p s H次电 激活山羊卵母细胞的结果,卵裂率 6 5.3X(15 4/2 36),进一步在卜DMAP中培养 4h后的囊胚发育率为 2.3%(2/84).山羊卵母细胞对温度刺激不敏感,22C激 活 3h和 12h时,激活率为 0.3%(1/265)和 6.2%(8/129)。 4.用 TCM199、mCRlaa、mCRlaa-TCM199、BO-TCM199与山羊卵丘细胞共培养系统培 养激活的山羊卵母细胞,其卵裂率分别为 64.8%(465/718)、64.8%(237/366)、 69.0y(436/632)、75%(54/72)。囊胚发育率分别为 11.4%(53/465)、20.3% (48/237)、15.6%(68/436)、18.5%(10/54).结果表明,四组培养液对卵裂 无显著影响。囊胚的发育率在mcRlaa-TCMI”最高,与TCM199组相比差异极显 著;在没有卵丘细胞共培养时,mCRlaaBSA、mCRlaaBSAFBS、mCRlaaFBS、mCRIBSA、 mCRIFBS培养胚胎的卵裂率无显著差异,但 mCRlaaBSA和 mCRlaaBSAFBS中的囊 胚发育率分别为 30.5%(32/1口5)和 23.6%(58/246),显著高于 mCRIBSA、mCRIFBS、 mCRlaaPBS组中的囊胚发育率0K(0/60)、6.8%(6/88)、8.OH(V87)。囊胚发 育率在mCRIFBS和mCRlaaFBS组之间无显著差异. 5.利用常规的组织培养技术,建立了山羊颗粒细胞、卵丘细胞和成年耳皮肤成纤 维细胞的培养方法,获得了颗粒细胞、卵丘细胞和皮肤成纤维细胞的传代培养 物.这些传代培养物经过冷冻保存后?
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1 ;关于实施“百万山羊工程”的情况调查[J];湖北畜牧兽医;1996年01期
2 刘德藩;泰和县山区乡镇发展山羊生产的调查与思考[J];江西农业经济;2001年04期
3 赵仕恒;;对万县地区山羊生产的思考[J];四川草原;1991年03期
4 冉荣;提高山羊生产水平初探[J];中国畜牧杂志;1995年04期
5 刘长森;大别山山羊生产模式探讨[J];湖北畜牧兽医;1995年01期
6 王新喜;祁东县山羊生产发展迅速[J];湖南农业;1996年05期
7 劳登;德钦县山羊生产与发展[J];云南农业;2001年10期
8 虞群超;浦江县发展山羊生产的前景分析[J];浙江畜牧兽医;2005年01期
9 刘立诚;;山羊生产面临的危机与对策[J];农村经济;1987年03期
10 卢永华;对修水县发展山羊生产的调查与思考[J];江西农业经济;1996年03期
11 鲁牧;山东重视开发山羊生产资源[J];畜牧兽医科技信息;1996年17期
12 胡升益,陆能伟;宁波市北仑区山羊生产现状与发展前景调查[J];浙江畜牧兽医;2001年03期
13 罗启民;;对我县山羊生产的调查与思考[J];湖北畜牧兽医;1988年02期
14 C.Devendra ,道良佐;亚洲地区的绵、山羊生产[J];草食家畜;1990年01期
15 朱遐;用山羊生产tPA[J];生物技术通报;1995年03期
16 罗义春,董闽鲜;浅谈吉安地区山羊生产现状及发展思路[J];江西畜牧兽医杂志;2000年01期
17 高安平,周佳清,王洪敏;毕节地区山羊生产中存在的问题及对策[J];贵州畜牧兽医;2001年04期
18 兰为;资中县山羊生产呈现良好发展势头[J];内江科技;2003年01期
19 林增阔;荒山野草可以发“羊”财[J];浙江畜牧兽医;1995年03期
20 李昌平;四川省山羊生产现状和发展对策[J];四川畜牧兽医;2003年12期
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1 张作仁;熊金洲;闻群英;程抱林;杨太根;韩仕平;;创新山羊养殖模式 推进山羊产业发展——十堰市推广山羊“1235饲养模式”的实践与成效[A];中国畜牧兽医学会养羊学分会全国养羊生产与学术研讨会议论文集[C];2010年
2 姚家志;;浅议武陵山区生态环境与山羊生产[A];重庆市遗传学会第一届学术年会暨纪念孟德尔规律再发现100周年学术讨论会论文集[C];2000年
3 姚德标;耿显准;夏天;;改良品种 提高山羊生产性能 造福海南老少边穷地区[A];西部大开发 科教先行与可持续发展——中国科协2000年学术年会文集[C];2000年
4 傅昌秀;;四川发展山羊生产的潜力[A];第四届中国羊业发展大会论文集[C];2007年
5 李天远;舒大华;;德江县山羊规模化养殖面临问题与发展战略[A];第十一届中国科协年会第26分会场都市型现代农业学术研讨会论文专集[C];2009年
6 杨忠诚;毛凤显;;现代山羊生产繁殖技术综述[A];第四届中国羊业发展大会论文集[C];2007年
7 王定越;徐刚毅;;中国奶山羊的发展现状、存在问题与对策[A];2005中国羊业进展——第二届中国羊业发展大会会刊[C];2005年
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9 甘善化;陈元奇;;尤溪县山羊生产现状及发展对策[A];福建省科协第六届学术年会卫星会议“增强科技创新能力,促进优质畜牧业发展”研讨会论文集[C];2006年
10 宋杰;张英杰;刘月琴;程善燕;;益生素在绵、山羊上的应用研究[A];中国畜牧兽医学会养羊学分会全国养羊生产与学术研讨会议论文集[C];2010年
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1 本报记者 晏武芳;沿河积极筹建山羊科技工业园区[N];铜仁日报;2011年
2 闵保望;波本杂交山羊生产技术[N];中国畜牧水产报;2001年
3 记者 周新力;丰县山羊生产托起农民增收半边天[N];中国特产报;2001年
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5 本报记者 曾永联;“贩羊热”带来“养羊热”[N];广西日报;2006年
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8 柏海萍 彭辰阳 陈锦艳;江苏射阳:试水“草根银行”的喜与忧[N];人民政协报;2009年
9 祝鸿;高产高效的宜都养羊模式[N];中国畜牧兽医报;2005年
10 通讯员 纳惠敏;巍山科技兴牧谱新篇[N];大理日报(汉);2007年
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1 朱广琴;多羔和单羔奶山羊发情期卵巢组织差异表达基因的筛选、鉴定及分析[D];西北农林科技大学;2011年
2 汪代华;天府肉羊种质特性及重要候选功能基因研究[D];四川农业大学;2010年
3 庞训胜;高繁殖力黄淮山羊类固醇激素分泌特点与卵泡颗粒细胞基因差异表达的研究[D];南京农业大学;2009年
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1 汤溥;简阳市山羊产业发展研究[D];四川农业大学;2013年
2 秦婕;山羊THRSP基因多态性与体脂沉积及生态因子的关联性[D];安徽农业大学;2012年
3 乌兰;新疆山羊微卫星标记多态性及其与部分经济性状相关性的研究[D];新疆农业大学;2012年
4 靳海;山羊PRKAG3基因多态性及与脂肪沉积能力的相关性研究[D];湖南农业大学;2012年
5 闫艳;与山羊繁殖性能相关候选基因的研究[D];重庆大学;2010年
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7 赵博渊;山羊RanBP9和CD320基因克隆、组织表达与多态性分析[D];西南大学;2014年
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9 唐倩倩;山羊高繁殖力5个候选基因的研究[D];中国农业科学院;2012年
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