CD58对妊娠早期山羊子宫局部细胞因子的调节及其与EPF关系的研究

【摘要】：试验研究分为二个部分，第一部分主要从三个方面进行研究：（1）采用IL-2的生物学测定方法和应用IL-4、TGF-β1、TGF-β2试剂盒标准测定方法，对正常妊娠组的早期妊娠山羊（第15～19d）子宫局部的细胞因子IL-2、IL-4、TGF-β1、TGF-β2水平（活性）变化规律进行了研究。结果表明：妊娠早期山羊子宫两侧局部细胞因子水平（活性）无差异；妊娠早期山羊子宫局部IL-2活性先呈上升变化，后出现下降趋势；IL-4水平一直呈上升变化；TGF-β1水平较高，但呈不规则曲线变化；TGF-β2先呈上升变化，后趋于平稳，并保持在较高水平。据此认为：妊娠早期山羊子宫局部细胞因子分泌及活性有一动态变化规律。（2）将CD58处理后山羊妊娠第16～18d子宫局部上述细胞因子水平（活性）与同期正常妊娠的山羊进行了比较分析，结果表明：CD58可极显著地抑制IL-2的产生（P＜0.01），而明显地促进IL-4的产生（P＜0.05），并对TGF-β2产生具有一定促进作用（P＞0.05），而对TGF-β1无影响（P＞0.05）。据此认为：CD58对妊娠早期山羊子宫局部细胞因子的产生具有调节作用。（3）对正常妊娠组与CD58处理组山羊妊娠第15～19d子宫液进行SDS-PAGE电泳后发现：正常妊娠组与CD58处理组山羊妊娠第16～18d子宫液中出现一分子量约为17KD的胚源性特异蛋白，第15、19d不出现。该特异蛋白的出现与CD58处理与否无关，而CD58对其产生量的影响难以作出判断。 试验研究的第二部分是研究CD58与山羊早孕因子（EPF）的关系，主要应用猪淋巴细胞Ea花环抑制试验，检测了山羊妊娠早期血清中EPF与人工制备CD58的活性，并对EPF与CD58的关系进行了探讨。试验结果证明：（1）猪淋巴细胞Ea花环抑制试验可应用于山羊EPF活性的测定；（2）妊娠早期（1~21d）山羊血清中存在EPF活性，妊娠第1，8d出现活性峰值（RIT值分别为18.8±1.1，21.2±1.8），其余时间EPF活性相对稳定，并呈现一规律性变化；（3）CD58（1：100）孵育淋巴细胞后，RIT值显著高于HBSS液对照组(P0.05)，CD58（1：1，1：10）孵育淋巴细胞后，RIT值极显著高于HBSS液对照组（P0.01）。据此认为CD58活性可以用Ea花环抑制试验进行测定并具有与EPF协同ALS使RIT值升高作用相似的功能；（4）妊娠山WP=4羊血清经CD58，CD2，HBSS液等处理后孵育淋巴细胞，经CD58处理组的RIT值极显著高于HBSS液处理组（P＜0.01），经CD2处理组RIT值极显著低于HBSS液处理组（P＜0.01）而与HBSS液对照组差异不显著（P＞0.05）。试验表明CD58与EPF可共同协同ALS抑制Ea花环形成，CD2对EPF有一定程度的封闭作用。据此认为CD58与EPF具有一定程度的抗原交叉性。