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CD58对妊娠早期山羊子宫局部细胞因子的调节及其与EPF关系的研究

马勇江  
【摘要】:试验研究分为二个部分,第一部分主要从三个方面进行研究:(1)采用IL-2的生物学测定方法和应用IL-4、TGF-β1、TGF-β2试剂盒标准测定方法,对正常妊娠组的早期妊娠山羊(第15~19d)子宫局部的细胞因子IL-2、IL-4、TGF-β1、TGF-β2水平(活性)变化规律进行了研究。结果表明:妊娠早期山羊子宫两侧局部细胞因子水平(活性)无差异;妊娠早期山羊子宫局部IL-2活性先呈上升变化,后出现下降趋势;IL-4水平一直呈上升变化;TGF-β1水平较高,但呈不规则曲线变化;TGF-β2先呈上升变化,后趋于平稳,并保持在较高水平。据此认为:妊娠早期山羊子宫局部细胞因子分泌及活性有一动态变化规律。(2)将CD58处理后山羊妊娠第16~18d子宫局部上述细胞因子水平(活性)与同期正常妊娠的山羊进行了比较分析,结果表明:CD58可极显著地抑制IL-2的产生(P<0.01),而明显地促进IL-4的产生(P<0.05),并对TGF-β2产生具有一定促进作用(P>0.05),而对TGF-β1无影响(P>0.05)。据此认为:CD58对妊娠早期山羊子宫局部细胞因子的产生具有调节作用。(3)对正常妊娠组与CD58处理组山羊妊娠第15~19d子宫液进行SDS-PAGE电泳后发现:正常妊娠组与CD58处理组山羊妊娠第16~18d子宫液中出现一分子量约为17KD的胚源性特异蛋白,第15、19d不出现。该特异蛋白的出现与CD58处理与否无关,而CD58对其产生量的影响难以作出判断。 试验研究的第二部分是研究CD58与山羊早孕因子(EPF)的关系,主要应用猪淋巴细胞Ea花环抑制试验,检测了山羊妊娠早期血清中EPF与人工制备CD58的活性,并对EPF与CD58的关系进行了探讨。试验结果证明:(1)猪淋巴细胞Ea花环抑制试验可应用于山羊EPF活性的测定;(2)妊娠早期(1~21d)山羊血清中存在EPF活性,妊娠第1,8d出现活性峰值(RIT值分别为18.8±1.1,21.2±1.8),其余时间EPF活性相对稳定,并呈现一规律性变化;(3)CD58(1:100)孵育淋巴细胞后,RIT值显著高于HBSS液对照组(P0.05),CD58(1:1,1:10)孵育淋巴细胞后,RIT值极显著高于HBSS液对照组(P0.01)。据此认为CD58活性可以用Ea花环抑制试验进行测定并具有与EPF协同ALS使RIT值升高作用相似的功能;(4)妊娠山WP=4羊血清经CD58,CD2,HBSS液等处理后孵育淋巴细胞,经CD58处理组的RIT值极显著高于HBSS液处理组(P<0.01),经CD2处理组RIT值极显著低于HBSS液处理组(P<0.01)而与HBSS液对照组差异不显著(P>0.05)。试验表明CD58与EPF可共同协同ALS抑制Ea花环形成,CD2对EPF有一定程度的封闭作用。据此认为CD58与EPF具有一定程度的抗原交叉性。


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