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《西北农林科技大学》 2001年
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疯草(甘肃棘豆)生物碱系统分析及其毒性的比较病理学研究

赵宝玉  
【摘要】:本试验通过对疯草(甘肃棘豆)生物碱成分的系统分析及其毒性的比较病理学研究,取得了以下结果: 1.疯草(甘肃棘豆)生物碱成分的提取:本试验对疯草(甘肃棘豆)生物碱进行了系统提取,结果表明,疯草(甘肃棘豆)含有小极性、中等极性和大极性生物碱,从各极性段所得的量可以看出,主要以大极性生物碱为主;各极性段生物碱经TLC检查,不含臭豆碱、黄华碱等喹诺里西啶生物碱,而含有苦马豆素等吲哚里西啶生物碱,在大极性生物碱中苦马豆素是其主要成分。 2.疯草(甘肃棘豆)生物碱成分柱层析分离:采用硅胶柱层析对疯草(甘肃棘豆)生物碱进行了分离,得到2个单体化合物(结晶A、结晶D)和B、C、E、F段生物碱混合物。结晶A为淡黄色针状结晶,有紫色荧光,改良碘化铋钾显色弱;结晶D为黄色片状结晶,有紫黑色荧光,硫酸乙醇显黄色,改良碘化铋钾显褐色;B段改良碘化铋钾显色呈现5个桔红色斑点;C、E、F段Ehrllich’s试剂显色呈现5~8紫红色斑点。 3.疯草(甘肃棘豆)生物碱结构鉴定:采用GC—MS联用技术对疯草(甘肃棘豆)小极性及中等极性生物碱进行了结构鉴定,从中鉴定出5,6,7,8-四氢吲哚里西啶、1,2,3,4-四氢喹啉、N-苯基-2-吡啶丙酰胺、1-乙酰基-9氢-吡啶[3,4-B]吲哚、3-甲氧基-4,7-甲基-1-氢-异吲哚、吡略烷类、二苯胺、3-丁基吲哚里西啶等41种生物碱成分;采用HI—MS分析技术对疯草(甘肃棘豆)大极性生物碱经乙酰化、锌还原处理前后比较分析,从中鉴定出5种生物碱成分即:苦马豆素(Swainsonine)、氧化氮苦马豆素(Swainsonine N-oxide)、斑荚素(Lentiginosine)、倒千里光裂碱(Retroecine)和2-羟基吲哚里西啶(2-Hydroxyindozidine),其中倒千里光裂碱和2-羟基吲哚里西啶为首次在甘肃棘豆中发现:结晶A经IR、MS、1HNMR初步鉴定为N-苯甲酰基甘氨酸甲酯,结晶D经UV、IR、1HNMR、13CNMR鉴定为5,7—二羟基—4′—甲氧基黄酮,为首次在甘肃棘豆中分离到。 三 疯草(甘肃棘豆)生物碱系统分析及其毒性的比较病理学研究 4.变异黄蔑、宽苞棘豆与甘肃棘豆生物碱的比较分析:采用TLC技术对变异黄 尾 宽苞棘豆及甘肃棘豆生物碱进行了比较分析,结果表明,这三种疯草生物碱种 类基本相似,都属于叼跺里西睫生物碱:从各极性段量的多少可以看出,三种疯草 生物碱主要集中在正丁醇部分,且苦马豆素为其主要成分。 5.疯草(甘肃棘豆)生物碱的毒性研究:每天按S00mg八g剂量给小鼠、雏鸡 灌服疯草(甘肃棘豆)总生物碱,在灌服的第15-20d可复制出疯草中毒的典型病 变,主要表现为肝、肾等实质器官的空泡变性,表明疯草(甘肃棘豆)主要有毒成 分是苦马豆素。 6.披针叶黄华生物碱提取、分离与结构鉴定:采用醇类溶剂提取法对披针叶黄 华生物碱进行了提取、分离与鉴定,结果表明,披针叶黄华干草中生物碱含量为 1.90%;总生物碱经GC--MS联用分析技术,从中鉴定出臭豆碱、黄华碱、鹰瓜豆 碱、金雀花碱、N-甲基金雀花碱、白羽扇豆碱等12种睦诺里西陡生物碱,其中 Dodecah叩ro-7,14Methanodiprpdoll,2-a:1’,2’-E][1.*diazocine、1-Ace…-l,2,3, 4tetrahydro-5-(-plperdinyl)prpdine、7,14-Methano-ZH,6H-iprpdo[1,2-a:1’,2’- e] [1a山一 儿1-m一hy卜3-(-d汀。phmp口7,1个**m。*-4H,6H刁lp加加[1,2-a:1 ’,2e,51diazs种化合物为首次从该植物中发现。 7.披针叶黄华的毒性研究:从细胞水平和亚细胞水平对披针叶黄华中毒山羊病 理学进行了研究,结果表明,病理组织学变化以实质器官细胞颗粒变性为主;特别是 肝脏结缔组织和胆管增生;超微结构变化以肝脏胶原纤维增生为特征,这是肝硬化 的典型病变。这些病变与疯草中毒的典型病变完全不同。
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