桃（Prunus.Persica（L）.Bastch）种质资源亲缘关系的RAPD分析

【摘要】： 桃起源于我国西北地区，经过长期的自然选择和人工驯化栽培，已形成众多的变种、品种和类型。以往多从形态学、孢粉学、同工酶、染色体核型等方面研究桃种质的分类演化，取得了一定的成果。但还存在许多分歧，在技术手段上也存在着一定的局限性。本研究通过分子生物学的方法和技术，从DNA水平上研究中国桃种质资源的起源、遗传进化关系，主要取得以下研究结果： (1)用SDS法、高盐法、分步离心法、CTAB法、SDS-CTAB法、尿素法六种方法提取新红早蟠桃幼嫩叶片基因组DNA，结果表明分步离心法是较好的提取桃基因组DNA的方法。 (2)采用分步离心法从桃的果实、幼叶、芽、花、一年生韧皮部、二年生韧皮部提取DNA，结果表明桃幼嫩叶片和幼果是提取桃基因组DNA的理想部位。 (3)从220个随机引物中筛选出具有多态性强、带型清晰的引物18个，在分析桃种质时均成功得到应用。 (4)用筛选出的18个引物，共88个多态性位点，对110份桃种质进行WARD聚类，以聚类距离17.0进行分类，可将全部类型分为五类。毛樱桃、光核桃、山桃、甘肃桃、普通桃各自聚为一类，新疆桃作为普通桃的一个变种。聚类结果显示，光核桃处于原始地位，桃种质分类及演化途径为：光核桃→甘肃桃→山桃→普通桃(新疆桃)。观赏桃作为一个品种群，其在进化上应与新疆桃处于平行位置。 (5)从RAPD带型聚类图分析，普通桃类的遗传相似系数较高，基因交换频繁。依聚类结果，可将普通桃分为硬肉桃品种群、蜜桃品种群、水蜜桃品种群、蟠桃品种群、油桃品种群、黄桃品种群和观赏桃品种群。