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葡萄品种遗传多样性的RAPD分析

夏惠  
【摘要】:欧洲葡萄是葡萄属植物中栽培价值最高的种,拥有许多优良品种(5000 个以上),广泛的分布于世界各地。世界上著名的鲜食、酿造及其它加工品种大多是本种或本种的杂种。由于在长期的进化过程中和栽培历史中形成了许多种群和品种群,且葡萄种内变异很大,加上种间的自然杂交及世界范围内对葡萄的广泛繁殖,使得葡萄的分类鉴定十分困难。本试验利用RAPD技术对68 个葡萄品种(类型)和21 个葡萄营养系(品种)的遗传多样性进行分析,并得到以下结论: 1. 比较了两种DNA 提取方法,SDS 法与CTAB 法提取的DNA 都可用作RAPD模板,但CTAB 法操作相对简单,用时少,提取的DNA纯度也较高。 2. RAPD 技术在本试验条件下的最优化体系为:1×反应缓冲液、0.2mM dNTP、2.0mM Mg~(2+)、1.5U Taq DNA聚合酶、0.2μM 引物、20~40ng 模板DNA;反应条件为:94℃预变性7min,94 ℃1min,36 ℃1min,72 ℃2min,45 个循环;72℃10min。 3. 对56 个引物进行筛选,得到18 个多态性好、重复性好的引物,用来对供试材料进行分析。 4. 用RAPD方法对68 个葡萄品种进行聚类分析,结果可将供试品种分为九类:刺葡萄、山葡萄和毛葡萄各为一类;乍娜、京秀、玫瑰香、早玫瑰、葡萄园皇后、山东早红、莎巴珍珠、早金香为第四类;第五类有白诗南、白玉霓、缩味浓、琼瑶浆、佳丽酿、雷司令等18 个品种,这些葡萄品种大都起源于法国、西班牙、德国、奥地利等国家,在分类学上属于西欧品种群;第六类:泽香、白鸡心、魁宝、绯红、力扎马特、马奶子、红脸无核等16 个品种,在分类学上属于东方品种群。第七类包括,红什佳美、粉红玫瑰、白什佳美、小白玫瑰,它们起源于希腊、保加利亚一带,在分类学上属于黑海品种群。第八类:天秀、黑奥林、京亚、露都蓓蕾、黑潮、紫珍香、康拜尔早生、苿莉、红蜜、井川1014、红瑞宝等13 个品种,它们是巨峰系的欧美杂交种。第九类:巨峰、白富士、京超、佐藤,也是巨峰系的欧美杂交种。 5. 分别用RAPD法和形态法对21 个葡萄营养系(品种)进行聚类分析,结果表明,只用形态法无法将营养系正确区分开,而使用RAPD分子标记的方法可将主栽培品种的营养系区分开。聚类结果表明,品丽珠、梅尔诺与赤霞珠关系较近。


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