收藏本站
《西北农林科技大学》 2005年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

鸡传染性支气管炎病毒陕西地方株的分离鉴定及S1基因的克隆和序列分析

倪斌  
【摘要】:近几年来,传染性支气管炎(IB)在陕西各地鸡场常有发生,给养禽业生产造成了巨大的损失。为了及时、准确的掌握该疫病发生发展规律,有效地对其进行控制,本研究开展了对陕西地区鸡传染性支气管炎病原的分离鉴定等工作。 采集陕西省宝鸡市、扶风县、兴平市和榆林市等地鸡场疑似传染性支气管炎发病鸡病料,通过9~11 日龄非免疫鸡胚进行了病毒的实验室分离和传代,并对分离毒株进行了病毒的血凝性、血凝抑制性、致病性、鸡胚矮小化、电镜特征等生物学特性鉴定,结果表明,4 株分离株经1%胰酶处理后的各代病毒尿囊液均可凝集鸡红细胞,标准阳性血清可特异性的抑制其凝集性,回归试验可复制出与自然发病相同的病例,病毒传代物有明显的致鸡胚矮小化作用,透射电镜下可见有近似球形、直径100 nm左右的冠状病毒粒子,将分离鉴定的4 株IBV 定名为BJ-04、FF-04、XP-03 和YL-04。 参考GenBank 中已发表的IBV 序列,针对S1 基因设计了3 条特异性引物,提取病毒RNA,用RT-PCR 方法均扩增到长约1.8kb 的特异目的片段;PCR 产物纯化回收后,与pMD18-T 载体连接,将重组质粒转化E. coli DH5a;经Amp+的培养基培养并挑出单克隆菌落;采用碱裂解法小量提取质粒,并用BamHⅠ, Hind Ⅲ双酶切法和质粒PCR 进行阳性筛选;取阳性质粒DNA进行测序。将所测定的分离株S1 基因核苷酸序列通过互联网提交到NCBI 中nucleotide-nucleotide BLAST 进行检索以及与GenBank 中注册的核苷酸序列进行比较;利用DNAStar 5.0 软件对分离株和M41、T 等已知序列毒株进行核苷酸及氨基酸序列同源性分析,绘制进化树,推测分离株与参考株之间的遗传距离;并对分离株S1 蛋白亲水性、抗原位点和糖基化位点等特性进行了理论上的分析;结合S1 基因酶切位点分析,可知在变异形式上,4 个毒株S1 基因均存在碱基的置换、插入与缺失;在进化关系上,FF-04 和XP-03 S1 基因同源性最高,亲缘关系最近;BJ-04 和YL-04 S1 基因同源性较高,亲缘关系较接近;4 个分离株S1 基因较呼吸型和肾型标准株S1 基因同源性均较低,亲缘关系较远,而且其基因型均为变异型。本研究丰富了IB分子流行病学资料,为IB 的诊断和预防奠定了良好的基础。
【学位授予单位】:西北农林科技大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:S852.65

手机知网App
【引证文献】
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 刘文杰;鸡传染性支气管炎病毒河南地方株分离鉴定及HN104株与HN091株全基因组序列测定[D];河南农业大学;2011年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 江国托,刘思国,步志高,康丽娟,卢景良;鸡传染性支气管炎病毒纤突蛋白的目的基因点突变对其免疫原性的影响[J];病毒学报;1999年03期
2 黄亚东,郑青,李校堃,王林川,赵振芬,黄自然;鸡传染性支气管炎病毒H株纤突蛋白S1基因的克隆及其在毕赤酵母中表达[J];病毒学报;2003年02期
3 王玉东,张子春,王永玲,范根成,蒋贻海,刘相娥,丁江;鸡腺胃型传染性支气管炎[J];山东家禽;1997年05期
4 磨美兰,韦平,李康然;应用RT-PCR及RFLP技术对鸡传染性支气管炎病毒进行诊断与分型的研究进展[J];广西农业生物科学;2000年03期
5 王永坤,朱国强,田慧芳,季明,孙龙生,庄国宏,何海蓉,严维巍,周继宏;鸡传染性腺胃病的研究[J];江苏农学院学报;1996年01期
6 朱国强,王永坤,孙龙生,周继宏,庄国宏,严维巍,王碧林,田慧芳,朱坤喜;腺胃病变型鸡传染性支气管炎毒株H_(95)的研究[J];江苏农学院学报;1996年04期
7 王玉东,王永玲,范根成,蒋贻海,杜元钊,吴延功,张子春;鸡腺胃型传染性支气管炎(综述)[J];畜牧兽医学报;2001年01期
8 廖明,辛朝安,王林川;鸡传染性支气管炎病毒D_(41)株S1基因序列测定及分析[J];畜牧兽医学报;1999年03期
9 李德山;D.Cavanagh;;鸡传染性支气管炎病毒纤突蛋白裂解与致病性的研究[J];中国病毒学;1992年04期
10 王玉东,张子春,王永玲,范根成,蒋贻海,刘相娥,丁江,王树双;鸡腺胃型传染性支气管炎研究初报[J];中国动物检疫;1997年03期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 姜亦飞;亓丽红;黄兵;李玉峰;于可响;宋敏训;;鸡传染性支气管炎病毒单克隆抗体的制备及鉴定[J];山东农业科学;2011年01期
2 张小飞,张丹俊,潘孝成,赵瑞红,夏孝云,姚淮平,柏桦林,邢晓丽;安徽省鸡腺胃型传染性支气管炎的研究初报[J];安徽农业科学;1999年01期
3 张慧辉,刘丽艳,郑素玲;鸡腺胃型传染性支气管炎的综合诊治[J];安徽农业科学;2005年02期
4 李淑梅;杨帆;刘兴友;;禽传染性支气管炎核酸疫苗脂质体的制备及其理化性质的研究[J];安徽农业科学;2006年10期
5 李淑梅;杨帆;刘兴友;张甲敏;;鸡传染性支气管炎病毒的分型新进展[J];安徽农业科学;2006年13期
6 陈俊杰;陈萍;;鸡传染性支气管炎分子生物学诊断研究[J];安徽农业科学;2007年16期
7 王宪文;王岩;刘兴友;姚四新;郑玉姝;;鸡传染性支气管炎病毒豫北株的分离与鉴定[J];安徽农业科学;2008年35期
8 江国托,刘思国,步志高,康丽娟,卢景良;鸡传染性支气管炎病毒纤突蛋白的目的基因点突变对其免疫原性的影响[J];病毒学报;1999年03期
9 潘杰彦,陈德胜,戴亚斌,陈溥言;传染性支气管炎病毒青岛腺胃分离株(SD/97/02)S2蛋白基因的序列测定和分析[J];病毒学报;2001年04期
10 周继勇,张德勇,丁红梅,程丽琴,陈吉刚;不同组织嗜性传染性支气管炎病毒核衣壳基因的遗传变异性分析[J];病毒学报;2003年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 魏凤;王金良;沈志强;;核酸疫苗的免疫机制及其在禽病防治中的应用[A];新型疫苗研发及基因工程疫苗应用研讨会论文集[C];2010年
2 贺秀媛;;鸡传染性支气管炎HN99株M基因在杆状病毒中的表达[A];河南省畜牧兽医学会第七届理事会第二次会议暨2008年学术研讨会论文集[C];2008年
3 沈美艳;崔宝玉;牛钟相;朱瑞良;张广斌;;ELISA双抗体夹心法检测鸡传染性腺胃炎[A];山东农业微生物技术学术研讨会论文集[C];2006年
4 陆苹;孙涛;王欣;;针对N基因片段的RT-PCR快速检测鸡传染性支气管炎病毒[A];动物学专辑——上海市动物学会2000年年会论文集[C];2000年
5 王泽霖;金亚美;菅复春;王新卫;王宪文;;用单抗介导的交叉ELISA对IBV毒株的分型研究[A];中国畜牧兽医学会禽病学会分会第十次学术研讨会论文集[C];2000年
6 磨美兰;李康然;韦平;;RT-PCR及RFLP分析技术对禽传染性支气管炎病毒的诊断和S1基因鉴别的研究[A];中国畜牧兽医学会禽病学会分会第十次学术研讨会论文集[C];2000年
7 任涛;廖明;罗开健;曹伟胜;辛朝安;;鸡传染性支气管炎病毒我国地方分离株S1基因5’端的变异研究[A];中国畜牧兽医学会禽病学会分会第十次学术研讨会论文集[C];2000年
8 刘兴友;李文刚;唐桂芬;戴亚斌;刘尚高;甘孟侯;;用pFASTBAC-THa系统表达IBV SD株S1基因的研究[A];中国畜牧兽医学会禽病学会分会第十次学术研讨会论文集[C];2000年
9 周继勇;沈行燕;程丽琴;丁红梅;吴建祥;;新的禽传染性支气管炎病毒变异毒株S基因克隆[A];第四届中国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会论文集[C];2001年
10 马德星;李广兴;;鸡传染性支气管炎病毒地方分离株mRNA5及mRNA6遗传变异特征[A];中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十四次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十三次学术研讨会论文集[C];2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 陈德胜;传染性支气管炎病毒中国地方流行毒株的分子流行病学研究[D];南京农业大学;2000年
2 戴亚斌;鸡传染性支气管炎病毒JS/95/03和SD/97/01株S1糖蛋白在昆虫细胞中的表达及其免疫原性评价[D];南京农业大学;2001年
3 潘杰彦;传染性支气管炎病毒青岛腺胃分离株(SD/97/02)全结构蛋白基因的克隆和序列分析[D];南京农业大学;2001年
4 姜勋平;抑制素和bcl-2基因免疫对小鼠繁殖和生长的影响[D];南京农业大学;2001年
5 李建荣;传染性法氏囊病病毒基因免疫的研究[D];浙江大学;2002年
6 贺秀媛;鸡传染性支气管炎病毒LX4株主要结构基因的研究[D];西北农林科技大学;2002年
7 蒋贻海;传染性支气管炎致腺胃病变毒株变异的分子基础及我国和东南亚分离株的分子流行病学研究[D];南京农业大学;2002年
8 师东方;猪轮状病毒和传染性胃肠炎病毒核酸免疫的研究[D];东北农业大学;2002年
9 程丽琴;传染性支气管炎病毒S基因马铃薯生物反应器的建立[D];浙江大学;2003年
10 姜世金;Ⅰ型马立克氏病病毒pp38和pp24基因的表达及序列测定与分析[D];中国农业大学;2003年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 康雪燕;猪传染性胃肠炎病毒S蛋白在毕赤酵母中的分泌表达及免疫原性分析[D];山东农业大学;2010年
2 曲新泽;传染性支气管炎病毒的基因分型及S1基因和N基因遗传多样性分析[D];山东农业大学;2010年
3 齐晓亮;鸡传染性支气管炎病毒核衣壳(N)蛋白的原核表达及其抗原性分析[D];新疆农业大学;2010年
4 路洪岩;传染性支气管炎病毒对蛋鸡输卵管发育内分泌调控机制的研究[D];河北农业大学;2011年
5 刘鹏飞;麻杏石甘粉防治人工感染鸡传染性支气管炎的试验研究[D];河北农业大学;2011年
6 刘媛;猪传染性胃肠炎病毒S蛋白A、D基因与猪大肠杆菌LTB基因的重组、克隆及原核表达[D];河北农业大学;2011年
7 刘巍;鸡传染性支气管炎病毒0801株的分离鉴定及S1基因序列分析[D];山东农业大学;2011年
8 孙静;商品肉鸡呼吸道病原体共感染的检测[D];山东农业大学;2011年
9 任海松;2006年—2010年山东省鸡传染性支气管炎病毒分离株基因型和血清型分析[D];山东农业大学;2011年
10 李华伟;连翘酯苷抗IBV和调节IFN-α信号通路相关因子表达的研究[D];北京农学院;2011年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 刘胜旺,刘玉芬,孔宪刚,邵昱昊;鸡传染性支气管炎中国地方分离毒株LX4 mRNA1 ORF1的遗传变异特征[J];病毒学报;2004年04期
2 李康然;梁梅芳;韦平;庞继钧;冯娟;吴林舅;;鸡传染性支气管炎病毒肾致病株的分离和鉴定[J];广西农学院学报;1990年01期
3 辛朝安,陈天杰;鸡传染性支气管炎的研究——Ⅰ.广州地区鸡传染性支气管炎病毒的分离与鉴定[J];华南农学院学报;1982年01期
4 姚四新,陈永跃,刘保国,李永清,刘尚高;鸡肾型传染性支气管炎病毒适应于鸡胚肾细胞的研究[J];河南职业技术师范学院学报;2002年04期
5 王永坤,朱国强,田慧芳,季明,孙龙生,庄国宏,何海蓉,严维巍,周继宏;鸡传染性腺胃病的研究[J];江苏农学院学报;1996年01期
6 吴延功,郑明球,吴增坚,蔡宝祥,陈溥言;鸡传染性支气管炎病毒在鸡胚肾细胞和气管环培养中的适应性比较[J];南京农业大学学报;1995年02期
7 陈红英;李新生;崔保安;张红英;夏平安;崔沛;廖仲磊;;鸡传染性支气管炎病毒澳大利亚T株S1全基因的克隆与序列分析[J];西北农林科技大学学报(自然科学版);2008年02期
8 王玉东,王永玲,范根成,蒋贻海,杜元钊,吴延功,张子春;鸡腺胃型传染性支气管炎(综述)[J];畜牧兽医学报;2001年01期
9 路希山;胡北侠;黄艳艳;孟斌;王连珠;王金宝;张秀美;;2006-2008年山东鸡传染性支气管炎病毒分离株S1与N基因的分子特征[J];畜牧兽医学报;2009年06期
10 邝荣禄 ,林绍仪;鸡传染性支气管炎——肾变病型[J];养禽与禽病防治;1982年03期
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 窦文茂;检测鸡传染性支气管炎病毒抗体的HI试验与ELISA相关性比较[D];扬州大学;2008年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王珣章,谢伟东,龙綮新,苏德明,钟江,蒲蛰龙;形成多角体的杆状病毒载体系统的建立[J];病毒学报;1991年03期
2 张玉根,郭玉璞,陈永福;鸡传染性支气管炎病毒免疫原基因cDNA的克隆和序列分析[J];病毒学报;1998年01期
3 蒋贻海,王玉东,张子春,王永玲,范根成,刘相娥,丁江;鸡腺胃型传染性支气管炎油乳剂灭活苗的研制及应用[J];山东家禽;1998年01期
4 陈天杰;梁眷衡;辛朝安;李海金;曾睦宗;;鸡传染性支气管炎D_(41)等弱毒株的培育与抗原性筛选试验[J];广东农业科学;1987年04期
5 李康然;梁梅芳;韦平;庞继钧;冯娟;吴林舅;;鸡传染性支气管炎病毒肾致病株的分离和鉴定[J];广西农学院学报;1990年01期
6 李康然;韦平;梁梅芳;庞继钧;吴林舅;冯娟;;用气管环培养中和试验对鸡传染性支气管炎病毒进行血清定型[J];广西农学院学报;1991年03期
7 熊占;质粒DNA快速提取法[J];江西科学;1995年04期
8 朱国强,王永坤,孙龙生,周继宏,庄国宏,严维巍,王碧林,田慧芳,朱坤喜;腺胃病变型鸡传染性支气管炎毒株H_(95)的研究[J];江苏农学院学报;1996年04期
9 姜建民,李清武,李荣,郭铁鸿;鸡肾型传染性支气管炎病毒分离和免疫试验[J];辽宁畜牧兽医;1994年04期
10 王红宁,廖德惠,钟妮娜,柳苹,林海,吕道俊;四川地区鸡传染性支气管炎肾病变型的诊断和防治研究[J];四川畜牧兽医;1994年04期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 焦红梅;焦新安;殷月兰;黄金林;潘志明;孙林;曾显营;顾志强;;鸡传染性支气管炎病毒S1基因的真核表达及其产物的免疫原性[J];扬州大学学报;2006年02期
2 余祖华;王红宁;周生;黄勇;柳萍;;禽传染性支气管炎病毒S1基因在毕赤酵母中的表达[J];中国兽医学报;2007年06期
3 陈洪岩,江国托,杨奇伟,陈奖励,张宝山,刘胜旺,卢景良;鸡传染性支气管炎病毒S1基因免疫对鸡的保护作用[J];中国预防兽医学报;1999年04期
4 游洪,王林川;鸡传染性支气管炎病毒中国地方分离株S1基因的克隆及其鉴定[J];中国兽医学报;2002年03期
5 余祖华;王红宁;周生;黄勇;丁轲;;禽传染性支气管炎病毒S1基因毕赤酵母表达载体的构建[J];中国家禽;2006年21期
6 祁贤,叶向阳,张婉华,朱永军,步志高,刘思国;鸡传染性支气管炎病毒地方分离株S1基因克隆和基因型鉴定[J];上海农业学报;2000年04期
7 宋延华,刘福安;鸡传染性支气管炎病毒S1基因在昆虫细胞中的高效表达[J];中国兽医学报;1999年05期
8 毕研丽;苗立中;王金良;郭广君;吕素芳;沈志强;;鸡传染性支气管炎病毒的分离鉴定及S1基因的分子特征[J];畜牧与兽医;2013年02期
9 谢红梅;张兴晓;朱来华;常维山;;鸡传染性支气管炎病毒S1基因在大肠杆菌中的表达及其抗原性的初步鉴定[J];农业生物技术学报;2007年01期
10 磨美兰;韦正吉;韦平;韦天超;李康然;;传染性支气管炎病毒的分离及其S1基因高变区Ⅰ的遗传变异性分析[J];养禽与禽病防治;2007年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 余祖华;王红宁;周生;黄勇;柳萍;唐梦君;胡慧琼;李晓英;廖娟;张毅;;禽传染性支气管炎病毒S1基因在毕赤酵母中表达的研究[A];第六届全国会员代表大学暨第11次学术研讨会论文集(下)[C];2005年
2 余祖华;王红宁;丁轲;;禽传染性支气管炎病毒S1基因在毕赤酵母中表达的研究[A];第四届第九次全国学术研讨会暨饲料和动物源食品安全战略论坛论文集(下册)[C];2008年
3 余祖华;王红宁;周生;黄勇;柳萍;丁轲;;禽传染性支气管炎病毒S1基因在毕赤酵母中表达研究[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会第十四次学术研讨会论文集[C];2008年
4 余祖华;王红宁;周生;黄勇;柳萍;唐梦君;胡慧琼;李晓英;廖娟;张毅;;禽传染性支气管炎病毒S1基因在毕赤酵母中表达的研究[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届全国会员代表大会暨第11次学术研讨会论文集[C];2005年
5 张志坤;王红宁;周英顺;姬高升;;禽传染性支气管炎病毒S1基因聚类分析及快速检测方法[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会论文集[C];2013年
6 王红宁;魏甬;周生;柳萍;;禽传染性支气管炎病毒中国四川株S1基因的克隆与序列分析[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会第十一次学术研讨会论文集[C];2002年
7 杨鑫;王红宁;张毅;曾诚;周英顺;蒋魏;;西南地区禽传染性支气管炎病毒分离株S1基因系统进化分析[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会第十六次学术研讨会论文集[C];2012年
8 胡桂学;陈中秋;董丽娜;高凤山;;猪传染性胃肠炎病毒S1基因重组乳酸菌的构建与表达研究[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会论文集(下册)[C];2009年
9 田占成;孙永科;王云峰;智海东;刘胜旺;王玫;童光志;;表达传染性支气管炎病毒S1基因重组禽痘病毒的构建[A];中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次研讨会论文集[C];2005年
10 任涛;廖明;罗开健;曹伟胜;辛朝安;;鸡传染性支气管炎病毒我国地方分离株S1基因5’端的变异研究[A];中国畜牧兽医学会禽病学会分会第十次学术研讨会论文集[C];2000年
中国重要报纸全文数据库 前5条
1 本报记者 潘颖颖 周汉祥;S1线邀您入伙“幸福轨道”[N];温州日报;2012年
2 本报记者 林乃鹏;市域铁路S1线今年开工[N];温州日报;2011年
3 郭铁成;荣誉S1测距相机[N];中国摄影报;2006年
4 晓东 常蕾;上武高速S1标施工不忘帮农助农[N];上饶日报;2009年
5 寇建东;S1上市 双引擎驱动广汽本田[N];华夏时报;2011年
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 戴亚斌;鸡传染性支气管炎病毒JS/95/03和SD/97/01株S1糖蛋白在昆虫细胞中的表达及其免疫原性评价[D];南京农业大学;2001年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 余祖华;禽传染性支气管炎病毒S1基因在毕赤酵母中表达的研究[D];四川农业大学;2005年
2 王法军;S1基因真核表达载体的构建及农杆菌转化水稻的初步研究[D];首都师范大学;2009年
3 王文成;鸡嗜肾型传染性支气管炎病毒W株的分离、致弱及其S1基因序列的测定[D];中国人民解放军军需大学;2002年
4 吴建祥;传染性支气管炎病毒S1基因在马铃薯中的表达[D];浙江大学;2002年
5 谢红梅;鸡传染性支气管炎S1基因在大肠杆菌中的表达及其生物活性的初步鉴定[D];山东农业大学;2006年
6 方琳;猪传染性胃肠炎病毒S1基因植物表达载体的构建及转化番茄的研究[D];南京农业大学;2009年
7 邹年莉;四川部分地区鸡传染性支气管炎病毒S1基因的遗传进化分析和原核表达[D];四川农业大学;2010年
8 张亮;2011-2012年鸡传染性支气管炎病毒的分离鉴定及S1基因序列分析[D];河南农业大学;2013年
9 王玮;鸡传染性支气管炎病毒新疆分离株S1基因分子克隆及其重组鸡痘病毒表达载体的构建[D];新疆农业大学;2001年
10 封浪;酵母双杂交、免疫共沉淀研究禽传染性支气管炎病毒S1、M蛋白相互作用[D];四川农业大学;2009年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026