收藏本站
《西北农林科技大学》 2005年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

小麦基因枪遗传转化技术体系的建立及叶片衰老抑制基因P_(SAG12)-IPT的转化

曹团武  
【摘要】:在农业上,利用优良品种提高植物产量是经济可行的措施。目前,我国生产上种植的一些小麦品种(品系)和育种上用的一些材料,叶片过早衰老是一个不容忽视的问题,严重的制约着品种产量潜力的发挥和新品种的选育。细胞分裂素具有延缓植物细胞和组织衰老的特性。运用先进的分子生物学手段---植物遗传转化即转基因技术进行小麦分子育种,为作物品种早衰特性的改良提供了一个新途径。Gan 和Amasino 构建的叶片衰老抑制基因P_(SAG12)-IPT 导入烟草和水稻后,明显的延缓叶片衰老并提高作物产量。本试验利用基因枪法和花粉管通道法两种植物遗传转化技术,将叶片衰老抑制基因P_(SAG12)-IPT 导入有早衰现象的小麦品系9848,获得转基因植株。通过对基因枪法转化受体系统的建立和两种转化法的深入研究,初步建立起了一套完整的小麦转基因技术体系。主要研究结果如下: 1.普通小麦基因转化中良好受体系统的建立 对影响小麦幼胚愈伤组织高频率再分化的条件进行了研究。结果表明,暗培养条件下诱导的小麦幼胚愈伤组织的再分化频率明显高于散光和2000Lx 光照条件,大田生长的小麦比温室盆栽小麦的幼胚脱分化和再分化频率高;小麦主茎穗部的幼胚组织脱分化和再分化特性显著高于小麦分蘖茎穗部的幼胚组织;不同年份、不同胚龄幼胚组织的脱分化和再分化特性有一定差异。在最适的胚龄条件下,基因型对小麦幼胚出愈率影响不大,而主要影响胚性愈伤组织的发生频率;KT 能显著促进小麦幼胚胚性愈伤组织的高频诱导及再生,在KT 为0.5mg/L 时胚性愈伤组织诱导率最高,而在KT 为0.3mg/L 时胚性愈伤组织再生率最高;在附加KT 1.5mg/L 和NAA 0.5mg/L 的MS 培养基上,胚性愈伤组织再生率最高。 2. 基因枪转化的影响因素研究 用PDS-1000/He 型基因枪将抑制叶片衰老基因PSAG12-IPT 转入小麦幼胚和愈伤组织中,通过对报告基因GUS 瞬时表达的检测,研究了金粉用量、质粒DNA 用量及轰击次数对转化率的影响。结果表明:金粉用量对幼胚和愈伤组织瞬时表达率影响不大,但随金粉用量的增加,细胞瞬时表达率明显提高;质粒DNA 用量以每枪2.0ug 为最佳;轰击两枪幼胚和细胞瞬时表达率明显高于轰击一枪。随着愈伤组织培养时间的延长,GUS基因瞬时表达明显下降趋势,在第28 天以后农趋于稳定。GUS 基因瞬时表达检测应在24 小时内,GUS 基因稳定表达应在28 天后。首次对经GUS 染色后的幼胚和愈伤组织
【学位授予单位】:西北农林科技大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:S512.1

手机知网App
【引证文献】
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 吕晓依;基因枪介导法将叶片衰老延缓基因P_(SAG12)-IPT导入小麦品种的研究[D];西北农林科技大学;2007年
2 杨进军;P_(SAG12)-IPT基因转化小麦及农杆菌对结实性和种子萌发的影响[D];西北农林科技大学;2010年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 黄承彦,楚秀生,杨平平,单承荣,殷毓芬,颜挺进;外源DNA导入技术培育抗旱耐盐小麦新品种[J];山东农业科学;2000年04期
2 李远新,张淑玲,王关林,葛晓光;授粉后DNA直接导入技术在我国农业分子育种中的应用进展[J];北京农业科学;1999年02期
3 曹阳,赵东利,王仁军,李学慧;高粱花粉管通道法导入抗虫基因的研究[J];大连大学学报;2001年06期
4 明凤,胡尚连,李文雄;小麦胚性愈伤组织发生形态、解剖构造与核酸和蛋白质代谢的关系[J];东北农业大学学报;1999年04期
5 明凤,李文雄,胡尚连;小麦胚性愈伤组织发生影响因素的研究[J];东北农业大学学报;2000年01期
6 王晓娟,李兴林,王亚馥;高粱总DNA导入春小麦稳定后代高分子量麦谷蛋白亚基的变化[J];西北植物学报;2000年06期
7 许明,刘峰,郑金贵;IPT基因遗传转化谷秆两用稻的研究[J];福建农业大学学报;2003年02期
8 李宏潮,胡道芬,王虹;影响小麦成熟胚培养因素的研究[J];华北农学报;1990年01期
9 刁现民,陈振玲,段胜军,刘玉乐,赵连元,孙敬三;影响谷子愈伤组织基因枪转化的因素[J];华北农学报;1999年03期
10 云月,胡道芬,刘敏,刘立军;不同基因型冬小麦花药出愈率及其愈伤组织的蛋白质电泳分析[J];华北农学报;1994年03期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 曲士台;张建国;王奎良;刘守贞;;外源DNA导入时间和pH值对小麦结实率的影响[J];山东农业科学;1990年02期
2 黄承彦;颜廷进;战明奎;赵经荣;粟翼玟;周同度;赵双宜;;大豆自花授粉后外源DNA导入技术[J];山东农业科学;1990年05期
3 张建国;曲士台;王奎良;刘守贞;;动态导入外源DNA对小麦H_0、H_1代粒色的影响[J];山东农业科学;1991年01期
4 崔良国,刘开昌,汪黎明;谷子DNA导入玉米创造变异及其利用的研究[J];山东农业科学;2002年03期
5 薛炳烨,束怀瑞;应用基因工程改良果实成熟特性研究进展[J];山东农业科学;2002年04期
6 隋新霞,楚秀生,李根英,吴祥云,黄承彦;外源DNA导入技术及其在小麦育种中的应用[J];山东农业科学;2002年06期
7 楚秀生,黄承彦,龚丽华,李根英,隋新霞,吴祥云;利用超远缘DNA导入进行小麦种质创新的研究[J];山东农业科学;2003年06期
8 姜明松,李广贤,宫德英,姚方印;转Xa21基因圣稻301的培育及其田间表现[J];山东农业科学;2003年06期
9 姜明松,李广贤,宫德英,姚方印;多抗转基因水稻植株的获得及其抗性鉴定[J];山东农业科学;2004年04期
10 李玉莲,黄承彦;小麦高分子量麦谷蛋白亚基研究进展[J];山东农业科学;2004年05期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 武明宇;郝楠;;浅谈玉米抗旱性的研究进展[A];全国旱情监测技术与抗旱减灾措施论文集[C];2009年
2 徐惠君;庞俊兰;杜丽璞;叶兴国;李连城;辛志勇;程顺和;吴宏亚;;基因枪转化小麦黄花叶病毒抗性基因创造小麦新种质[A];农业科技创新与生产现代化学术研讨会论文集[C];2001年
3 辛志勇;徐惠君;陈孝;张增艳;叶兴国;徐琼芳;马有志;杜丽璞;林志珊;李连城;;小麦抗黄矮病、土传病毒病、蚜虫生物技术研究进展[A];21世纪作物科技与生产发展学术讨论会论文集[C];2002年
4 杨木军;顾坚;周金生;田玉仙;刘琨;李绍祥;李政芳;杨和仙;;温光敏两系杂交小麦技术体系在云南的应用与评价[A];21世纪作物科技与生产发展学术讨论会论文集[C];2002年
5 唐宗祥;张怀琼;张怀渝;晏本菊;任正隆;;影响小麦成熟胚形成愈伤组织的因素[A];2003年全国作物遗传育种学术研讨会论文集[C];2003年
6 陈耀锋;权军利;任惠莉;李春莲;郭东伟;韩德俊;;小麦抗赤霉细胞工程改良及抗性系遗传研究[A];2003年全国作物遗传育种学术研讨会论文集[C];2003年
7 马慧;赵开军;徐正进;;含芥菜几丁质酶基因的双元表达载体的构建[A];2003年全国作物遗传育种学术研讨会论文集[C];2003年
8 吴成君;康乐;叶兴国;徐惠君;杜丽璞;马有志;;转Bcl、Rip基因小麦的鉴定与遗传分析[A];2003年全国作物遗传育种学术研讨会论文集[C];2003年
9 刘录祥;赵林姝;梁欣欣;郑企成;刘强;王晶;郭会君;赵世荣;陈文华;;基因枪法获得逆境诱导转录因子DREB1A转基因小麦的研究[A];2003年全国作物遗传育种学术研讨会论文集[C];2003年
10 刁现民;王永芳;李伟;王鹏;智慧;陈振玲;段胜军;;抗除草剂基因Bar转化谷子研究[A];2003年全国作物遗传育种学术研讨会论文集[C];2003年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 耿小丽;苜蓿单倍体、纯合四倍体的诱导及愈伤组织DNA含量变异的研究[D];甘肃农业大学;2010年
2 生书晶;何首乌芪合酶基因(FmSTS)的克隆、鉴定及转化拟南芥研究[D];华南理工大学;2010年
3 李望丰;SsNHX1基因在紫花苜蓿中的表达及其耐盐性研究[D];东北师范大学;2010年
4 何影;引入甘氨酸甲基化合成甜菜碱途径提高黑麦草抗旱性研究[D];山东大学;2010年
5 曾兴权;小麦抗条锈病种质的鉴定及其抗性相关基因的差异表达和克隆[D];西北农林科技大学;2010年
6 姜树坤;水稻重要农艺性状遗传基础解析及株型QTL精细定位[D];沈阳农业大学;2010年
7 刘宾;小麦主要农艺性状的条件和非条件QTL定位[D];山东农业大学;2011年
8 陈冬花;小麦盐胁迫响应基因TaACO1和TaSTPK的克隆与功能分析[D];山东农业大学;2011年
9 马进;水稻条纹病毒(RSV)RNA3、RNA4的克隆与抗RSV转基因水稻的培育[D];山东农业大学;2011年
10 于莹;利用羊草EST文库克隆耐盐碱相关基因[D];吉林大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 刘红梅;农杆菌介导百子莲抗寒基因CBF1高效转化体系的建立[D];华中农业大学;2010年
2 姚秋林;水稻根特异表达启动子的克隆及功能分析[D];华中农业大学;2010年
3 刘鑫;利用分子标记辅助选择培育和评价三种BT基因(CRY1AC、CRY1C~*和CRY2A~*)抗虫水稻[D];华中农业大学;2010年
4 朱莹;分析耐盐基因与启动子功能的CRE/loxP重组激活系统的构建与检验[D];哈尔滨师范大学;2010年
5 冯玖玲;杜氏盐藻RbcS基因家族新成员的克隆及功能研究[D];郑州大学;2010年
6 李晓东;茶树体细胞胚发生的影响因素及超微结构和几种内含物质变化的研究[D];山东农业大学;2010年
7 苏琳;控释尿素施用方式对玉米氮素与水分利用、产量和品质的影响[D];山东农业大学;2010年
8 李树芬;甜菜碱提高转基因番茄耐热性研究[D];山东农业大学;2010年
9 吴世文;不同小麦雄性不育类型AGPase活性及杂种光合特性的分析[D];山东农业大学;2010年
10 张景涛;小麦TaPHR1基因表达载体的构建及遗传转化研究[D];山东农业大学;2010年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 江力,梁俊,张荣铣;细胞分裂素类物质对植物叶片衰老的延缓作用及其分子遗传研究[J];安徽教育学院学报;2000年06期
2 刘金元,时香玉,陈晓,曾昭海,周柱华,陈建爱,王兴军;利用基因枪技术转化小麦、玉米的研究[J];山东农业科学;1999年02期
3 支大英,徐春晖,薛哲勇,刘庆忠,姜鸿鸣,夏光敏;农杆菌介导AFP1基因转化小麦获得转基因植株[J];山东农业科学;2004年03期
4 李韶山;周嘉槐;;小麦叶片衰老过程中的代谢变化[J];安徽师大学报(自然科学版);1990年03期
5 曾寒冰;;小麦未熟胚离体培养的研究——愈伤组织的诱导及再生植株[J];东北农学院学报;1988年01期
6 明凤,李文雄,胡尚连;小麦胚性愈伤组织发生影响因素的研究[J];东北农业大学学报;2000年01期
7 曹颖,胡尚连,李文雄,刘锦红;基因枪法导入Bar基因转化小麦幼胚的研究——抗性愈伤组织与再生植株的遗传转化[J];东北农业大学学报;2003年03期
8 刘丽君,吴俊江,高明杰,汪清胤,黄永芬,夏凯,李文华;转ipt基因大豆感染SM V1号的生理特性变化[J];大豆科学;1999年03期
9 黄粤,柯遐义,李宝健;通过基因枪轰击转化获得转基因小麦植株的研究[J];西北植物学报;1997年02期
10 杨淑慎,高俊凤;活性氧、自由基与植物的衰老[J];西北植物学报;2001年02期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 奚亚军;叶片衰老抑制基因P_(SAG12)-ITP转化小麦的研究[D];西北农林科技大学;2002年
中国硕士学位论文全文数据库 前3条
1 董玉梅;抑制叶片衰老的ipt基因在小麦中的转化研究[D];西南农业大学;2002年
2 王小霞;小麦成熟胚高频植株再生系统的建立及转cycd2基因植株的获得[D];四川农业大学;2006年
3 王哲;PSAG12-ipt基因转化烟草抑制早衰的研究[D];河南农业大学;2007年
【二级引证文献】
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 王伟;黄瓜衰老过程中叶绿素降解相关酶基因cDNA片段的克隆与表达初步研究[D];华中农业大学;2011年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 于洪欣,柳建军,冯兆礼,董金铎;通过花粉管途径将抗虫基因(CpTI)导入小麦的研究[J];山东农业科学;1999年01期
2 马传喜,吴兆苏;我国主要冬小麦推广品种的高分子量麦谷蛋白亚基变异分析[J];安徽农业大学学报;1993年04期
3 成卓敏,周广和;小麦黄矮病毒GPV株系的提纯及血清学研究[J];病毒学报;1986年03期
4 杨新科,陈章良,段淑敏,李玉英,吴淑华,侯云德;天花粉蛋白在组织培养上抗病毒作用的研究[J];病毒学报;1990年03期
5 成卓敏,P.M.Waterhouse,王立阳,周广和,陈剑波;应用聚合酶链式反应方法检测携带大麦黄矮病毒的单头蚜虫[J];病毒学报;1992年01期
6 傅桂荣,陈瑛,刘关君,黄永芬,汪清胤;美洲拟鲽抗冻蛋白基因(afp)导入番茄酯酶和过氧化物酶同工酶分析[J];北方园艺;1998年01期
7 李静;黄梧芳;;应用组织培养方法诱发小麦抗赤霉菌毒素突变体研究初报[J];河北农业大学学报;1992年01期
8 曾寒冰;;小麦未熟胚离体培养的研究——愈伤组织的诱导及再生植株[J];东北农学院学报;1988年01期
9 曾寒冰;李文雄;;小麦幼穗离体培养的研究——不同基因型的反应[J];东北农学院学报;1989年03期
10 高凤兰,王金陵;高纬度地区早熟大豆育种问题的研究[J];大豆科学;1985年01期
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 赵虹;小麦基因枪转化体系的建立和抗除草剂基因的导入[D];西南农业大学;2001年
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 赵凌;王才林;张亚东;朱镇;杨杰;黄骏麒;龚蓁蓁;;花粉管介导的转抗冻蛋白基因(AFP)水稻[J];江苏农业学报;2006年04期
2 哈斯阿古拉;牛一丁;张丽;包常华;李建国;方天祺;扈廷茂;;花粉管通道法转基因技术在甜瓜品种河套蜜瓜上的应用[J];内蒙古大学学报(自然科学版);2007年04期
3 孙岩;王广金;黄景华;刁艳玲;郭强;;小麦基因枪法转化体系的初步研究[J];麦类作物学报;2006年01期
4 张森燕;吴忠义;张秀海;刘占磊;王永勤;黄丛林;;ZmPti1基因正义和RNAi表达载体的构建及其转化玉米的研究[J];华北农学报;2008年05期
5 贾栋;张彬;马建军;;农杆菌介导的PEPCase基因导入小麦的初步研究[J];山西农业大学学报(自然科学版);2009年04期
6 赵慧,张正斌,徐萍;转基因小麦目录[J];麦类作物学报;2005年04期
7 梁静静,吕德彬,陈军营,许海霞,程西永,刘亚飞;小麦5+10亚基基因转化研究[J];麦类作物学报;2004年03期
8 周春江;葛荣朝;赵宝存;黄占景;沈银柱;何聪芬;;利用花粉管通道法将兔防御素NP-1基因导入小麦的研究[J];华北农学报;2007年02期
9 黄景华,王广金,孙岩,刁艳玲;小麦花粉管通道形成时期的研究[J];黑龙江农业科学;2004年02期
10 刘方;王坤波;宋国立;黎绍惠;王春英;张香娣;王玉红;胡育昌;;棉花转基因材料的获得及主要农艺性状变异分析[J];棉花学报;2009年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 王才林;赵凌;朱镇;张亚东;林静;张所兵;陈涛;刘贤金;王冬兰;黄骏麒;龚蓁蓁;;用花粉管通道法将慈姑蛋白酶抑制剂(API)基因导入水稻获得转基因植株[A];提高全民科学素质、建设创新型国家——2006中国科协年会论文集[C];2006年
2 徐立华;张举仁;许方佐;周柱华;邱登林;邢燕菊;阴卫军;;基因枪法获得玉米转基因植株的研究[A];第五届核农学青年科技工作者学术交流会论文集[C];2006年
3 陈敏;陈珈;王国英;王学臣;;水稻Na~(+/)H~+反向转运器基因(OsNHX1)转化玉米及耐盐转基因植株的获得[A];中国植物生理学会全国学术年会暨成立40周年庆祝大会学术论文摘要汇编[C];2003年
4 刘伟华;李文雄;胡尚连;徐香玲;李集临;;基因枪法向小麦导入几丁质酶基因的研究[A];中国生物工程学会第三次全国会员代表大会暨学术讨论会论文摘要集[C];2001年
5 易小平;朱祯;朱玉;吴茜;周开达;;基因枪介导法转抗虫基因水稻的获得[A];面向21世纪的科技进步与社会经济发展(下册)[C];1999年
6 王才林;赵凌;;花粉管介导的转bar基因水稻后代除草剂抗性遗传[A];中国的遗传学研究——中国遗传学会第七次代表大会暨学术讨论会论文摘要汇编[C];2003年
7 樊继德;孔庆国;张梅;于喜艳;;子房注射法获得转基因甜瓜植株[A];中国园艺学会第七届青年学术讨论会论文集[C];2006年
8 姜廷波;陈虹;李凤娟;丁宝建;;转柽柳金属硫蛋白基因(MT_1)烟草的获得及对重金属镉的抗性分析[A];中国遗传学会功能基因组学研讨会论文集[C];2006年
9 吕慧贞;张士刚;刘静;张元湖;;α-Farnesene合成酶基因转入烟草中的研究[A];2007中国植物生理学会全国学术会议论文摘要汇编[C];2007年
10 王玉成;杨传平;刘桂丰;;DREB基因的抗逆生理与分子机制研究[A];东北三省及内蒙古地区遗传学研究进展学术研讨会论文汇编[C];2009年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 记者 胡左;我国培育出转基因耐贮藏河套蜜瓜[N];科技日报;2001年
2 记者 瞿剑;国家科技计划支撑我国分子育种强力推进[N];科技日报;2009年
3 瞿剑;中国分子育种取得重要进展[N];农资导报;2009年
4 燕民;生物技术在果树上的应用[N];农民日报;2000年
5 张振霞;理想的牧草离我们越来越近[N];科技日报;2001年
6 张振霞;理想的牧草离我们越来越近[N];科技日报;2001年
7 记者 蒋建科;中国农科院将体改推向纵深[N];人民日报;2001年
8 科技部技术预测与国家关键技术研究;植物转基因技术可增加农民收入[N];经济参考报;2004年
9 苏力;我国培育出转Bt基因抗虫油菜品系[N];农民日报;2004年
10 刘正午;转基因抗体药物“大市场”渐显[N];医药经济报;2005年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 苏俊;低剂量辐射对HMW-GS基因转化小麦的影响[D];河北农业大学;2008年
2 岳同卿;转Bt Cry1 Ah基因抗虫玉米的研究[D];中国农业科学院;2009年
3 刘伟华;几丁质酶(Chitinase)基因转化小麦的研究[D];东北农业大学;2000年
4 刘香利;小麦遗传转化体系建立及高分子量麦谷蛋白14亚基基因的转化[D];西北农林科技大学;2009年
5 陈彦;小盐芥总DNA导入紫薇的研究[D];南京林业大学;2006年
6 付永彩;农杆菌介导的大麦黄矮病CP基因转化小麦的研究[D];中国农业科学院;2000年
7 燕飞;hpRNA和pac1基因介导抗大麦黄矮病毒转基因小麦研究[D];中国农业科学院;2006年
8 杨爱馥;无载体骨架无选择标记玉米转化体系的优化[D];大连理工大学;2009年
9 王建革;基因枪转多基因杨树的获得[D];中国林业科学研究院;2006年
10 牛一丁;苜蓿DREB类转录因子基因的研究[D];内蒙古大学;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 曹团武;小麦基因枪遗传转化技术体系的建立及叶片衰老抑制基因P_(SAG12)-IPT的转化[D];西北农林科技大学;2005年
2 吴峰;小麦成熟胚转化系统的建立与转盐胁迫应答基因植株的获得[D];四川农业大学;2006年
3 房瑞;辣椒高赖氨酸基因(CFLR)导入小麦的研究[D];扬州大学;2009年
4 陈焕丽;海藻糖合成基因TPSP的小麦遗传转化及水分胁迫诱导基因TaSNAC1的克隆[D];河南农业大学;2007年
5 吕晓依;基因枪介导法将叶片衰老延缓基因P_(SAG12)-IPT导入小麦品种的研究[D];西北农林科技大学;2007年
6 刘琦;基因枪法和农杆菌—花器浸蘸法将CYCD2基因导入小麦的研究[D];四川农业大学;2007年
7 孔娜;耐盐相关基因HAL1在烟草、小麦上的遗传转化研究[D];西北农林科技大学;2008年
8 苏丹;草甘膦氧化还原酶基因转化油菜的研究[D];内蒙古大学;2008年
9 李艳红;小麦植株再生体系的建立及面包品质基因的遗传操作[D];新疆师范大学;2009年
10 王静英;洛旱2号小麦中4个干旱诱导基因的克隆和表达[D];河南农业大学;2008年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026