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《西北农林科技大学》 2000年
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生产转基因鸡基础理论和方法的研究

李碧春  
【摘要】:生产转基因鸡,需要先对鸡卵子、胚胎操作等必需的基础理论和方法进行了解。但目前关于这方面的系统研究国内外报道较少且零散,特别是对鸡卵体外受精、早期胚胎在体内发育的研究国内尚未见有报道。基于当前的迫切需要,本研究对鸡卵母细胞体外受精、早期胚胎发育、鸡胚代用蛋壳培养及异体胚盘移植;鸡原始生殖细胞(PGCs)起源、迁移、聚集和定居及其分离和体外原代培养等进行了系列研究,试验的主要结果如下: 1 在80只母鸡产蛋后的30~60min内手术法收集卵子,新鲜的Ringer's液中洗涤三遍,与精子共孵育,体外受精后移入受体母鸡输卵管中。在44只体外受精的受体母鸡中,有28只产蛋,产蛋率为63.63%(软壳蛋7枚)。其中产出受精蛋为8枚,受精率为18.18%(28.57%)。孵化后有6枚发育,孵化率为13.64%(75%),在28只蛋中有3枚出雏,出雏率为10.71%。尽管孵化率和出雏率低,但是在8枚受精卵中有3枚孵出小鸡(37.50%),表明鸡体外受精技术路线是可行的。 2 比较供体母鸡在产蛋后不同时间手术法取卵,结果显示,30~40min内是获取卵子的最佳时期。 3 受体母鸡产蛋后在不同时间内移植受精卵,观察产蛋情况,结果显示,30±10min内移植胚胎较为适宜。 4 产蛋高峰期和产蛋下降期母鸡作为受体,比较其对胚胎移植的影响,10只产蛋下降期的母鸡移植胚胎后,无一产蛋,证明该期母鸡不适合作胚胎移植受体鸡。 5 鸡卵体外受精体外发育,可发育到明区形成期,发育率为10%。 6 54只乌骨鸡,在产蛋后,不同时间获取受精卵,观察早期胚胎发育变化规律。依据胚盘形态的变化,可将鸡胚在体内发育过程分为两个时期:①距前一个蛋产出后5.5h到15.5h为鸡胚的卵裂期,卵裂的结果形成厚约6~7层细胞的胚盘。②距前一个蛋产出后17.5h至明区形成期,为囊胚期晚期,在胚盘中央形成透明的明区和周围不透明的暗区。在制作转基因鸡时,若欲获得较大卵裂球,则取产蛋后10.5~15.5h的胚胎较为适宜;若取较小卵裂球制作嵌合体时,则取囊胚晚期细胞为宜。 7 乌骨鸡受精卵第一次分裂发生在产蛋后5h,桑椹期在产蛋后11.5h,囊胚期在产蛋后15.5h。 8 产蛋后5h,乌骨鸡胚胎已发生第一次卵裂,说明第一次卵裂是发生在5h,早于前人报道的结果。最初7.5h,鸡受精卵的分裂速率较为一致,约每半小时分裂一次,以后
【学位授予单位】:西北农林科技大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2000
【分类号】:S831

【引证文献】
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 张传生;鸡X期胚盘细胞体外培养与输卵管生物反应器的研制[D];山东农业大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前4条
1 王继英;逆转录病毒表达载体的构建及其鸡输卵管生物反应器的制作[D];山东农业大学;2003年
2 徐国正;鸭体外受精和胚胎移植的研究[D];福建农林大学;2007年
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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前6条
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【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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10 李碧春,秦洁,肖小珺,陈国宏,吴信生,吴圣龙;鸡胚不同发育时期原始生殖细胞的分离方法[J];动物学报;2003年06期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
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8 强巴央宗;张浩;商鹏;纪素玲;;藏鸡屠宰性能及肉质特性研究[A];中国家禽业——机遇与挑战——第十三次全国家禽学术讨论会论文集[C];2007年
9 孙小美;龚萍;熊敏;柯常育;黄丹;杨宇;龚炎长;;种蛋盐酸腐蚀开窗法的研究[A];中国家禽业——机遇与挑战——第十三次全国家禽学术讨论会论文集[C];2007年
10 吴红翔;刘泉刚;吴意继;邬乃霞;黄礼煜;;孵化期间鸡胚蛋内蛋白质代谢的研究[A];中国家禽业——机遇与挑战——第十三次全国家禽学术讨论会论文集[C];2007年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
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2 饶开晴;Leptin对鸡胚卵黄膜和尿囊膜基因表达及血管形成的影响[D];南京农业大学;2009年
3 陈亚明;绵羊精液超低温冷冻程序及稀释液优化方法的研究[D];甘肃农业大学;2002年
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7 张浩;藏鸡高原低氧适应生理机制及其杂交利用研究[D];中国农业大学;2005年
8 张传生;鸡X期胚盘细胞体外培养与输卵管生物反应器的研制[D];山东农业大学;2005年
9 杜晓惠;鸡多趾候选基因的SNPs及表达差异研究[D];四川农业大学;2005年
10 张录强;红腹锦鸡人工繁育与营养生态学研究[D];北京师范大学;2000年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 吴芳;山羊松果体微囊化细胞异体移植的初步研究[D];华中农业大学;2010年
2 王丽;沂蒙黑山羊性周期中GTH受体在输卵管的分布及其mRNA表达规律的研究[D];山东农业大学;2011年
3 班谦;家鸡胚胎早期发育过程中DNA甲基化的MSAP分析[D];石河子大学;2009年
4 韦光辉;转牛生长激素基因鸡的研究[D];河南科技大学;2010年
5 刁小龙;鸡PrP结构特征及在鸡胚发育过程中的表达规律[D];甘肃农业大学;2010年
6 李振红;转人抗癌基因P53鸡的研究[D];河南科技大学;2011年
7 吴潇;受精蛋白与非受精蛋在孵化条件下抗菌活性的初步研究[D];华中农业大学;2011年
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9 李海艳;低能量水平下产蛋鸡赖氨酸适宜需要量研究[D];河南农业大学;2011年
10 赵建国;甘肃黄鸡杂交效果分析及辅助选择的研究[D];甘肃农业大学;2000年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 廖和荣;赵宗胜;李岩;孙杰;焦丽萍;余春梅;李大全;;鸡与鹌鹑属间杂交遗传效应的分析[J];安徽农业科学;2006年18期
2 刘荣秀;鸟类原生殖细胞的研究 Ⅰ.鸡胚生殖新月区原生殖细胞超微结构的观察[J];动物学报;1990年02期
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5 李赞东,李相芝,赵东风,Takashi KUWANA;禽类原始生殖细胞的迁移能力[J];动物学报;2003年06期
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10 卿素珠,贾维真,孙稳平,马永华,沈霞芬;鸡生殖器官的组织学特点[J];动物医学进展;1998年01期
中国硕士学位论文全文数据库 前4条
1 赵英会;人促红细胞生成素鸡输卵管特异表达载体的构建及其转基因鸡的制备[D];山东农业大学;2002年
2 郝小静;鸡胚原始生殖细胞的分离与培养[D];山东农业大学;2003年
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【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 阴彦辉;张振韬;高波;孙敏;许峰;秦玉蓉;李碧春;;鸡瘦素蛋白输卵管特异性表达载体的构建及其表达的研究[J];中国家禽;2010年21期
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1 曹体婷;引起鸡与鹌鹑属间杂交种性分化异常相关基因的研究[D];石河子大学;2009年
【二级参考文献】
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1 李赞东,杜国清,周顺伍,齐顺章;在代用蛋壳中孵化鸡胚[J];畜牧兽医学报;1994年06期
【相似文献】
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10 亓文宝;李小康;和君;齐岩;樊惠英;焦培荣;廖明;;用反向遗传操作技术产生具有鸡胚高度适应性的H1N1亚型重组猪流感病毒[A];中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会论文集[C];2008年
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2 麦迪信;无针装置体外受精更便捷[N];医药经济报;2002年
3 朴燕;双臂异体移植首获成功[N];医药经济报;2002年
4 冯卫东;英发明生育辅助“导航系统”[N];科技日报;2010年
5 兰峰;体外受精妊娠风险高于自然妊娠[N];中国医药报;2007年
6 钱铮;体外受精妊娠风险高于自然妊娠[N];医药经济报;2007年
7 记者 朱玉;精子库不可滥设 体外受精勿乱做[N];新华每日电讯;2001年
8 唐立新记者 李丽云;东三省首批试管牛在哈诞生[N];科技日报;2008年
9 吴平;体外受精技术传喜报试管婴儿与正常生育婴儿一样健康[N];医药经济报;2003年
10 记者 钱铮;日允许使用第三方生殖细胞体外受精[N];新华每日电讯;2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
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7 牛芳;张民觉生殖生理学研究[D];山西大学;2010年
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9 唐金树;化学去细胞神经同种异体移植的临床前及初步临床应用研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2004年
10 何玉琴;鸡胚腺垂体激素特异性细胞的发生及蛋白转录因子Isl-1对其表达的调控性研究[D];甘肃农业大学;2004年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李玉芳;鹌鹑体外受精和胚胎移植的研究[D];福建农林大学;2006年
2 唐红星;猪卵巢卵母细胞体外成熟与体外受精的研究[D];湖南农业大学;2001年
3 崔凯;鹿卵母细胞体外成熟与体外受精的研究[D];东北林业大学;2004年
4 石少权;小鼠卵母细胞体外成熟培养及体外受精研究[D];重庆医科大学;2004年
5 张琇;牛卵母细胞孤雌激活与体外受精[D];西北农林科技大学;2002年
6 郭宪;牛卵母细胞体外成熟与体外受精的研究[D];甘肃农业大学;2003年
7 陈永昌;猕猴体外受精的研究[D];甘肃农业大学;2003年
8 郝泽东;屠宰山羊有腔卵母细胞体外成熟和体外受精的研究[D];四川农业大学;2004年
9 Sristee Shrestha Prajapati;子宫内膜异位症不孕患者体外受精—胚胎移植结局分析[D];郑州大学;2007年
10 马云;牛卵泡卵母细胞体外成熟、体外受精及受精卵体外培养的研究[D];西北农林科技大学;2001年
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