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《西北农林科技大学》 2006年
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油桃(Prunus persica var. nectarina)肉色性状分子标记的研究

王志刚  
【摘要】: 桃果肉颜色是其重要的经济性状,而该性状的分子标记可以应用于油桃的辅助育种的研究,为优质黄肉油桃新品种的选育打下了基础。本实验利用分子标记技术,以油桃(Prunus persica var.nectarina)品种秦光2号(白肉)和曙光(黄肉)的89株正交F1代为试材,对桃果肉颜色性状进行研究,主要研究结果如下: 1、对CTAB法提取DNA进行了改进。本实验中延长了材料在研磨时液氮中超低温处理的时间,用不含PVP和β-巯基乙醇的CTAB提取缓冲液提取,经纯化后,获得了高质量的基因组DNA。说明延长液氮中预冷处理时间能够很有效的降低酚类和多糖类物质对DNA的影响。 2、得到2个与桃果肉颜色性状连锁的分子标记s21-400和s486-2000。以油桃(Prunus persica var.nectarina)品种秦光2号(白肉)和曙光(黄肉)的89株正交F1代为试材,采用RAPD分子标记技术和BSA法寻找与桃果肉颜色基因紧密连锁的分子标记。经过对340条RAPD引物的筛选后,得到2个与桃果肉颜色性状连锁的分子标记s21-400和s486-2000。并用这两个标记结合前人已有的标记对桃果肉颜色性状进行了定位作图,发现与桃果肉颜色基因连锁距离最近的已知标记是s21-400,其图距为14 cM。 3、对双随机引物的RAPD标记的效果进行了分析。用这5个引物组合对油桃品种曙光进行了扩增分析,结果表明:这5个引物组合均没有出现新的条带,其扩增结果为单个引物扩增结果的简单叠加,其中引物组合s447-s514的扩增结果相对与单个引物的扩增结果少了一条带。 4、通过对各种影响因素在多水平上的分析,确定了SSR-PCR的反应体系为(终浓度):Mg2+ 2.0 mM;Taq DNA聚合酶0.06 U/μL;dNTP 0.25 mM;引物0.5 mM;模板DNA 0.8 mM(25μL体系加20 ngDNA)。
【学位授予单位】:西北农林科技大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:S662.1

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