收藏本站
《西北农林科技大学》 2006年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

小鼠胚胎干细胞体外诱导分化为成骨细胞研究

孙亚东  
【摘要】:胚胎干细胞(ES)具有多向的分化潜能,可以作为组织工程种子细胞有效的来源。本研究采用不同的诱导剂AA+β-磷酸甘油+1,25-二羟VD3或者Dex诱导ES-D_3细胞向成骨细胞定向分化,培养基中诱导剂的添加以及胎鼠成骨细胞与ES-D3细胞共培养增加了分化的成骨细胞的数量。本研究皆在为研究成骨细胞的发生以及建立稳定的ES-D3向成骨细胞分化体系奠定了基础。试验主要结果如下: 1.通过对体外长期培养的ES-D_3细胞初步鉴定得到,该细胞系具有典型的集落形态,AKP染色强阳性,以及保持88.1%以上的正常的二倍体核型。 2.采用酶消化联合组织块培养法分离的胎鼠头盖骨成骨细胞体外连续培养最多达到13d,AKP和茜素红S染色阳性均表现阳性结果。生长曲线测定表明,成骨细胞的增殖符合细胞正常的生长规律。 3.类胚体(EBs)贴壁后,在成骨细胞诱导剂的作用下,各组进行茜素红S染色均得到阳性结果,矿化的骨结节计数时试验组形成的骨结节数均多于对照组,其中,B组(50μg/rnLAA+50mmol/Lβ磷酸甘油+5×10~(-8)M的1,25-二羟维生素D3)形成的骨结节数达到60±5个(P<0.05);C组(50μg/rnLAA+50mmol/Lβ磷酸甘油+1μmol/LDex)形成的骨结节数达到68±9个(P<0.05)。结果表明在β磷酸甘油和AA存在的情况下,Dex比1,25-二羟维生素D3具有更明显的诱导ES-D3细胞向成骨细胞诱导分化的效果。D组胎鼠成骨细胞和ES-D3细胞共培养,矿化骨结节数为47±2个(P<0.05),A组对照组20±8(P<0.05). 4.各组在EBs贴壁后每隔5d进行AKP表达含量测定时,AKP的表达呈现下降,然后上升的趋势。
【学位授予单位】:西北农林科技大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:Q813

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前7条
1 吴培福,钟代彬,曲伟杰,王梅,黄有德,韩博;小鼠成骨细胞改良酶的消化分离培养[J];甘肃农业大学学报;2004年05期
2 张学明,李德雪,赖良学,李子义,文兴豪,杜惜明,曾发贵;小鼠胚胎成纤维细胞的分离和饲养层细胞的制备[J];黑龙江畜牧兽医;1999年09期
3 谢常青,林戈,卢光琇;人类成纤维细胞作为人胚胎干细胞饲养层细胞的初步研究[J];科学通报;2002年24期
4 葛秀国,华进联,杨继建,徐小明,窦忠英;山羊原始生殖细胞的分离与培养[J];西北农林科技大学学报(自然科学版);2005年02期
5 刁英;染色体核型研究的方法及应用[J];渝西学院学报(自然科学版);2004年02期
6 李靖,黄鲁豫,王全平,吕荣,白建萍,倪国华;改良组织块混合酶消化法成骨样细胞培养[J];中国骨伤;2003年11期
7 何志旭,黄绍良,李予,张清学;人胚胎干细胞系的初步建立[J];中华医学杂志;2002年19期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 宋晓平;小鼠胚胎干细胞定向诱导分化成骨细胞研究[D];西北农林科技大学;2003年
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 秦洁,李碧春,陈国宏,蔡琳琳,韩威,周冠月,吴洪,孙思宇;鸡胚胎原始生殖细胞的培养和传代[J];动物学报;2005年04期
2 林日阳;吴锋;何立群;;肾系膜细胞在补肾药物基础上进一步上调成骨细胞collagenⅠ和cbfα1基因表达[J];中华中医药杂志;2012年06期
3 傅德皓;杨述华;马德彰;李鲲;郜勇;;鼠胚成骨细胞的原代培养与鉴定[J];创伤外科杂志;2006年02期
4 熊浩;崔雯;王杏龙;刘翔;;山羊原始生殖细胞分离与培养的影响因素[J];中国草食动物;2010年05期
5 李先安;雷光华;刘文和;李康华;覃芙;;大鼠成骨细胞的体外培养和鉴定[J];湘南学院学报(医学版);2007年01期
6 孙兴参,伊亚玲,刘颖,于玲珠,刘娣;猪胎儿成纤维细胞制作方法的改进及应用[J];东北农业大学学报;2002年03期
7 常静;雷寒;陈建斌;贾锋鹏;;与胎儿心肌细胞共同培养诱导人胚胎干细胞发生心肌样分化[J];第三军医大学学报;2007年15期
8 刘健红;周俊强;李玉谷;;胚胎干细胞分离培养研究进展[J];动物医学进展;2007年11期
9 白莹敏;李跃民;陈恺;;昆明系小鼠饲养层细胞制备条件的优化[J];动物医学进展;2009年06期
10 杨志鹏 ,周浙闽;国内外干细胞研究现状及趋势综述[J];福建医药杂志;2003年05期
中国重要会议论文全文数据库 前3条
1 张丽瑞;李旭;陈葳;;人胚胎干细胞建系的方法学研究进展[A];全国首届动物生物技术学术研讨会论文集[C];2004年
2 王梅;吴培福;赵德明;苏敬良;韩博;;氟对体外培养成骨细胞骨钙素基因表达的影响[A];中国畜牧兽医学会2006学术年会论文集(下册)[C];2006年
3 徐芝华;和法文;吴培福;曲伟杰;韩博;;氟对体外培养小鼠成骨细胞IGF-Ⅰ基因表达的影响[A];中国畜牧兽医学会2008年学术年会暨第六届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会论文集[C];2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 董晓;猪胚胎干细胞(EG)建系影响因素的研究[D];中国农业大学;2003年
2 宋晓平;小鼠胚胎干细胞定向诱导分化成骨细胞研究[D];西北农林科技大学;2003年
3 杨学义;表皮干细胞建系及重建角膜缘干细胞缺损眼表研究[D];西北农林科技大学;2004年
4 马勇江;骨髓与脂肪间质干细胞分离与诱导分化为成骨细胞的研究[D];西北农林科技大学;2004年
5 袁毅君;EGFP标记胚胎干细胞体外向心肌样细胞分化及拟胚体形成的初步研究[D];甘肃农业大学;2004年
6 王彤;胚胎干细胞的分离培养和诱导分化为神经细胞的实验研究[D];中国医科大学;2005年
7 华进联;人类胚胎生殖细胞的分离克隆及生物学特性研究[D];西北农林科技大学;2005年
8 姜景岩;胚胎干细胞来源的造血干/祖细胞辅助化疗的实验研究[D];山东大学;2005年
9 王明海;可注射性细胞型纳米组织工程骨的构建及其应用于牵拉成骨的实验研究[D];苏州大学;2005年
10 秦洁;鸡胚胎原始生殖细胞建系能力的研究[D];扬州大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 马颖敏;中国侧柏地理种源核型分析与进化趋势[D];山东农业大学;2010年
2 王爱喜;仙客来种质核型及其分类的研究[D];山东农业大学;2010年
3 陈世彬;昆明小鼠胚胎干细胞培养体系的优化[D];新疆农业大学;2010年
4 谭爱花;成年男性血清骨钙素与代谢综合征的相关研究[D];广西医科大学;2011年
5 张彬;不同诱导时间下大鼠脂肪间充质干细胞成骨的差异[D];山西医科大学;2011年
6 张芳;叶籽银杏变异特性分析[D];山东农业大学;2011年
7 何清;建立小鼠胚胎干细胞实验模型用于aFGF发育毒性的评价[D];暨南大学;2011年
8 张静南;马、驴和骡成纤维细胞培养、核型及其G带分析研究[D];内蒙古大学;2011年
9 李俏;薯蓣植物种质资源初步评价[D];海南大学;2011年
10 卿秋静;九种百合属植物核型及遗传变异研究[D];四川农业大学;2011年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 赖良学,郑瑞珍,辛俭,朱少侠,秦鹏春,孙方臻;家兔囊胚在饲养层上的生长行为[J];动物学报;1998年03期
2 尚克刚,胡新立;小鼠囊胚的不同遗传背景对形成ES细胞集落的影响[J];北京大学学报(自然科学版);1993年02期
3 韩嵘,汤富酬,尚克刚;小鼠ES细胞可在体外诱导分化为神经元样细胞[J];北京大学学报(自然科学版);2002年02期
4 尚克刚,胡新立,李子玉,王学庆,刘爱民,孟国良,童英;饲养层对维持新建ES细胞系的影响[J];北京大学学报(自然科学版);1994年04期
5 刘仕勇,张可成,杨辉,何家全,石军;神经干细胞的分离培养及其鉴定[J];第三军医大学学报;2000年01期
6 吴旋,黎海蒂,李树浓,徐海伟,徐令;小鼠胚胎干细胞体外分化为神经前体细胞的研究[J];第三军医大学学报;2001年11期
7 顾祖超,李起鸿,赵玉峰,周红星;兔骨髓基质细胞在诱导条件下的成骨特性[J];第三军医大学学报;2002年05期
8 胡丹,惠延年,PhilipP.Chen;丝裂霉素C抑制人结膜囊成纤维细胞生长及增殖[J];第四军医大学学报;2001年13期
9 窦忠英,华进联;胚胎干细胞的研究与应用[J];动物医学进展;2001年01期
10 时伟红,安志兴,董婉维,秦英,王碌增,王太一;由体外受精囊胚获得ICR小鼠ES细胞[J];动物医学进展;2002年04期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 李相运;小鼠胚胎干细胞多能性研究[D];西北农林科技大学;2001年
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 李松;从原始生殖细胞中分离克隆牛胚胎干细胞[D];西北农林科技大学;2001年
2 华进联;源于原始生殖细胞的人、小鼠ES细胞的分离克隆[D];西北农林科技大学;2001年
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 张玉兰,孙玉英,金连弘;人胚胎干细胞研究进展[J];国外医学.遗传学分册;2000年04期
2 施渭康;胚胎性干细胞定向诱导分化——新崛起的细胞工程[J];细胞生物学杂志;2000年04期
3 蒙超衡,黎宗强,梁明振;胚胎干细胞的培养体系综述[J];广西科学;2002年04期
4 张怡;胚胎干细胞研究进展[J];生物医学工程学杂志;2002年02期
5 马勇江,杨学义,窦忠英;胚胎干细胞诱导分化研究进展[J];西北农林科技大学学报(自然科学版);2003年03期
6 ;将人的体细胞移植到牛卵中培育出人ES细胞[J];生物技术通报;1999年02期
7 杨桦,傅继梁;表达绿色荧光蛋白的小鼠胚胎干细胞系的生物学特性[J];第二军医大学学报;2001年04期
8 黄汉军;哺乳动物胚胎干细胞研究进展[J];甘肃农业大学学报;2003年02期
9 秦洁,肖小珺,李碧春;胚胎干细胞的生物学特性及其应用研究[J];动物科学与动物医学;2003年01期
10 曹鸿国,张涌;小鼠体细胞核移植及ES细胞样集落分离[J];自然科学进展;2005年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 杨桦;戴建新;傅继梁;孙树汉;;表达GFP的ES细胞株的构建及其组织嵌合特性研究[A];中国生物工程学会第三次全国会员代表大会暨学术讨论会论文摘要集[C];2001年
2 吴涛;金丹;南开辉;裴国献;;淫羊藿苷可促进羊骨髓间充质干细胞的增殖和成骨分化[A];第七届全国创伤学术会议暨2009海峡两岸创伤医学论坛论文汇编[C];2009年
3 王军;刘钧;赵志河;;压应力对MSCs成骨分化早期成骨和破骨生成能力的影响[A];2008年全国生物流变学与生物力学学术会议论文摘要集[C];2008年
4 刘霞;栗占国;Wei Zhu;Carl.P.Blobel;;ADAM 9、15、17基因敲除小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化研究[A];全国临床免疫检验研讨会暨第六届全国临床免疫学术会议论文汇编[C];2009年
5 苏伟;崔向荣;白鹤;;高频脉冲电磁场对骨髓间充质干细胞增殖和成骨分化的影响[A];第十八届全国中西医结合骨伤科学术研讨会论文汇编[C];2011年
6 李芳菲;王亚平;;胚胎干细胞自我更新的分子机制[A];中国解剖学会第八届组织学与胚胎学专业青年研讨会论文集[C];2004年
7 李冉;李贤玉;周密;韩娜娜;张旗;;HtrA1可能通过BMP-2来调节人牙周膜细胞成骨分化[A];全国第八次牙体牙髓病学学术会议论文汇编[C];2011年
8 何晓青;胡安斌;蔡继业;赵涛;梁志红;;小鼠ES细胞体外发育的EB表面超微结构的AFM观察[A];2003年纳米和表面科学与技术全国会议论文摘要集[C];2003年
9 孟瑛;黄绍良;闵军;郭中敏;张绪超;;定向诱导ES细胞为肝脏细胞及其凝血因子表达格局分析[A];第九届全国实验血液学会议论文摘要汇编[C];2003年
10 王钊;金丹;;NPY受体在大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化过程中的表达[A];第七届全国创伤学术会议暨2009海峡两岸创伤医学论坛论文汇编[C];2009年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 记者 毛磊;美国选定伙伴[N];新华每日电讯;2002年
2 记者毛磊;美签订人类干细胞研究国际协议[N];人民日报;2002年
3 尚蔚;这边晴空 那边雨[N];中国高新技术产业导报;2001年
4 应庆;干细胞在血液学和外科应用逐步扩展[N];中国医药报;2005年
5 高东阳;有一个市场正在形成,那就是——“更换人体部件”[N];医药经济报;2002年
6 记者 吴仲国;日用万能细胞生成血管[N];科技日报;2000年
7 余志平;基因疗法有望控制高血糖[N];中国医药报;2003年
8 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所 章静波;干细胞应用是BT产业的核心之一[N];中国经营报;2001年
9 支勇平;西北农林科大“牛和人类胚胎干细胞研究”成果通过国家鉴定[N];陕西日报;2002年
10 ;把握高新技术 探讨应用管理[N];中国医药报;2003年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 杨勇;电磁场促进骨髓间充质干细胞成骨分化及初步机制[D];华中科技大学;2010年
2 洪盾;成骨分化中糖皮质激素信号通路的研究[D];浙江大学;2011年
3 黄姗;miR-22对人脂肪组织来源间充质干细胞成脂成骨分化的调控作用及其分子机制研究[D];北京协和医学院;2012年
4 张锦芳;miR-20调控人骨髓来源的间充质干细胞成骨分化及机理研究[D];清华大学;2010年
5 李洪伟;硅酸二钙涂层离子溶液促进人骨髓间充质干细胞成骨分化及其机制的实验研究[D];苏州大学;2011年
6 杨楠;miR-21及其靶基因Sprouty1调控人骨髓间充质干细胞成骨分化的机制研究[D];第四军医大学;2012年
7 李海芳;β-肾上腺素受体在小鼠MSCs成骨、成脂分化中的作用[D];清华大学;2010年
8 王敏;MicroRNAs调控人脂肪源性干细胞成骨分化及ODN影响其调控的研究[D];吉林大学;2010年
9 朱帮福;重组人骨形成蛋白成骨分化及其定量测活的研究[D];第四军医大学;2001年
10 周欣;分离615小鼠ES细胞集落及诱导ES细胞定向分化为神经细胞的实验研究[D];中国医科大学;2002年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 孙亚东;小鼠胚胎干细胞体外诱导分化为成骨细胞研究[D];西北农林科技大学;2006年
2 华进联;源于原始生殖细胞的人、小鼠ES细胞的分离克隆[D];西北农林科技大学;2001年
3 黄钊;恒定强度1KHz电磁场对大鼠骨髓间充质干细胞增殖及成骨分化作用的探索性研究[D];广西医科大学;2012年
4 侯秋科;维生素D受体介导龟板诱导的骨髓间充质干细胞向成骨分化[D];广州中医药大学;2010年
5 郑创义;缝隙连接细胞间通讯在大鼠骨髓基质细胞成骨分化中的作用[D];汕头大学;2010年
6 章淑芳;小鼠ES细胞的定向诱导分化与建系实验研究[D];浙江大学;2004年
7 罗嘉全;hMSCs成骨分化相关IncRNAs的筛选和鉴定[D];南昌大学;2012年
8 王志平;脉冲电磁场对脱钙骨基质诱导人骨髓间充质干细胞增殖与成骨分化的影响[D];第三军医大学;2010年
9 张晓蕾;DNA甲基化对骨髓间充质干细胞成骨分化的作用[D];浙江大学;2010年
10 王明明;玻璃粘连蛋白对大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的影响[D];青岛大学;2010年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026