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《西北农林科技大学》 2007年
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凤县野生植物内生放线菌的分离筛选及鉴定

马强  
【摘要】: 本实验通过有效的分离方法从凤县的野生植物中分离获得15株内生放线菌,筛选得到Am3和Am5两株高活性的内生菌株,优化其摇瓶发酵条件,并对两株菌的温室防病促生效果及分类鉴定进行研究,希望为新型生防菌的开发利用奠定基础。本论文主要包括以下几部分: 1.内生放线菌的获得及其在非寄主作物上的定殖能力测定。用选择性培养基从凤县地区的13种野生植物中分离获得15种放线菌,非寄主作物定殖试验表明分离所获放线菌不仅能够定殖在不同植物体内,而且能定殖在植物的不同部位,具有强内生性。 2.内生放线菌离体抑菌活性测定。通过皿内拮抗试验确定分离获得的15株放线菌中Am3和Am5两株菌对5种供试靶标真菌(灰葡萄孢Botrytis cinerea、胶孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioides、尖镰孢萎蔫专化型Fusarium oxysporum f.sp. vasinfectum、梨状毛霉菌Mucor Piriformis和粉红聚端孢Trichothecium roseum)有明显拮抗活性,其中Am3对灰葡萄孢菌抑制率达89.0%,Am5和对西瓜枯萎病菌抑制率达71.0%;发酵液抑菌实验结果表明Am3、Am5两株菌的发酵液对供试靶标真菌均有明显抑制作用,菌体残渣提取物的拮抗活性明显高于发酵虑液提取物。 3.内生放线菌温室防病病促生作用测定。温室番茄、黄瓜防病促生实验结果显示菌株Am3、Am5能有效防治温室黄瓜白粉病和番茄叶霉病,促进植株生长,其中经Am3处理过的番茄植株干重比对照植株干重增加120%,对番茄灰霉病的防效达74.4%。 4.菌株发酵条件优化。对Am3和Am5两株菌摇瓶发酵条件进行初步优化,通过考察碳源、有机氮源、无机氮源、磷酸盐等无机离子对两株菌发酵的影响,确定两株菌最佳发酵培养基为改良高氏培养基。菌株Am3发酵液最佳初始pH值为7.5,最佳培养时间为120h,最佳培养温度为26℃;菌株Am5发酵液最佳初始pH值为7.0,最佳培养时间为132h,最佳培养温度为25℃ 5.菌株鉴定。应用形态学及16SrDN A序列分析的方法对内生放线菌Am3和Am5进行了菌种鉴定,结果表明菌株Am3属于链霉菌属蓝色类群靛蓝色链霉菌(Streptomyces indigocolor);菌株Am5属于链霉菌属金色类群橄榄色链霉菌(Streptomyces olivaceus)。
【学位授予单位】:西北农林科技大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:S476.1

【参考文献】
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