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《西北农林科技大学》 2007年
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苹果渣中多酚的提取分离技术研究

李涛  
【摘要】: 我国苹果渣资源十分丰富,利用苹果渣生产具有生理活性的多酚物质具有广阔的市场前景。本研究即以苹果渣为原料,采用超声波提取法,通过响应曲面分析确定了苹果渣中多酚提取的最佳工艺条件;经过大孔吸附树脂初步纯化后的苹果多酚,再利用葡聚糖凝胶Sephadex LH-20对苹果多酚单体分子进行了分离研究;采用高效液相色谱法对收集的组分进行了测定。主要研究结果如下: 1.考察了超声波功率、提取时间、温度、溶剂浓度、料液比和提取次数对苹果渣中多酚提取的影响,在单因素实验的基础上利用Plackett Burman设计法筛选出超声波提取苹果多酚的关键影响因子分别为温度、乙醇浓度和提取次数。 2.通过响应面法(RSM)建立了超声波提取苹果渣中的多酚的二次多项数学模型,得出乙醇浓度和提取次数的交互作用显著,同时优化出超声波提取苹果渣中的多酚的工艺参数:温度61℃,乙醇浓度62%,提取次数2次。在此条件下多酚得率取得最大值1.21g/kg湿果渣。 3.确定了一种新型的经Sephadex LH-20柱分离后所得洗脱液的合并方法,即通过紫外可见分光光度计跟踪扫描及测定其吸光值,根据其在最大吸收峰下的紫外吸收值曲线,结合Sephadex LH-20的分离原理,有选择性地合并各管洗脱液,从而能快速并有效地分离出单体,得到的单体纯度更高。 4.确定了苹果多酚HPLC分析条件,以甲醇和1%乙酸水溶液作为流动相,采用梯度洗脱,0~8分钟甲醇浓度为0,8~40分钟甲醇浓度保持在35%,40分钟以后甲醇浓度为0,运行时间为45分钟,检测波长为280nm,柱温30℃,流速1.0mL/min,进样量20μL,七种多酚标准品的峰得到了较好的分离。 5.苹果多酚液经葡聚糖凝胶Sephadex LH-20柱分离后,根据确定的洗脱液合并方法,合并洗脱液得到了5个收集组分,通过HPLC对定性及定量分析,结果表明:金丝桃苷纯度为91%,产品得率为0.088g/kg果渣;咖啡酸纯度为87%,产品得率为0.051g/kg果渣。 6、液相色谱分析结果表明,Sephadex LH-20凝胶树脂对苹果渣多酚有较好地分离效果,纯化所得单体的产物可达90%以上。
【学位授予单位】:西北农林科技大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:TS255

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