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《西北农林科技大学》 2007年
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氯氰菊酯降解菌的分离筛选鉴定与特性研究

杨娜  
【摘要】: 本研究从郑州力克农药厂采集了5个污染的土样。通过对土样中微生物的分离与筛选,发现排污口的污泥和沉淀池内的土样中氯氰菊酯降解菌数量较多,其中在沉淀池中分离出了高效降解氯氰菊酯菌株3-7,经初步鉴定,该菌为革兰氏阴性球菌,16SrDNA鉴定结果该菌属微杆菌(Microbacterium sp)。在通气、28℃、pH7.5培养7d,对氯氰菊酯农药(250 mg/L)的降解率为78.1%。从生长曲线和降解曲线的比较可知,降解菌3-7生长的对数期和稳定期在12-96h,且降解菌3-7生长的越好对氯氰菊酯的降解率也就越高。 降解菌3-7的生长条件和降解条件优化正交试验得出降解菌3-7最佳生长条件为B3C3A2E4D3。降解菌3-7的最佳降解条件为B2C4A3E3 D4。降解菌3-7对其他农药的降解试验结果:氟氯氰菊酯(54.21%)﹥甲氰菊酯(32.1%)﹥溴氰菊酯﹙26.73%﹚﹥氰戊菊酯﹙12.12%﹚﹥毒死蜱﹙9.68%﹚﹥甲胺磷(10.12%)﹥敌敌畏(4.26%)。说明降解菌3-7对其他农药有降解能力,特别是对菊酯类农药有特异性。 对降解菌3-7粗酶液的酶活力研究结果表明,胞内酶液在pH=7.0和30℃的反应条件下反应20min对氯氰菊酯的降解率达到88.3%;相反胞外粗酶液在pH=7.0和30℃的反应条件下反应20min对氯氰菊酯没有降解能力。提取胞内酶采用离心速度为12000r/min。 降解菌3-7胞内粗酶液对不同农药的降解力的研究结果表明,对氯氰菊酯的降解效能为氯氰菊酯(89.43%)﹥氰戊菊酯(82.65%)﹥吡虫啉﹙73.14%﹚﹥甲胺磷﹙53.18%﹚﹥毒死蜱﹙40.32%﹚。可见降解菌3-7的降解酶对拟除虫菊酯类农药有特异性。 降解菌3-7胞内粗酶液在30℃、20min条件下,在pH5.7-8.0范围对氯氰菊酯均可降解,在pH为7.6时其降解率为86.54%。降解菌3-7胞内粗酶液在pH7.6下反应20min条件下,在温度20-50℃之间对氯氰菊酯也可降解,在温度为40℃时其降解率为83.06%。将降解菌3-7胞内粗酶液放于最适pH值的缓冲液中,在25-60℃范围内保温1h,然后加氯氰菊酯反应20min对不同温度的稳定性测定结果表明,粗酶液在20℃下稳定性最好,其降解率为37.6%。菌株3-7胞内粗酶液对不同pH的稳定性测定结果表明,粗酶液在pH5.7-8.0的磷酸缓冲液中保温1h后对氯氰菊酯的降解在pH7.6下最稳定,降解率为66.67%。 油菜室内盆栽正交试验的统计分析结果表明,影响氯氰菊酯降解率的大小依次为作用时间、喷菌量、处理方式、喷药时间和喷药量;降解菌3-7对氯氰菊酯降解的最优化条件为A1D3E3C2B2。验证试验结果表明在作用7d后降解菌3-7对氯氰菊酯的降解率为92.3%,油菜中氯氰菊酯的残留量为0.03mg/kg,符合国家标准规定。
【学位授予单位】:西北农林科技大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:X172

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【引证文献】
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