收藏本站
《西北农林科技大学》 2007年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

断奶仔猪多系统衰竭综合征的研究

杨增岐  
【摘要】: 断奶仔猪多系统衰竭综合征(Postweaning multisystemic wasting syndrome, PWMS)是由猪2型圆环病毒(Porcine circovirus serotype 2,PCV2)引起的一种新发现的传染病,它不但可以引起断奶仔猪发生衰竭、死亡,还与仔猪A2型先天性震颤(Congenital tremor type A II,CT)、怀孕母猪繁殖障碍(Reproductive failure)、成年猪皮炎肾病综合征(Porcine dermatitis and nephropathy,PDNS)和呼吸道疾病综合征(Porcine respiratory disease syndrome, PRDS)有关。这些疾病的广泛流行严重影响了养猪业的发展,给许多国家和地区带来巨大的损失。更为严重的是PCV2的感染可以造成免疫抑制,引起其他各种病原的继发感染,造成的间接损失难以估计。目前,PCV2已经成为严重阻碍我国养猪业发展的主要病原之一。为了调查确证陕西省是否受到该病的感染,为我国诊断、防制与研究该病提供科学依据与技术手段,笔者进行了陕西省断奶仔猪多系统衰竭综合征的研究,取得以下结果: 1.陕西省PMWS感染的血清学调查。通过对陕西省多个不同地区的规模化养猪场的PCV2抗体进行检测,结果表明:陕西省该病的平均阳性率为32.9%(78/237);无PMWS症状的断奶仔猪阳性率为28.6%(2/7),疑患PMWS的阳性率为61.5%(8/13);肥育猪阳性率为43.7%(31/71),种公猪阳性率为16.7%(2/13),后备母猪阳性率为15.6%(7/45);经产母猪阳性率为60.4%(29/48);不同地区PCV2感染的程度具有一定的差异,阳性率从20%到65%不等。首次从血清学方面确证陕西省养猪业已经受到PCV2的感染。 2.PCV2 SX株的分离与鉴定。根据GenBank中猪圆环病毒1型和2型的序列,设计2对套式PCR引物,从160头疑死于PMWS的仔猪组织病料提取DNA,进行套式PCR扩增,检测到了87份PCV2阳性病料。取其中3份病料接种PK-15细胞传代培养,提取第10代和20代细胞培养物中的DNA做PCR与简介免疫荧光鉴定,获得了PCV2陕西分离株。首次从病原学方面证明PCV2已经在陕西省广泛流行。 3.PCV2 ORF2基因的克隆及其序列分析。根据GenBank中PCV2 ORF2基因序列设计1对引物,在引物P1中引入Kpn I酶切位点,引物P2中引入HindⅢ酶切位点。从PCV2陕西分离株细胞培养物中扩增ORF2基因(702 bp),并克隆入pMD18-T载体,经PCR、酶切、测序鉴定,筛选出重组质粒pMD-ORF2。对测序结果用DNAStar软件分析并与GenBank上发表的其他序列进行比对,绘制遗传进化树。结果表明,所克隆的ORF2基因与DB分离株核苷酸序列同源性最高,为99.7%,与其它PCV2的ORF2核苷酸序列同源性在90.6%~99.7%之间,推导的氨基酸序列同源性在90.9%~99.6%之间。说明PCV2陕西分离株未发生明显的变异。 4.PCV2抗体检测间接ELISA方法的建立。根据GenBank中PCV2 ORF2基因序列设计1对引物,应用PCR扩增PCV2 ORF2基因的3’端约600 bp。该PCV-2 ORF2基因已去除终止子,并在其上下游添加Kpn I和Hind III酶切位点。PCR产物用Kpn I和Hind III酶切后与经同样处理过的pBAD/gIIIB Vector连接,转化TOP10细胞后挑取阳性克隆,经酶切鉴定和测序验证后用L-arabinose诱导进行融合表达,表达的蛋白主要以包涵体存在。经过镍离子亲和层析柱纯化,SDS-PAGE显示一条约28 ku的目的条带,纯度达到85%以上。以该28 ku的多肽包被酶标板,建立了检测PCV2抗体的间接ELISA方法。用该方法对陕西关中和陕北10个养猪场的160份血清进行了检测,其结果与用华中农业大学猪2型圆环病毒ELISA检测试剂盒检测的结果一致。 5.PCV2 ORF2基因重组腺病毒的构建及其表达。将重组质粒pMD-ORF2和腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV用Kpn I和HindⅢ双酶切,经酶切的ORF2基因和穿梭载体pAdTrack-CMV连接后转化E.coli DH5α,酶切、测序鉴定。将获得携有PCV2 ORF2基因的重组穿梭载体线性化后与腺病毒基因组骨架载体pAdEasy-1共转染E.coli BJ5183,使之同源重组。经PCR、酶切鉴定后获得重组的腺病毒质粒,最后用PacⅠ酶切线性化,脂质体转染入293细胞,获得含PCV2 ORF2基因的重组腺病毒。经Western blot证明,表达的重组蛋白能够被PCV2阳性血清所识别,具有良好的抗原性,为PCV2感染的诊断和PCV2疫苗的研制奠定了基础。 6.PCV2重组腺病毒对小鼠的免疫试验。将72只6周龄小鼠随机分成3组,分别皮下接种AdCMV—ORF2(107TCID50/只)、不含ORF2基因的腺病毒空载体(107TCID50/只)和PBS液。2周后重复免疫。在第2次接种前和接种后2、4、6周,用间接ELISA法测定血清中抗PCV2 ORF2蛋白的抗体水平。结果显示,在第2组和第3组小鼠的血清中未检测到抗PCV2抗体,但在用AdCMV—ORF2接种的第1组小鼠对PCV2 ORF2蛋白产生了较好的体液免疫反应。第1次免疫后2周(第2次免疫前),第1组所有的小鼠血清抗体转为阳性,且抗体水平达到1:800以上。第2次免疫后2、4、6周,其抗体水平分别达到1:1800、1:4800和1:3600。研究结果为进一步研制猪圆环病毒重组腺病毒活载体疫苗奠定了良好的基础。
【学位授予单位】:西北农林科技大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:S858.28

知网文化
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 曹胜波,陈焕春,肖少波,赵俊龙,吕建强,钱平;猪Ⅱ型圆环病毒豫A株的全基因组克隆与序列分析[J];病毒学报;2002年02期
2 芦银华,华修国,陈德胜,黄伟坚,戴亚斌,谈国蕾,陈溥言;猪圆环病毒2型分离毒株全基因组的克隆及序列分析[J];病毒学报;2003年01期
3 汤福祥,郑权,黄宗海,张庆国,车小燕;应用改进的AdEasy系统制备重组腺病毒[J];第一军医大学学报;2003年05期
4 王忠田,杨汉春,吕艳丽;猪圆环病毒II型ORF2基因的克隆及序列分析[J];动物医学进展;2003年01期
5 杨汉春;猪免疫抑制性疾病的流行特点与控制对策[J];中国畜牧兽医;2004年05期
6 Khampee K,刘建民;圆环病毒2型亚洲流行现状及其综合防制方法[J];中国动物保健;2005年05期
7 郭战军,李晓成,陈德坤,金颜辉;福州市猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)流行病学调查[J];中国动物检疫;2005年08期
8 郎洪武,张广川,吴发权,张创贵;断奶猪多系统衰弱综合征血清抗体检测[J];中国兽医科技;2000年03期
9 郎洪武,王力,张广川,程君生,宋立;猪圆环病毒分离鉴定及猪断奶多系统衰弱综合征的诊断[J];中国兽医科技;2001年03期
10 芦银华,陈德胜,戴亚斌,陈溥言;应用复合PCR法检测猪圆环病毒[J];中国兽医科技;2001年09期
中国博士学位论文全文数据库 前3条
1 王忠田;猪圆环病毒2型ORF2基因表达及重组蛋白ELISA方法的建立[D];中国农业大学;2003年
2 温立斌;猪圆环病毒2型的分子流行病学研究[D];中国农业大学;2005年
3 琚春梅;猪2型圆环病毒ELISA诊断方法及猪2型圆环病毒-伪狂犬病病毒二价基因工程疫苗研究[D];华中农业大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前4条
1 王新;猪圆环病毒四川株分离鉴定及猪圆环病毒2型ORF2的克隆与序列分析[D];四川农业大学;2004年
2 张晓勇;猪圆环病毒2型ORF2基因在巴斯德毕赤酵母中的表达及初步应用[D];南京农业大学;2005年
3 边席峰;猪圆环病毒2型ORF2基因的真核表达及间接ELISA方法的建立[D];四川农业大学;2005年
4 刘新文;猪Ⅱ型圆环病毒分离鉴定及嵌合病毒PCV2-1感染性克隆构建的研究[D];华中农业大学;2005年
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 朱启星;马泰;涂登云;沈彤;丁锐;;银杏叶提取物对三氯乙烯诱导的人角质形成细胞NO合成的影响[J];癌变.畸变.突变;2006年06期
2 刘家仁,庞永珣,张尤恩,范春,王贤珍,朱振岗;用细胞转化实验检测S江有机污染致癌危险性[J];癌变.畸变.突变;1999年04期
3 连京华,秦卓明,黄波;鸡传染性支气管炎研究进展[J];山东农业科学;2000年01期
4 钱凤芹,刘长梅,任红梅,李爱芹,庄文忠;鸡新城疫病毒山东分离株F蛋白基因的克隆与鉴定[J];山东农业科学;2001年03期
5 东野传现;史玉颖;黄中利;刘玉山;亓丽红;傅剑;;“禽喘康颗粒冲剂”对鸡人工感染新城疫病毒临床效果的研究[J];山东农业科学;2007年02期
6 李子剑;李云龙;陈苏;艾武;宋敏训;李玉峰;;鸭肠炎病毒US2基因的序列测定与分析[J];山东农业科学;2008年03期
7 ;An Immunochromatographic Strip Test for Rapid Detection of Antibodies against Porcine Circovirus Type 2[J];Animal Husbandry and Feed Science;2011年05期
8 李祥辉;黄大鹏;黄玉兰;;鸡抗小鹅瘟病毒IgY提取方法的比较试验[J];安徽农学通报(上半月刊);2009年23期
9 王子馨;李坤;崔保安;王淑娟;陈红英;张宇耕;;猪细环病毒和猪圆环病毒2型混合感染的检测[J];安徽农学通报(上半月刊);2012年09期
10 张小飞,潘孝成,汪秀娟,赵瑞宏,蒋书东;绩溪县浩寨兔病毒性出血症的诊断[J];安徽农业科学;2002年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 庄金秋;梅建国;沈志强;;赤羽病病毒检测方法研究进展[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
2 庄金秋;梅建国;沈志强;;犬瘟热病毒实验室检测方法研究进展[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
3 梁鹏帅;蔡汝健;刘燕玲;孙瑞芹;张龙现;宋长绪;;华南地区猪圆环病毒及猪繁殖与呼吸综合征病毒检测分析[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
4 翟少伦;陈胜男;张建武;韦祖樟;龙进学;袁世山;魏文康;陈琴苓;宣华;吴大成;;猪圆环病毒感染人类的可能途经剖析[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
5 曾思遥;张淑琼;余绍华;唐志玲;陈瑞爱;罗满林;;TaqMan实时荧光定量PCR检测PCV2方法的建立[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
6 蒋再学;陈征兵;林文;余邵华;竺薇;张晓明;罗满林;;仔猪伪狂犬PCR鉴定及病毒分离[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
7 陈宗艳;朱英奇;李传峰;李露;付玉志;王超;刘光清;;新发鸭源呼肠孤病毒(TH11株)的分离与鉴定[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
8 刘俊;赵荣祥;丛品;洪钱江;;哺乳动物内耳再生毛细胞前体细胞来源的研究[A];中华中医药学会耳鼻喉科分会第15届学术交流会论文集[C];2009年
9 王珊;刘冰;李德朋;孙远;马勇;田秀丽;宋宇;王承宇;张乃生;;马蹄香治疗犬细小病毒性肠炎的疗效观察[A];中国畜牧兽医学会家畜内科学分会第七届代表大会暨学术研讨会论文集(下册)[C];2011年
10 冯婷;涂文伟;黄娟;李晋蓉;殷仲伟;范营营;李虹;;流感病毒H1N1在MDCK细胞的培养及纯化条件的优化[A];第五次全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会论文汇编[C];2011年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 赵冬敏;B亚群禽白血病病毒分离株的生物学特性[D];山东农业大学;2010年
2 赵鹏;猪繁殖与呼吸综合征病毒在抗体选择压下的变异[D];山东农业大学;2010年
3 刘栋;畜禽补体C3d基因克隆及序列分析和重组鸡C3d免疫佐剂效果研究[D];山东农业大学;2010年
4 张青婵;A亚群禽白血病病毒不同分离株的基因组和生物学特性比较[D];山东农业大学;2010年
5 姚小磊;基于TGF-β1与Bcl-2的抗干眼症中药高通量筛选体系的建立[D];湖南中医药大学;2010年
6 宋翠平;H5N1禽流感和鹅Ⅰ型副粘病毒分离株的生物学特性及感染性的研究[D];中国海洋大学;2010年
7 郑小坚;家蚕类胰岛素基因BBX-B8的功能研究[D];苏州大学;2010年
8 黄馨;端粒缩短影响原发性高血压及其并发症的发生[D];北京协和医学院;2010年
9 张琪;KLT对中脑神经系统疾病的影响及KLT、NDV、SW联合抗肿瘤作用机制研究[D];西北农林科技大学;2010年
10 熊义;IRES调控α-干扰素的抗FMDV研究[D];武汉大学;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 宋飞;猪圆环病毒2型(WH株)和猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒混合感染致病性的研究[D];华中农业大学;2010年
2 张敏;猪圆环病毒2型感染猪肺泡巨噬细胞的蛋白质组学研究[D];华中农业大学;2010年
3 张玉丹;猪圆环病毒2型(WH株)灭活疫苗效力的研究——PCV2在肠、肾的分布变化[D];华中农业大学;2010年
4 许媛媛;鸭瘟的动态病理学研究和鸭CD4的克隆[D];华中农业大学;2010年
5 逄莎莎;PCV2人工感染对仔猪免疫器官的影响以及PCV2-WH株灭活疫苗的保护作用研究[D];华中农业大学;2010年
6 郑瑜;银杏核心种质构建初探[D];华中农业大学;2010年
7 李爽;鸭源禽呼肠孤病毒感染雏鸭的免疫病理学研究[D];华中农业大学;2010年
8 徐珊珊;重组杆状病毒介导的高致病性猪繁殖与呼吸综合征基因工程疫苗研究[D];华中农业大学;2010年
9 胡智斌;湖北省高致病性猪蓝耳病活疫苗(JXA1-R株)试用报告[D];华中农业大学;2010年
10 张厚勇;猪戊型肝炎病毒的分子流行病学调查及ORF2区的克隆和表达[D];华中农业大学;2010年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 曹胜波,陈焕春,肖少波,赵俊龙,吕建强,钱平;猪Ⅱ型圆环病毒豫A株的全基因组克隆与序列分析[J];病毒学报;2002年02期
2 芦银华,华修国,陈德胜,黄伟坚,戴亚斌,谈国蕾,陈溥言;猪圆环病毒2型分离毒株全基因组的克隆及序列分析[J];病毒学报;2003年01期
3 黄亚东,王艳,温硕洋,曾锦绣,曹阳,李校坤,钟仰进;昆虫抗真菌肽Thanatin基因的合成及原核表达[J];蚕业科学;2002年02期
4 韩庆彦,魏润生,陈轶霞,高生智,杨小玲,董晓琴,舒展,史永年;甘肃省规模化养猪场乙型脑炎的血清学调查[J];动物医学进展;2001年01期
5 舒展,魏润生,韩庆彦,高生智,陈轶霞,杨小玲;甘肃省集约化养猪场细小病毒病血清学检测[J];动物医学进展;2001年04期
6 刘正飞,陈焕春,琚春梅,曹胜波;猪圆环病毒研究进展[J];动物医学进展;2002年02期
7 王忠田,杨汉春,吕艳丽;猪圆环病毒II型ORF2基因的克隆及序列分析[J];动物医学进展;2003年01期
8 汤海平,陈祝茗,许中山;漳州市猪圆环病毒病血清学初步调查[J];福建畜牧兽医;2003年S1期
9 张雅丽,杨国庆,郭英,陈永福;密码子优化的牛精蛋白基因在大肠杆菌中的表达[J];高技术通讯;2002年04期
10 杨汉春;猪免疫抑制性疾病的流行特点与控制对策[J];中国畜牧兽医;2004年05期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 董和平;李辉;李化东;吴志明;;河南省猪场PRRS血清流行病学调查[J];河南农业科学;2009年08期
2 赵忠荣;刘增再;李芬;刘毅;;长沙县规模化猪场繁殖与呼吸障碍综合症的血清学调查[J];湖南畜牧兽医;2006年03期
3 朱骏;曹向英;沈林辉;彭笑蓉;张慧英;孙文梅;;上海市松江区猪圆环病毒Ⅱ型感染的血清学调查[J];福建畜牧兽医;2006年01期
4 宋建国;康文彪;赵春玲;魏润生;韩庆彦;;甘肃省猪流感抗体的血清学调查[J];动物医学进展;2006年09期
5 吴俊;朱玲;易悦;石恬;;四川省部分猪场PCV-2感染的血清学调查[J];黑龙江畜牧兽医;2010年17期
6 贺晓龙;韩志辉;;青海省牛传染性鼻气管炎血清学调查[J];青海大学学报(自然科学版);2009年01期
7 邢建民;王谢忠;傅义娟;;规模化猪场猪伪狂犬病的血清学调查[J];中国畜牧兽医;2009年12期
8 黄良保;刘烈发;万阶南;;江西省部分规模种猪场猪伪狂犬病血清学调查报告[J];江西畜牧兽医杂志;2011年02期
9 黄志坚;刘赛琴;张占春;陈小丽;;三明市部分地区猪Ⅱ型圆环病毒病的血清学调查[J];福建畜牧兽医;2007年04期
10 张莉;李全录;孙淑清;王昀丹;;外埠进京生猪圆环病毒感染血清学调查与分析[J];畜牧与兽医;2006年10期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 代丽;单安山;孙进华;尹佳佳;李远见;;重组鸡细胞因子的克隆表达及表达产物抗热应激活性[A];第六次全国饲料营养学术研讨会论文集[C];2010年
2 牟航;夏勇;吴学强;朴龙斗;孟凡国;周海梦;;耐热无机焦磷酸酶的表达纯化与性质研究[A];第九届全国酶学学术讨论会暨邹承鲁诞辰85周年纪念会论文摘要集[C];2008年
3 苏锐;张映;苏国东;彭勋;邵国青;;猪肺炎支原体P97基因的克隆表达与活性鉴定[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立20周年庆典暨第十次学术研讨会论文集(上)[C];2003年
4 罗何峰;王劫;苟钟勇;蒋思文;彭健;;产肠毒素大肠杆菌987P菌毛fasG亚单位的优化表达[A];中国畜牧兽医学会动物营养学分会第十次学术研讨会论文集[C];2008年
5 贾爱卿;李春玲;王贵平;何永龙;袁子彦;;副猪嗜血杆菌OmpP2基因的克隆表达及间接ELISA抗体检测方法的建立[A];中国畜牧兽医学会生物制品学分会中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2010年学术年会(第三届中国兽药大会学术论坛)论文集[C];2010年
6 张宁;高宏雷;高玉龙;王笑梅;;传染性法氏囊病病毒非结构蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备[A];提高全民科学素质、建设创新型国家——2006中国科协年会论文集[C];2006年
7 魏锦;袁国华;周京国;杨明辉;;可溶性趋化因子受体CCR5在类风湿关节炎患者中的测定及意义[A];第十届全国风湿病学学术会议论文集[C];2005年
8 周芳;王健民;李杨秋;章卫平;宋献民;冯曹波;杨建民;高磊;李红梅;;异基因外周血造血干细胞移植后cGVHD患者TCRVβ亚家族克隆表达[A];第10届全国实验血液学会议论文摘要汇编[C];2005年
9 屈勇刚;朱启;杨志军;王东;王远志;万康林;;新疆地区牛羊莱姆病血清流行病学调查[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届理事会第二次会议暨教学专业委员会第六届代表大会论文集[C];2006年
10 袁力勇;饶春明;王军志;;重组人纽兰格林体外生物学活性测定方法的研究[A];全面建设小康社会:中国科技工作者的历史责任——中国科协2003年学术年会论文集(上)[C];2003年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 记者  吴天飞;哈市开展乙肝血清学调查[N];哈尔滨日报;2006年
2 蒲昭和;艾滋病是如何传播到美国的[N];四川科技报;2000年
3 胡文华;我国内地现有慢性乙肝病人2000万例[N];中国医药报;2006年
4 高彦生;OIE疫情专递[N];中国畜牧兽医报;2005年
5 记者 张淑会;全省启动乙肝血清学入户调查[N];河北日报;2006年
6 本报见习记者  张宇;北京万泰生物药业:为生命护航[N];经理日报;2006年
7 俞渊;宠物与人相通的寄生虫病[N];大众科技报;2008年
8 本报记者 宋菁;广州墨西哥客商流感样本已经递送中国CDC[N];21世纪经济报道;2009年
9 纪增;急性猪流感[N];中国畜牧兽医报;2005年
10 本报记者 崔京华;北京规范动物传染病诊断技术[N];农民日报;2003年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 杨增岐;断奶仔猪多系统衰竭综合征的研究[D];西北农林科技大学;2007年
2 祝卫国;猪圆环病毒2型(PCV2)的研究[D];西北农林科技大学;2008年
3 琚春梅;猪2型圆环病毒ELISA诊断方法及猪2型圆环病毒-伪狂犬病病毒二价基因工程疫苗研究[D];华中农业大学;2005年
4 刘淑英;绵羊肺腺瘤病毒NM株基因组全序列的研究[D];内蒙古农业大学;2004年
5 王晓杰;重组人角质细胞生长因子-2克隆表达及其对角膜损伤修复机制研究[D];吉林大学;2010年
6 盖新娜;猪脑心肌炎病毒VP1基因的原核表达、血清学调查及分离毒株的鉴定[D];中国农业大学;2005年
7 杨楠;色素上皮细胞衍生因子的实验研究[D];吉林大学;2005年
8 李春丽;人β防御素3和植物甜蛋白des-pGlu1-Brazzein基因的重组表达研究[D];浙江大学;2005年
9 谢波;链霉菌催化芳香硝基还原及其关键酶的分离与克隆表达[D];大连理工大学;2010年
10 何竞;肝癌复合表位抗原的免疫原性研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 张鹏飞;内蒙古地区牛传染性鼻气管炎病毒的分离与鉴定[D];内蒙古农业大学;2007年
2 向大育;武陵山区猪圆环病毒病流行病学调查[D];华中农业大学;2006年
3 石云杰;鼠抗人B7-1功能性单克隆抗体的研制及应用研究[D];苏州大学;2006年
4 王敏;YKL-40在上皮性卵巢癌患者血清和组织中的表达及临床意义[D];中南大学;2009年
5 孙嗣梅;蓖麻毒素A链及其突变体的表达、纯化和分析[D];中国人民解放军军事医学科学院;2005年
6 王志宇;轮状病毒检测技术研究[D];山东大学;2005年
7 张立成;AEV结构蛋白基因的克隆、序列分析及在大肠杆菌中的表达[D];西北农林科技大学;2003年
8 胡蕾;颞下颌关节紊乱病关节液中尿激酶型纤溶酶原激活物及其受体的检测[D];四川大学;2007年
9 李小飞;拟态弧菌外膜蛋白OmpU基因的克隆表达及其免疫保护性研究[D];安徽农业大学;2007年
10 万孝玲;弓形虫表面抗原SAG4基因的克隆、表达及鉴定[D];广西医科大学;2008年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026