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《西北农林科技大学》 2009年
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原生质体融合提高放线菌对枯、黄萎病的防治作用

宋春  
【摘要】: 植物枯、黄萎病是当前病害防治的一大难题,直接利用从自然界中分离筛选出的放线菌对其进行生物防治,效果并不理想,因此需要对这些放线菌进行人工改良。目前放线菌的原生质体融合主要是普通放线菌之间的融合,而本研究基于植物内生放线菌在植物中定殖可增强寄主抗病性和提高植物生长速度等优点,将内生放线菌SG2与具有较强拮抗作用的生防放线菌SC11进行融合,测定了融合菌株对尖镰孢西瓜专化型和大丽轮枝菌的抑菌效果,以期得到综合亲本优良性状的新型高效生防菌株。 根据已获得的融合条件将两亲本进行融合,共获得18株与双亲培养特征不同、遗传性状稳定的融合菌株。通过对尖镰孢西瓜专化型和大丽轮枝菌的皿内抑菌活性测定进行融合菌株复筛,共获得8株对靶标病原真菌抑制率超过70%的融合菌株。其中,菌株G-C12和G-C8表现突出,对2种靶标真菌抑制率均超过75%。 对于初筛获得的融合菌株,本研究又做了如下相关检测: 通过融合菌株发酵液及发酵滤液对靶标菌的皿内抑菌作用测定,结果发现,8株融合菌株的发酵液对2种靶标菌均有一定抑制作用,但多数融合菌株的发酵滤液对其无抑制作用,少数虽有抑制作用,但抑菌圈直径也小于亲本SC11。说明入选融合菌株分泌物的量基本上都有所降低,有些甚至已经丧失了此性状。 通过对融合菌株的培养特征、发酵特征、生长速率、产孢量和菌丝生长量、生理生化特性、内生性和产多胺能力测定等试验,发现融合菌株与其亲本菌株既有相同点,又存在差,说明这些融合菌株在继承其亲本性状的基础上,又产生了一些新的性状。而利用16SrDNA PCR-RFLP法检测融合菌株,产生的酶切图谱中有与亲本菌株相同的条带,可见,融合菌株的遗传物质部分来自于其中一亲本。除此之外,融合菌株还产生了一些新的条带,这可能是两亲本遗传物质重组的结果。 通过对西瓜和茄子苗期生长的影响及对西瓜枯萎和茄子黄萎病防效的测定发现,有些融合菌株对两种植物苗期生长具有明显的促生作用,且对两病害的防效介于两亲本之间,有些则超过了亲本,如G-C8和G-C18。说明融合菌株继承了亲本SC11高防效的特性,并在此基础上将其更加优化。 总之,本研究利用原生质体融合技术,将普通生防放线菌与植物内生放线菌成功地进行了融合,并在此基础上,首次将其应用于植物枯、黄萎病的防治,为原生质体融合及土传病害的生物防治,特别是植物枯、黄萎病的防治提供了新途径、新思路。
【学位授予单位】:西北农林科技大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:S476~.9

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