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《西北农林科技大学》 2010年
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甘蓝型油菜细胞质雄性不育系212A恢复基因的分子标记及其杂种纯度鉴定研究

白红涛  
【摘要】: 杂种优势具有强大的增产潜力,被视作增加粮食产量、改善作物品质的重要途径。油菜是杂种优势明显的作物,我国在油菜杂种优势利用方面取得了被国际上认可的成就。通过“三系”法、“两系”法选育出的杂交种已大面积推广种植。其中,培育优良的恢复系是杂交育种的一项重要工作。杂种优势的体现很大程度上取决于恢复系恢复能力的强弱。与育性恢复基因连锁的分子标记的获得,可以在苗期鉴定恢复株是否含有目的基因,大大缩短了选育时间,加速了育种进程。 杂交种在产量和品质方面均优于常规种。杂交种纯度的高低影响其优势的发挥。目前我国生产上用于杂交制种使用的细胞质雄性不育系多数不育性不彻底,低温或高温条件下分化的雄蕊易形成微量花粉,导致自交产生不育的假杂种。因此在油菜杂交种应用于生产之前,有必要对其纯度进行鉴定。 本研究所用材料212A、1521C和1102C均是由西北农林科技大学油菜育种课题组自行选育而成,不育系212A与陕2A可能具有相同的恢保关系。以212A与1521C的杂交F2群体构建作图群体,采用集团分析分离法(BSA),利用RAPD、SRAP分子标记技术筛选与育性恢复基因连锁的分子标记。并用SRAP分子标记技术对212A与1102C的子一代杂交种陕油8号纯度进行鉴定,为快速鉴定杂种纯度提供技术依据。主要结果如下: 1通过对212A与1521C的F2群体的田间育性调查发现,144株中可育单株115株,不育单株29株,卡平方测验,符合3:1的分离比,说明212A的育性恢复由一对显性核基因控制。 2从690条10-mer的RAPD引物中筛选到一个与育性恢复基因连锁的一个标记:OPS11-850;270对SRAP引物中筛选到一个与育性恢复基因连锁的标记:M17E13-150。它们位于恢复基因的同一侧,遗传图距分别是:13.1cM和17.3cM。 3将RAPD特异片段OPS11-850回收、克隆和测序。根据测序结果,利用Primer5.0设计6对20-24个碱基的特异引物,特异性扩增后没有呈现原RAPD引物的多态性,说明此标记不能直接转成SCAR标记。 4用196对SRAP引物对杂种陕油8号及其父母本扩增,筛选出5对偏父本的引物组合、2对偏母本引物组合、1对互补引物组合。用互补型引物组合对杂种纯度进行鉴定,结果为88.7%,低于大田鉴定结果91.3%。
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