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《西北农林科技大学》 2010年
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黑核桃内生真菌HJ_1发酵产物化感作用的研究

黄湘海  
【摘要】: 本文以从黑核桃中分离得到的21种内生真菌为研究对象,以小麦种子和油菜种子为活性试验材料,对21种黑核桃内生真菌发酵液进行活性测定。结果表明:21种黑核桃内生真菌发酵液对2种供试受体种子幼苗的生长均有不同程度的抑制作用,并且对受体种子幼根生长的抑制作用均大于对幼芽生长的抑制作用。其中HJ1、HJ2、HJ9、HJ10等14种内生真菌发酵液的化感作用较好,HJ1对受体种子的抑制作用均达到92%以上,化感效果最好。HJ1对2种受体种子发芽率的影响也最大,小麦种子和油菜种子的对照发芽率均为为100%。用HJ1发酵液处理的小麦和油菜种子发芽率分别为18.8%、33.3%。因此把内生真菌HJ1作为试验研究对象,研究其化感作用。 黑核桃内生真菌HJ1发酵液热稳定性的测试结果显示:随着温度的升高,发酵液对受体种子幼苗生长的抑制作用降低,活性成分在70~C以下具有较好的热稳定性。 对黑核桃内生真菌HJ1进行大量发酵,以小麦、油菜、绿豆、萝卜4种受体种子为试验材料,对其发酵液和菌丝萃取物进行化感作用活性测定。结果表明:HJ1发酵液和菌丝萃取物对4种受体种子均有不同程度的抑制作用。在浓度50mg·mL-1时,乙酸乙酯相对油菜幼根和幼芽的抑制率均在90%以上,化感作用最好;正丁醇相次之,萃余水相效果最差。各萃取相对绿豆幼苗生长的抑制作用均在50%以下。这说明HJ1发酵产物中化感物质主要集中在乙酸乙酯相,确定HJ1发酵产物乙酸乙酯相作为下一步研究的对象。 HJ1发酵产物乙酸乙酯萃取物的不同浓度对受体种子幼苗生长也有不同程度的抑制效果,对同一受体而言,随着乙酸乙酯萃取物浓度的降低其抑制作用减弱,在浓度为6.25 mg·mL-1时对油菜幼苗生长表现出一定的促进作用。对不同受体而言,相同浓度乙酸乙酯萃取物的抑制作用也存在着差异,抑制作用大小顺序为:油菜小麦萝卜。 提取得HJ1乙酸乙酯萃取物30.18g,在活性跟踪的指导下,采用硅胶柱层析,sephadex LH-20柱层析和重结晶等手段对活性成分进行分离,得到3个单体化合物。通过理化性质分析和NMR分析,最终确定其中2个化合物为mollicelin K和mollicelin B。化合物3对小麦幼苗生长的抑制作用最好,化合物1和化合物2对小麦幼苗生长的抑制作用接近。
【学位授予单位】:西北农林科技大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:Q93;S664.1

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【参考文献】
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