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《陕西中医药大学》 2019年
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益脾养肝方对肝癌前病变模型大鼠病理形态及TGF-β1、Smad3蛋白的影响

焦俊喆  
【摘要】:目的:研究益脾养肝方(YPYGF)对二乙基亚硝胺(DEN)诱导的大鼠肝癌前病变模型及TGF-β1及Smad3蛋白表达的影响,探索肝癌前病变的中医药防治疗法。方法:SPF级雄性Wister大鼠100只,适应性喂养1周后进入实验,随机分为空白组、模型组、YPYGF大剂量组、YPYGF小剂量组及护肝片组。采用腹腔注射DEN建立肝癌前病变大鼠模型,1次/d,YPYGF大剂量组以1.0g/ml,10ml/kg的YPYGF灌胃,1次/d;YPYGF小剂量组以0.5g/ml,10ml/kg灌胃,1次/d;护肝片组按921mg/kg大鼠体重灌胃,1次/d;连续给药至16周,于16周灌胃后24h处死大鼠,处死前观察大鼠一般状况,处死后进行心脏采血,取出肝脏组织,进行肝功能指标ALT、AST、GGT、ALP及TBIL检测,进行苏木精-伊红(HE染色)观察肝脏病理改变,Masson染色观察肝纤维化程度,免疫组化法检测TGF-β1、Smad3蛋白的表达情况。结果:1.益脾养肝方可改善DEN造模肝癌前病变大鼠的一般情况,其中YPYGF大剂量组一般状态较好,小剂量组与护肝片组大鼠一般状态无明显差异,均差于大剂量组大鼠表现。2.YPYGF对DEN诱导的肝癌前病变大鼠肝功能具有明显的改善作用:与空白组比较,模型组大鼠的ALT、AST、GGT、ALP、TBIL均升高明显,肝功能显著下降;与模型组相比,YPYGF大、小剂量组及护肝片组的ALT、AST、GGT、ALP、TBIL均明显降低,肝功能有所改善,其中YPYGF大剂量组较小剂量组及护肝片组效果更佳(P0.05)。3.益脾养肝方可改善肝癌前病变大鼠的病理形态及纤维化形成:YPYGF大剂量组较其他组对于改善DEN造模的肝癌前病变大鼠病理形态疗效更加显著,可明显减少肝脏结节的产生,减轻肝脏损伤。Masson染色可见YPYGF大剂量组明显减轻纤维组织增生,明显优于其他各组。4.空白组大鼠肝组织可见少量肝细胞呈阳性表达。模型组TGF-β1和Smad3蛋白均呈高表达,主要见于癌前病变组织和周围组织,表现细胞核深染。而YPYGF大、小剂量组及护肝片组均能抑制TGF-β1和Smad3的表达,大剂量组效果最佳(P0.05)。结论:1.益脾养肝方可明显改善DEN诱发肝癌癌前病变模型大鼠的肝功能,具有保肝作用;2.益脾养肝方对肝癌前病变大鼠病理组织形态有一定的影响,增生细胞异型性显著变小,双核细胞减少,并且炎症情况较轻,大剂量组效果更佳;3.益脾养肝方可改善肝癌前病变组织纤维化程度,大剂量组明显优于小剂量组及护肝片组;4.益脾养肝方对于大鼠肝癌前病变具有延缓作用,其作用可能与抑制TGF-β1和Smad3蛋白表达有关。
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