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《陕西中医药大学》 2019年
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姜黄素对人胰腺癌细胞增殖、凋亡及YAP/TAZ表达的影响

李达  
【摘要】:目的:胰腺癌是消化系统常见的恶性肿瘤之一,其发病率逐年上升。姜黄素(Curcumin)是从姜科植物根茎中提取的主要成分,近年来许多研究证明姜黄素在多种肿瘤细胞,包括人胰腺癌细胞中可以发挥其抗癌的作用。通过文献可知YAP/TAZ基因参与调节器官的发育,且在肝癌、肺癌、乳腺癌等多种人肿瘤细胞中高表达。因此本实验通过研究不同浓度的姜黄素对人胰腺癌细胞系(Patu 8988、MIA Paca-2)生长的影响,以及是否对这两种细胞系中YAP/TAZ的表达产生影响,并初步探讨姜黄素在人胰腺癌中可能的作用机制。方法:1、使用CCK-8法和平板克隆实验检测不同浓度姜黄素对人胰腺癌细胞系增殖抑制及克隆形成能力的影响。2、通过流式细胞术PI染色法检测不同浓度姜黄素作用下对胰腺癌细胞系凋亡的影响并在显微镜下观察细胞形态的变化。3、通过划痕试验检测不同浓度姜黄素对两种细胞迁移能力的改变。4、通过蛋白免疫印迹法检测姜黄素处理两种细胞48h后细胞中YAP、TAZ表达的影响。结果:1、CCK-8法结果表明,姜黄素对人胰腺癌细胞的增殖有明显的抑制作用,且该作用具有一定的药物浓度依赖性;平板克隆实验结果表明,姜黄素处理组与对照组相比,细胞克隆形成能力下降,增殖受到明显的抑制,具有药物浓度依赖性。2、流式细胞术PI染色法显示姜黄素能够诱导细胞凋亡,其作用随着药物浓度增加而增强;镜下可观察到姜黄素可引起细胞形态改变且其改变程度与药物浓度成正比。3、划痕实验结果表明,不同浓度的姜黄素抑制了胰腺癌细胞系的迁移能力;且随着药物浓度的增加其抑制的作用随之增强。4、蛋白免疫印迹法结果显示,姜黄素对人胰腺癌细胞系中YAP、TAZ蛋白表达的有明显的抑制作用。结论:姜黄素可以抑制人胰腺癌Patu8988、MIA Paca-2的增殖,降低克隆形成能力,并促进其凋亡,抑制细胞迁移能力,且与姜黄素的浓度呈一定的剂量依赖关系;其机制可能与下调细胞中YAP、TAZ基因表达相关。
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