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《陕西师范大学》 2012年
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绞股蓝蛋白质、氨基酸含量测定及其相关性分析

梁晓庆  
【摘要】:绞股蓝Gynostemma pentaphllum(Thunb.)Makino系葫芦科Cucurbitaceae绞股蓝属Gynostemma多年生草质藤本植物,全草均可入药。 本实验选用绞股蓝为材料,优化了超声波法提取绞股蓝水溶性蛋白的工艺,考察了不同器官总蛋白及总氨酸的含量,研究不同产地绞股蓝总蛋白、水溶性蛋白、总氨基酸及水溶性蛋白氨基酸的含量,并进行相关性分析。主要研究结果如下: 1.采用凯氏定氮法对六省份绞股蓝总蛋白含量及不同部位总蛋白含量进行测定,17个样品总蛋白含量以四川省样品SC.2最高0.238g/g,贵州省锦屏样品JP含量最低0.102g/g,总蛋白的平均含量为0.180g/g,百分比为18.03%。六省中,湖南省绞股蓝总蛋白含量最高,为19.88%。安康平利绞股蓝各部位总蛋白含量高低依次为种子叶根茎根茎,且各部位总蛋白含量具有显著性差异。 2.以提取温度、提取时间、提取功率、料液比及提取次数为优化因素,研究了绞股蓝水溶性蛋白超声法提取工艺,得到最佳提取条件:提取温度30℃,料液比1:30,提取时间6min,功率360W,提取次数为三次。比较等电点沉淀、乙醇沉淀、硫酸铵沉淀法初步纯化绞股蓝水溶性蛋白的效果,结果表明硫酸铵沉淀法最优,蛋白析出率最高,为74.8%,且得到的蛋白活性较高,复溶性良好。 3.收集六省17样品,对绞股蓝水溶性蛋白的含量进行测定,水溶性蛋白含量最高的和最低的均为陕西省的样品。对于不同省份,湖北省绞股蓝水溶性蛋白含量最高,为27.89mg/g,湖南省最低,仅11.01mg/g,各省水溶性蛋白含量差异不显著。不同产地绞股蓝总蛋白和水溶性蛋白含量相关性不显著,r=0.930。 4.对绞股蓝总氨基酸、水溶性蛋白氨基酸含量进行测定、分析,并对绞股蓝各氨基酸之间及各氨基酸与蛋白质之间的相关性进行统计学分析。结果如下 (1)六省15个样品,大多数含有7种必需氨基酸,总氨基酸(TAA)和必需氨基酸(EAA)含量最高的均为云南省样品YN.3,分别达到236.34mg/g和92.53mg/g,四川省样品SC.1总氨酸和必需氨基酸含量均为最低,仅有52.79mg/g和11.01mg/g。云南省样品YN.3有15种氨基酸含量最高(Cys、Lys两种氨基酸除外);四川省样品SC.1除Cys、Tyr外,其余各氨基酸的含量均为最低。17种氨基酸,Ala含量最高,平均为15.95mg/g,必需氨基酸中,Phe平均含量最高,为12.24mg/g。对绞股蓝各氨基酸之间及各氨基酸与总蛋白的相关性进行分析,绞股蓝各氨基酸之间大多数都呈极显著正相关,而蛋白质和各氨基酸之间相关性不显著。 (2)对绞股蓝不同部位总氨基酸的含量进行测定,除根状茎未检测到Met外,其余各部位均有7种必须氨基酸。各部位总氨基酸和必需氨基酸含量由高到低依次是叶种子根状茎茎根,叶中必需氨基酸含量是茎中的3倍多。叶片中绝大多数氨基酸含量最高,而根中含量为最低。在各氨基酸中,Glu的平均含量最高,达18.97mg/g,必需氨基酸Phe含量最高,为12.61mg/g。采用氨基酸比值系数法,计算氨基酸的RAA、RC及SRC值,并结合EAA/NEAA、EAA/TAA所得的结果,绞股蓝叶片的营养价值较其他部位要高。对绞股蓝各氨基酸之间及各氨基酸与蛋白质的相关性进行分析,大多数氨基酸之间都呈显著正相关,Ser、Glu、Gly、Val、 Tyr、Phe和Arg7种氨基酸与各部位蛋白含量呈显著正相关。 (3)六省15样品的绞股蓝水溶蛋白氨基酸含量,云南省样品YN.2的总氨基酸和必需氨基酸含量均为最高,四川省样品SC.2的总氨基酸和必需氨基酸含量均为最低。17种氨基酸,大多数以云南省样品YN.2中含量最高,YN.3为最低。Cys含量均值最大,高达127.27mg/g,必需氨基酸Val平均含量最高,49.05mg/g。绞股蓝水溶性蛋白氨基酸的SRC值偏低,其水溶性蛋白的营养价值有限。但Met+Cys、Phe+Tyr含量较高,均为WHO/FAO推荐模式相应的氨基酸值的1-4倍。绝大多数绞股蓝水溶性蛋白各氨基酸之间为极显著正相关,仅有Cys与各氨基酸呈负相关,水溶性蛋白与水溶性蛋白各氨基酸之间相关性不显著。总氨基酸和水溶性蛋白氨基酸相关性不显著。
【学位授予单位】:陕西师范大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2012
【分类号】:S567.237

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