收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

拟黑多刺蚁hsp90基因的克隆与mRNA水平表达及其对发育影响的研究

薛立娟  
【摘要】:热激蛋白(Heat Stress Proteins, HSPs)又称热休克蛋白(Heat Shock Protein, HSPs),是机体受到外界的一些环境条件刺激如:氧气缺乏、温度过高或过低、缺乏食物、受到伤害、环境污染等而产生的一类蛋白质,该类蛋白质可使生物体受到的损伤降到最小程度。HSP90是热激蛋白中分布最广泛的一类蛋白,对多种蛋白的空间结构起着调控作用。 拟黑多刺蚁(Polyrhachis vicina Roger)营群居生活,是昆虫纲、多刺蚁属的一种,因为其特殊的生活环境,有着特殊的药用价值。拟黑多刺蚁群体存在严格的品级分化,其行为复杂,是进行昆虫个体发育及其分化方面研究的良好材料。本实验选取拟黑多刺蚁为材料,结合RT-PCR技术和RACE技术,扩增了hsp90基因cDNA全长序列,并运用生物信息学方法分析其基因序列和编码的蛋白质序列,运用荧光实时定量技术研究其基因在拟黑多刺蚁不同品级和不同发育阶段虫体中mRNA水平的表达情况。主要实验结果如下: 1.获得的拟黑多刺蚁hsp90基因的cDNA序列全长为2325bp,其开放阅读框长为2133bp,编码711个氨基酸,5’非编码区长度为129bp,3’非编码区长度为63bp。将其命名为Pvhsp90,上传至美国国立生物技术信息中心(NCBI)GenBank数据库,获得的序列号为JN100104.1。 2.生物信息学分析Pvhsp90的氨基酸序列和蛋白质序列。同源性分析表明Pvhsp90编码的蛋白序列与数据库中其它生物的HSP蛋白相似性很高,均在95%以上。系统进化分析表明该蛋白保守性较高,属于ATP酶超家族。一级结构分析显示相对分子量为82009.8Da,理论等电点pI为5.41,碱性氨基酸(Arg+Lys)共有118个,酸性氨基酸(Asp+Glu)共有139个,分子式为C6289H10440N2134025768471。理化性质分析显示没有O型糖基化修饰位点;有3个N型糖基化位点;有17个丝氨酸的磷酸化位点,苏氨酸和酪氨酸的磷酸化位点分别是9个和7个:是亲水蛋白,没有信号肽序列,属于非分泌型蛋白。二级结构分析表明,该蛋白是混合型蛋白;三级结构分析结果显示与该蛋白序列最匹配的模板是3ekoA,最佳比对区域位于PvHSP蛋白序列的第16-205位氨基酸残基,序列一致性达83.684%,e值为8.10e-86。 3.实时荧光定量结果显示,在拟黑多刺蚁的各个时期hsp90基因均有表达,但mRNA表达水平有差异。在幼虫期从二龄幼虫到蛹,表达量有下降趋势,一龄幼虫表达量最低,而成虫表达量明显升高。成虫中雌蚁的表达量最高,显著高于工蚁和雄蚁,这可能与雌蚁的产卵繁殖功能及其产卵后脱翅行为有关,但具体的原因还有待于进一步研究。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 兰风华,徐铃,赵雨田;对大鼠肝mRNP的研究[J];中国生物化学与分子生物学报;1992年04期
2 毛立群,吴乃虎;RACE——低丰度mRNA的cDNA末端快速扩增[J];高科技与产业化;1996年03期
3 李文雍;陈清轩;;mRNA差异显示技术研究进展[J];农业生物技术学报;2004年05期
4 蔡亚非,杜娟,张利军,李莲,刘庆华,周磊,杨媛媛,王根林;热应激奶牛外周血淋巴细胞凋亡相关基因表达及血液学分析[J];动物学报;2005年02期
5 薄爱华,戴洁,李曙光,左东升,陈秀玲,杨燕君,苏华,白丽娜,张晓丽,邢立强;HSP90 mRNA在胃癌和大肠癌中表达的研究[J];中国组织化学与细胞化学杂志;2005年02期
6 唐红星;羊小海;王柯敏;谭蔚泓;李伟;;硫代修饰分子信标用于活细胞内mRNA的检测[J];科学通报;2008年17期
7 林盛国;张嵘;王家庆;;RNA干扰技术及应用[J];现代检验医学杂志;2008年04期
8 梁婧;黄朴;傅文宇;徐立红;;微囊藻毒素LR对人FL和HL7702细胞PP2A各亚基转录水平的影响[J];癌变.畸变.突变;2009年06期
9 郭晓农;;胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞中脂联素mRNA表达的研究[J];西北民族大学学报(自然科学版);2010年01期
10 巫爱珍,戴仁鸣,沈学仁,孙玉昆;[~3H-甲基]-甲硫氨酸可以作为体外合成家蚕细胞质多角体病毒mRNA 5′-端的甲基供体[J];中国科学A辑;1981年11期
11 陈吉龙,张玉廉,张葆英,牛满江;外源CAT mRNA在金鱼卵各发育阶段中的功能[J];科学通报;1994年22期
12 郭秀林;张正斌;李景娟;李广敏;;cDNA-AFLP技术在植物抗逆性相关基因表达研究中的应用[J];西北农林科技大学学报(自然科学版);2006年11期
13 伍林涛;阮颖;彭琦;张源;刘春林;;RNAi技术及其应用[J];生物技术通报;2007年04期
14 付月玲;陈素华;冯玲;郑翠;;巨细胞病毒对乳鼠海马神经元NMDA受体NR1亚基表达水平的影响[J];中国实用妇科与产科杂志;2010年07期
15 吴石君,李士谔,张海澜,罗坚,于跃;CPS_1 cDNA克隆及大鼠肝癌癌变过程中CPS_1 mRNA量的变化[J];中国科学B辑;1987年05期
16 张同海,宋诗铎,李立津,祁伟,胡文芝,王培福,陈昆明,方佩华;牛泌乳素mRNA的分离及鉴定[J];遗传学报;1992年05期
17 沈虹,李逸平,左嘉客;母型mRNAs及其功能[J];细胞生物学杂志;1996年01期
18 安建平;编辑——一种新的RNA加工方式[J];天水师范学院学报;1997年03期
19 申景平,张淑萍;超越基因组:蛋白质组计划[J];国外科技动态;2001年01期
20 毛建平,王全会,施水兰,袁国刚,左刚,崔玉芳,毛秉智;绿色荧光蛋白基因mRNA反义寡核苷酸的筛选和应用[J];中国生物化学与分子生物学报;2005年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 江远;张玲;何金洋;聂广;;铁沉积于巨噬细胞对转化生长因子-β1、诱导型一氧化氮合酶、肿瘤坏死因子-αmRNA表达的影响[A];广东省肝脏病学会临床药学专业委员会成立暨肝病药物合理应用报告会论文集[C];2011年
2 罗素菊;彭振辉;郑焱;张路坤;曹振平;王国荣;;NB-UVB和阿维A对角质形成细胞肝素结合表皮生长因子样生长因子mRNA的影响[A];2010全国中西医结合皮肤性病学术会议论文汇编[C];2010年
3 胡成进;杨道理;舒小双;;AFP mRNA与原发性肝细胞癌血液播散的实验研究[A];山东免疫学会、山东微生物学会医学微生物学专业委员会、山东省医学会微生物学和免疫学专业委员会、山东省医药生物技术学会2001年学术年会论文汇编[C];2001年
4 赵倩;周勇;王奕;高清歌;陈建杨;姜晓艳;;缝隙连接蛋白43及26 mRNA在自身免疫性甲状腺疾病患者甲状腺组织中的表达[A];中华医学会第十次全国内分泌学学术会议论文汇编[C];2011年
5 胡荣;杨莹;李佳;苗苗;朱珂;杨威;刘卓刚;;Embelin通过抑制NF-κB降低HL-60细胞MMP-9 mRNA及VEGF表达[A];第13届全国实验血液学会议论文摘要[C];2011年
6 董红宇;徐连那;;小剂量糖皮质激素对类风湿关节炎患者维生素D受体mRNA的影响[A];中华医学会第六次全国骨质疏松和骨矿盐疾病学术会议暨中华医学会骨质疏松和骨矿盐疾病分会成立十周年论文汇编[C];2011年
7 张颖丽;姜新朋;李博;;变形链球菌介导牙髓成纤维细胞基质金属蛋白酶-8 mRNA的表达及意义[A];全国第三次牙体牙髓病学临床技术研讨会论文汇编[C];2009年
8 王忠伟;杨焕民;郭景茹;王建发;郭爽;臧琳;;籽鹅组织mRNA分析中内参基因的选择[A];全国动物生理生化第十一次学术交流会论文摘要汇编[C];2010年
9 王修启;曾佩玲;黎相广;王丽娜;姜伟;;鸡胚肠道中性氨基酸转运载体蛋白mRNA表达的品种差异和发育性变化[A];全国动物生理生化第十一次学术交流会论文摘要汇编[C];2010年
10 张春林;王加启;胡小丽;赵圣国;章玉涛;卜登攀;周凌云;;体外激素处理对奶牛乳腺上皮细胞FcRn mRNA表达的影响[A];第六次全国饲料营养学术研讨会论文集[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 宋成义;若干猪精子功能基因克隆及其mRNA在生殖道和成熟精子中的表达特性研究[D];扬州大学;2010年
2 王秒;P2Y受体介导大鼠胃体环行肌收缩反应及相关受体亚型mRNA和受体蛋白的表达[D];河北医科大学;2010年
3 唐伟;针刺预处理对全脑缺血大鼠脑保护机制的实验研究[D];黑龙江中医药大学;2004年
4 樊慧杰;大鼠急性心肌缺血心脏和背根神经节差异蛋白质组学和mRNA研究[D];山西医科大学;2011年
5 李恒;人源CFI_m复合物识别pre-mRNA的分子机制及酵母Pub1蛋白结构的生物学研究[D];中国科学技术大学;2010年
6 孙士鹏;内含HIV-1 gag编码mRNA的MS2病毒样颗粒构建及体外表达和体内免疫应答研究[D];北京协和医学院;2011年
7 姜浩;青藤碱对大鼠DR中NF-κB及部分促炎因子mRNA表达影响的实验研究[D];天津医科大学;2010年
8 张久丽;鸡SelN的体内分布及硒对其在肌组织中转录的调控[D];东北农业大学;2010年
9 刘丽艳;CYP1A1与PPARα多态性及mRNA水平在酒精性肝病中的研究[D];吉林大学;2011年
10 郭新军;拟黑多刺蚁肌细胞增强因子2与肌钙蛋白Ⅰ亚基基因的克隆及其在发育中的表达研究[D];陕西师范大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 范东芬;拟黑多刺蚁acetylcholinesterase基因的克隆mRNA水平表达及其与发育相关性研究[D];陕西师范大学;2011年
2 张武会;拟黑多刺蚁多巴胺转运体基因的克隆和mRNA水平表达与发育相关性研究[D];陕西师范大学;2011年
3 吴静;拟黑多刺蚁homothorax基因的克隆及其在个体发育的mRNA水平表达的定量研究[D];陕西师范大学;2010年
4 卢晓;拟黑多刺蚁extradenticle基因的克隆及其在mRNA水平上的表达研究[D];陕西师范大学;2010年
5 薛立娟;拟黑多刺蚁hsp90基因的克隆与mRNA水平表达及其对发育影响的研究[D];陕西师范大学;2012年
6 梁开丹;拟黑多刺蚁Semaphorin 2a基因mRNA水平的定位和Cathepsin-D基因的克隆研究[D];陕西师范大学;2011年
7 周安韦;嗜卷书虱羧酸酯酶生化毒理学特性及其mRNA表达水平研究[D];西南大学;2010年
8 李希;饲粮硒水平对妊娠Wistar大鼠胰岛素抵抗状态及胰腺7个硒蛋白基因mRNA丰度影响的研究[D];四川农业大学;2010年
9 赖娅莉;蝎毒对锂—匹罗卡品模型大鼠癫痫持续状态的疗效及对海马S-100β mRNA表达的影响[D];泸州医学院;2011年
10 张成大;mRNA定量分析检测Notch信号传导通路在人原发性肝癌组织中的表达[D];河北医科大学;2011年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 本报特约撰稿人 陆志城;mRNA显示技术为抗凝血药开发助力[N];医药经济报;2003年
2 南京金陵蚂蚁研究治疗中心主任 吴志成;谁在纵容蚁力神招摇于世[N];保健时报;2005年
3 本报记者 何屹;你到底打了几份工?[N];科技日报;2010年
4 徐彬;“蚁力神”神在何处[N];江苏经济报;2004年
5 记者 王泽议;我国蚁学研究进入发展阶段[N];中国医药报;2007年
6 本报记者 陈明时 苏宝瑞;人靠竞争成伟业 蚁凭合力铸精神[N];中国乡镇企业报;2005年
7 ;从α5(Ⅳ)链mRNA突变分析看Alport综合征基因型和表型关系[N];中国医药报;2003年
8 匡远深;肝癌复发及转移检测研究有新突破[N];中国医药报;2002年
9 本报记者 陈明时 苏宝瑞;蚁力神树百年品牌 求深度发展[N];中国乡镇企业报;2005年
10 余志平 译;破译癌症的“黑匣子”[N];医药经济报;2002年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978