收藏本站
《陕西师范大学》 2018年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

疾病标志物化学发光小动物成像研究

崔红波  
【摘要】:化学发光成像由于暗场测量的优势,使其公认为灵敏度最高的非侵入式成像技术之一,在基础医学、临床医学和药物研发等研究领域中显现出极高的学术研究价值和应用前景。当前以活体动物为对象的化学发光成像研究,全部集中在对体内活性氧的直接检测和与活性氧代谢调节相关的大分子检测,而直接针对蛋白、核酸等大分子,尤其是疾病标志物的检测尚无相关报道。一方面是医学和药学研究亟需高灵敏的活体研究方法;另一方面是化学发光成像受检测对象所限,无法满足以上需求。超越活性氧,实现对活体中蛋白标志物的靶向性成像检测,意义重大,也极具挑战性。本实验室在前期的化学发光成像研究工作中,研究制备了高效率的化学发光探针5,6-二甲酰肼荧光素。小动物实验表明,该探针能够对体内辣根过氧化物酶(HRP)富集区域实现成像定位和检测。据此,我们设计了一种成像检测蛋白标志物的新思路,即利用目标蛋白抗体实现对蛋白的靶向识别,通过成像检测抗体标记的HRP,进而实现对蛋白标志物的定位和水平检测。如能实现以上思路,有望为活体病理、药理以及疾病诊断提供一种全新的视角和创新技术平台。根据上述研究思路,本论文首先从蛋白标志物入手,实现对肿瘤标志物血管内皮生长因子(VEGF),甲胎蛋白(AFP),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的活体成像检测;随后,以肿瘤标志物血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)为靶标,实现了对小鼠移植瘤的靶向成像;为探究化学发光成像在药理、药效研究中的应用潜质,以炎症为模板,初步实现了地塞米松剂量、给药频率与药效的活体水平表征。以上结果支持了我们的研究思路,创新和拓展了化学发光成像的应用对象和技术方法。本文具体研究内容简述如下:第1章,绪论。本章节对无光源光学成像技术生物发光成像及化学发光成像基本原理,成像探针的种类及应用,近十年生物发光化学发光在成像领域的应用及研究前沿,以及两种成像各自的特点进行了归纳总结评价。第2章,兴趣蛋白的活体成像研究。选取兴趣蛋白VEGF、AFP、TNF-α为靶标,以HRP标记抗体为识别探针,5,6-二甲酰肼荧光素为化学发光成像探针,对裸鼠体内的靶标蛋白成像。在裸鼠皮下注射靶标蛋白,用靶标蛋白对应的抗体-HPR复合物实现靶向识别,实现了活体检测兴趣蛋白的目的。第3章,基于肿瘤蛋白标志物成像的肿瘤靶向。在裸鼠体内实现对兴趣蛋白的灵敏活体检测,极大地鼓舞了我们对蛋白标志物检测的研究热情。本章节中,将对肿瘤蛋白标志物的检测,应用到具体疾病模型中。选取肿瘤细胞膜蛋白标志物VEGFR2作为靶标,以抗VEGFR2-HRP复合物为识别和报告探针,成功靶向了人源结肠癌细胞系HCT-116在裸鼠皮下的移植瘤。第4章,以急性炎症为模型的小动物药效评价。炎症与癌症,心血管疾病,阿兹海默症等重大疾病相关联,影响着人们的身体健康。前期工作中,我们已经实现了对炎症的高效灵敏检测,化学发光成像对炎症表征来说是一个有力工具。为了开发化学发光成像在抗炎药物药效、药理及新药开发方面的潜力,本章节以地塞米松为抗炎药物,以小鼠急性关节炎为疾病模型,对地塞米松给药剂量、给药频率与药效进行活体表征,对比给药前后化学发光信号的变化,实现了通过化学发光成像对抗炎药物药效的活体评价。第5章,对本文的主要工作做了总结,并对今后的工作进行了展望。
【学位授予单位】:陕西师范大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2018
【分类号】:R446; R1;O657.3

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前3条
1 史伯安,王望峰,曾艳,王敏,方文丽;反相流动注射化学发光法测定盐酸小檗碱[J];湖北民族学院学报(自然科学版);2005年03期
2 侯振江,张宗英;血管内皮生长因子及其受体检测在恶性肿瘤诊疗中的应用[J];诊断学理论与实践;2005年01期
3 蒋凯,程渝,吴士明;肿瘤的光动力疗法[J];激光杂志;2004年01期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 刘新燕;赵慧玲;吴云;魏珂;陈子晨;谭丽;战慧敏;;刺血疗法对原发性肝癌大鼠VEGF、TGF-β1的影响[J];针灸临床杂志;2016年05期
2 刘宽浩;刘勇华;庞榕;;基于分子印迹技术的直接电位法测定黄柏中的盐酸小檗碱[J];中国医院药学杂志;2015年13期
3 侯振江;侯建章;;血管内皮生长因子及其受体在食管癌研究中的进展[J];医学综述;2010年17期
4 刘凤莲;谭国柱;陈莉;赵红强;王秀芹;;恶性肿瘤患者糖代谢水平与VEGF的相关性[J];山东医药;2010年19期
5 丁艳蕊;刘建国;张喆;孙勇;;消瘤汤与5-氟尿嘧啶对实验性肝癌大鼠肝脏血管内皮生长因子表达影响的比较研究[J];光明中医;2010年03期
6 李冬;;血管内皮生长因子在肿瘤中的表达及其在肺肿瘤诊治中的临床应用价值[J];中国老年学杂志;2009年12期
7 马振增;燕善军;;原发性肝癌患者介入治疗前后血清胰岛素样生长因子Ⅰ、血管内生长因子和甲胎蛋白的变化[J];实用医学杂志;2009年05期
8 刘刚;陈谦学;吴立权;田道锋;易伟;;5-ALA介导的光动力治疗鼠C6胶质瘤的实验研究[J];中国临床神经外科杂志;2008年09期
9 高社干;魏洛霞;王立东;冯笑山;;肿瘤光动力治疗的研究现状与展望[J];郑州大学学报(医学版);2008年03期
10 郑巍;吴瑷;李怀富;桂西青;;联合p504S、VEGF、p63检测在前列腺良恶性病变鉴别诊断中的应用[J];实用诊断与治疗杂志;2008年05期
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 韩加刚;血管内皮生长因子与大肠癌的研究进展[J];国外医学.外科学分册;2003年04期
2 姚济芬,郑伟,石一复,周彩云;血管内皮生长因子和基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9在子宫颈癌中表达的免疫组化研究[J];中国实验诊断学;2002年02期
3 朱宏斌,郭世伟;肝癌中VEGF及其受体的研究进展[J];医学综述;2002年01期
4 王承龙,赖金平,王行炜,肖健云,赵素萍,田勇泉,徐锡萍;光动力作用诱导人鼻咽癌细胞凋亡超微结构形态改变[J];中华理疗杂志;2001年05期
5 郑世荣,王妍,朱建国,罗芸,缪海珍;基因芯片研究血卟啉单甲醚对人肝癌细胞HEPG2基因表达的影响[J];第二军医大学学报;2001年06期
6 罗荣辉,刘婉华,刁振琦,陈香才,张丽;光动力疗法对肝癌小鼠的抗肿瘤及免疫效应研究[J];应用激光;2001年03期
7 王承龙,赖金平,王行炜,肖健云,赵素萍,田勇泉;光动力疗法对鼻咽癌细胞Bax mRNA表达和凋亡的影响[J];中华物理医学与康复杂志;2001年03期
8 张瑞芳,蔡永葆,黄伟良,朱玉芳,曾艳,萧东,袁胜涛,丁健;胃腺癌的血管内皮细胞生长因子和KDR受体的表达及其临床意义[J];癌症;2001年01期
9 聂峰,何云华,赖普辉;高碘酸钠-过氧化氢-盐酸黄连素化学发光体系的研究[J];分析化学;2000年09期
10 曾超英,黄萍,杨栋,杨善民,陈福;光动力作用对活体肝组织损伤研究[J];中国激光医学杂志;2000年03期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 周镇宇;许林茹;苏彬;;电化学发光成像技术及其在阵列传感分析和潜在指纹成像分析中的应用[J];电化学;2014年06期
2 许林茹;何亚芸;苏彬;;基于鲁米诺电化学发光成像的潜在指纹显现技术[J];化学通报;2014年01期
3 罗丽荣,马利锋,章竹君;化学发光成像分析法定量检测人尿液中β-人绒毛膜促性腺激素[J];分析化学;2005年09期
4 王昌建;;爆轰波反应区结构的数字化学发光成像研究[J];测试技术学报;2007年04期
5 欧阳津,张新荣;化学发光成像技术分析亲血色珠蛋白的类型[J];福州大学学报(自然科学版);1999年S1期
6 田穗康;张琰图;罗丽荣;;化学发光成像分析法检测健康食品中的褪黑激素[J];延安大学学报(自然科学版);2007年04期
7 罗丽荣;章竹君;;化学发光成像分析法检测人血清中的甲胎蛋白[J];分析试验室;2010年S1期
8 曹玮;叶家言;;基于双适体识别化学发光成像技术检测血小板衍生生长因子[J];青岛科技大学学报(自然科学版);2017年03期
9 王高峰;马承飚;王宝源;林其钊;;激波诱导甲烷点火化学反应区的可视化实验研究[J];科学通报;2008年19期
10 刘海峰;王怡峰;郑尊清;尧命发;;不同气道喷油策略下HCCI燃烧过程试验研究[J];内燃机学报;2009年06期
中国重要会议论文全文数据库 前4条
1 欧阳津;熊歆;刘霞;刘佳;王珍珍;陶倩;;聚丙烯酰胺凝胶电泳—直接化学发光成像技术检测血清中的低丰度蛋白质[A];中国分析测试协会科学技术奖发展回顾[C];2015年
2 许林茹;何亚芸;苏彬;;基于鲁米诺电化学发光成像的潜在指纹显现技术[A];公共安全中的化学问题研究进展(第三卷)[C];2013年
3 纪晗旭;严枫;雷建平;鞠愰先;;超灵敏电化学及化学发光成像检测DNA[A];第十一届全国电分析化学会议论文摘要(1)[C];2011年
4 于瑞杰;汪俊军;;化学发光成像免疫分析同时检测ox-Lp(a)、ox-LDL的方法学研究[A];第八届全国医学生物化学与分子生物学第五届全国临床应用生物化学与分子生物学2013华东六省一市生物化学与分子生物学联合学术研讨会论文汇编[C];2013年
中国博士学位论文全文数据库 前5条
1 罗丽荣;化学发光成像分析的研究[D];西南大学;2007年
2 许林茹;电化学发光成像技术在潜在指纹显现与成分识别中的应用[D];浙江大学;2014年
3 陈红军;基于纳米材料的电化学发光和化学发光传感研究[D];湖南大学;2017年
4 宗晨;化学发光及其成像免疫分析新方法研究[D];南京大学;2014年
5 王丽;分子印迹技术结合化学发光成像和荧光光纤传感器的研究[D];陕西师范大学;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前7条
1 崔红波;疾病标志物化学发光小动物成像研究[D];陕西师范大学;2018年
2 周镇宇;基于电化学发光成像技术的化学传感器研究[D];浙江大学;2015年
3 夏文卓;某型电化学分析仪软件设计和系统改进[D];西安电子科技大学;2015年
4 张瑞超;纸微流控芯片电泳-直接化学发光成像技术联用检测人血清蛋白质[D];陕西师范大学;2011年
5 李炜;利用化学发光及共振光散射技术分析DNA及其突变的研究[D];河北大学;2008年
6 于瑞杰;化学发光免疫成像法同时检测血清氧化脂蛋白(a)、低密度脂蛋白方法的建立及临床应用[D];南京大学;2014年
7 杨柳;基于化学发光的化学芯片研究[D];陕西师范大学;2004年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026