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《陕西师范大学》 2018年
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基于PbS纳米粒子簇探针的结肠癌细胞检测方法的研究

董雅男  
【摘要】:结肠癌在世界恶性肿瘤中居于第三位。由于人们生活水平的提高和饮食习惯的改变以及体力活动的减少,结肠癌的发病率不断上升。尽管最近几年现代医疗水平在不断提高,但是结肠癌的死亡率依旧呈现上升趋势,仅次于世界两大癌症(肝癌和肺癌),对人类的健康造成了严重的危害。早期预防和检测是降低人类癌症发病率和死亡率的主要方法。目前,临床上采用的传统手术治疗疗效低,具有一定的副作用,并且易转移。因此,构建一种可以操作简便、成本低廉的检测结肠癌细胞的方法至关重要。磷脂酶是一类通过水解磷脂控制游离脂肪酸水平的酶,其在细胞膜系统中发挥着重要作用。其中磷脂酶C(PLC)可以催化水解磷酸二酯键,生成信使二酰甘油(DAG),以调节生物多样性。磷脂酶C降解磷脂的产物与一些生物过程有关,如消化、炎症反应以及细胞间的信号传导,这些水解反应涉及某些肿瘤细胞的异常胆碱代谢。因此,构建一种用于检测PLC活性的操作简便、成本低廉的方法对于生物医学应用中的临床检测和药物筛选提供了一个新的方向。本论文开展了两个方面的研究,其一是基于印刷铜电极电化学检测Pb2+和结肠癌细胞的研究;其二是利用血糖仪作为检测器和包封葡萄糖的脂质体作为探针,构建一种操作简便、成本低廉的检测PLC活性的新方法。本论文由三部分组成。第1章绪论包括了四部分,第一部分是对结肠癌细胞和磷脂酶及其检测方法进行概述。第二部分介绍了量子点的性质和两亲有序分子组合体(胶束和脂质体)的用途。第三部分综述了电化学生物传感器的发展。第四部分阐明了本论文的选题背景、研究目的和研究内容。第2章基于印刷铜电极电化学检测Pb2+和人类结肠癌细胞系HCT116细胞。首先,利用透析法制备叶酸修饰的包封PbS QDs的聚合物胶束,通过叶酸受体介导的内吞作用使其被HCT116细胞靶向摄取,再依次通过离心、硝酸溶解。然后,通过方波溶出伏安法测定Pb2+实现对HCT116细胞的检测。实验结果显示:铜基传感器的响应电流与HCT116细胞的浓度在102~104cells/mL范围内呈现良好的线性关系,检出限为40cells/mL。这表明该传感器用于检测HCT116细胞具有较好的灵敏度。第3章利用血糖仪作为检测器和包封葡萄糖的脂质体作为探针,构筑了一种操作简便、成本低廉的检测PLC的方法。首先,通过反相蒸发法合成了包封有葡萄糖的脂质体纳米载体。然后,将PLC加入到脂质体中后,PLC会立即水解脂质体,释放出包封的葡萄糖,所释放的葡萄糖可以通过使用低成本的市售个人血糖仪(PGM)进行定量测定。实验结果显示:血糖仪读出信号与PLC浓度在10~100 U/L范围内呈现良好的线性关系,检出限为2.3 U/L。该方法的检出限比以前报道的检测PLC活性方法的检出限低,并且此方法用于检测PLC的活性具有较好的灵敏度。
【学位授予单位】:陕西师范大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2018
【分类号】:O657.1;R735.35

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